食品中常见有机磷农药残留的检测方法

◎ 郭 巍

（黑龙江谱尼测试科技有限公司，黑龙江 哈尔滨 150000）

有机磷农药由于其具有良好的病虫害防治、易降解和农药残留时间短等优势而被广泛应用于我国水果和蔬菜的生长过程中，且随着我国城市化进程的不断增快，我国城市对于农产品的需求量不断增加，这在一定程度上促使了农民对于农药的使用。调查显示，我国有机磷农药在农业生产如瓜果、蔬菜上的使用站到了所有农药使用比例的75%左右。但是，由于有机磷农药自身的毒性十分大、对环境的污染大、在食品中有残留等特点，以及我国民众对于食品安全重视程度的日益增加，促使我国相关部门以及食品生产机构必须对有机磷农药残留进行检测，从而更好地确保食品安全。下文将主要针对食品有机磷农药检测的前期准备以及检测方法进行探讨，以期为我国食品有机磷农药残留检测提供参考。

1 提取

1.1 提取剂的选择

有机磷农药内的分子属于中等急性分子，根据相似相溶原理，有机磷的提取剂选择主要有丙酮、二氯甲烷、烃类化合物、乙酸乙酯以及其他溶剂，而在通常的实验过程中，提取剂一般选择乙腈，这主要是由于乙腈具有优良的有机磷溶解性能极易与水互溶等特点，乙腈还可以溶解其他类型的蛋白质等杂质。与乙腈相比，其他溶剂或多或少都有其缺陷，如石油醚不但能够溶解有机磷，还容易导致实验员麻醉；二氯甲烷具有毒性；丙酮的水溶性较低，而且也具有一定的毒性。因此，经过大量的实验证明，食品有机磷残留检测中提取剂选择性能优异的乙腈[1]。

1.2 提取方式的选择

在检测过程中，利用乙腈对食品有机磷农药残留进行提取时，就需要采用一定的提取方式，被检测物品溶解后将溶解后的溶液进行提取，然后对其提取物进行毒性机理分析和研究。提取方法的不同往往对提取时间和单次样品处理量等参数具有很大影响。提取方法有很多种，而经常应用于食品类产品的农药残留提取方法主要有：匀浆法、超声法、加速溶解法、浸泡法、微波萃取法和机械振荡法等。

通常情况下，利用匀浆法和涡旋法对食品有机磷农药进行提取检测工作时，两个方法的处理量较小，即检测过程中一次只能处理一个样品，这就容易导致食品有机磷农药残留提取中出现能耗大、效率低等特点，所以利用这两种方法对食品有机磷农药残留进行检测时对实验的要求较高。对于过夜浸泡法来讲，耗能较小，但是时间较长，这比较适用于对检测时间要求不高的检测。索氏提取法对于溶剂的使用较少，但缺点是提取时间较长。超声法及电动振荡法对于人工的消耗不大，而且所提取的样品质量较高，提取效率也比较快。因此，在实际检测中，常用超声法及电动振荡法来对食品有机磷农药残留进行提取[2]。

2 净化

2.1 常见样品净化方法

在实际检测时，为了确保检测结果的准确性，常在检测阶段前对样品进行净化处理，即对基体中容易对结果产生影响的杂质进行净化处理。研究发现，对检测结果出现干扰的杂质一般包括水、酯类化合物、色素、碳水化合物及酚类物质等。在食品检测过程中，常利用FPD检测器，该检测器对含N、P等化合物的检测准确性较高，所以在对食品有机磷农药残留检测时，常用其作为检测器械。

检测仪器选定后，在对食品进行有机磷农药残留检测时，其具体的净化方法如下。①对于水果和蔬菜等食品的净化而言，其主要杂质就是所包含的水分，因为水果和蔬菜含有大量的水分，而对其水果和蔬菜进行净化的步骤主要有过滤、盐析、静置分层、蒸发、过膜等。在过膜净化时，膜厚一般是0.25 μm。②对于含脂类物质较多的食品，净化主要是针对脂类进行的，由于脂类物质都是由大分子构成，而大分子一般对于检测仪器还具有一定的损害，所以要先去除大分子物质，其具体流程：过滤、蒸发、定容、过膜及其他等。这里，过膜厚度也是0.25 μm。③对于中草药类的净化工作，其净化步骤十分繁琐，具体如下：过滤、蒸发、定容、过SPE柱，然后再经过蒸发和定容。④对于茶叶的净化，具体步骤如下：浸泡、过滤、盐析、静置、分层、取液、蒸发、定容。

2.2 常见除杂试剂与除杂方法

对于不同样品而言，其所受到杂质的影响也各不相同，样品自身所携带的杂质对于结果的影响也各有不同，所以其对于结果的干扰和影响也各不相同，所以在食品有机磷残留检测过程中往往会出现检测结果准确度要求不同的情况。

3 常见的食品有机磷残留检测方法

3.1 色谱法

色谱法检测技术是一种常见的应用于食品农药残留检测中的定量检测方法，其优点是检测对象灵活多变、实用性强且具有高精度的分离效果，其检测准确性较高，最常用的检测方法有气相色谱法（GC）和高效液相色谱法（HPLC）。

气相色谱法（GC）主要是针对易挥发而不易分解的有机物进行分离、分解和分析的色谱技术，该技术是在20世纪80年代发现并被广泛应用于食品农药残留检测中的，由于其色谱柱的材质随着科技进步而不断发生升级和进步，所以其在食品有机磷农药残留检测中的应用优势十分明显。该方法的具体实施步骤如下：①将提纯和浓缩后的有机磷农药引入气相色谱柱内，促使不同有机磷农药固相分离。②根据分离结果绘制出相应的气相色谱图。③根据标准曲线和峰值图来对比分析，得出检测结果。研究发现，不同色谱柱的材质也会在一定程度上对检测结果产生影响，如利用不同极性的固定相来对有机磷农药进行分离，可检测范围在0.05～10 ng，而随着色谱柱材质的升级，近年来常用毛细管柱来替代原有的填充柱，这样就可以在一定程度上提高检测仪器的灵敏性和分辨率，该过程对检测的前期处理要求十分严格。随着气相色谱法应用的不断普及，其在食品、化妆品以及血液检测中都发挥着不可替代的作用。

高效液相色谱法（HPLC）是液相色谱和气相色谱相结合的一种的新型的分析方法，该方法主要是便于实现自动化，且分析过程中有机磷农药不易汽化、稳定性较高，其检测准确性及稳定性都要比气相色谱分析法好。有专家学者对苹果残留的有机磷农药进行检测，结果发现检测结果可以精确到1.0 μg左右。通常情况下，对有机磷农药残留检测时，一般会采用色谱柱C18，且利用甲醇和乙腈来作为反相色谱。该方法由于兼用了液相色谱和气相色谱法，所以其检测结果会更有针对性[3]。

3.2 快速免疫检测分析法

快速免疫检测分析法就是将检测技术与免疫技术相结合的一种高效、高精度的微量测定方法，其在药物、激素以及食品农药残留检测中应用都十分普遍。该方法中常用的检测手段主要包括荧光免疫法、放射免疫法、酶免疫法及流动注射免疫法。

3.2.1 荧光免疫法

荧光免疫法是将待检测食品残留农药的含量与处于游离态的荧光标记物之间的含量进行对比分析，该方法主要需要使用特定的荧光素对结果进行显色来分析其检测效果。

3.2.2 放射免疫法

放射免疫法就是将混合样品培养后对其同位素进行追踪和观察，检测后对没有与抗体进行结合的农药含量进行标定。研究发现，在利用放射免疫法对毒草的毒性进行测试时，其测定区域较宽泛，且操作简便，检测后不需要再经过纯化处理。

3.2.3 酶免疫分析法

酶免疫分析法主要是利用了抗原和抗体结合的特异性，但是其与抗原、抗体检测的不同之处在于该检测对象换成了酶和辅酶材料，该方法的优点在于成本低、检测效率高且容量较大，但是与其他检测方法相比，该检测方法的前期资金投入较大，且其高灵敏度的抗体制备难度较大。因此，酶免疫分析法只适用于特定结构的单残留物质检测和分析，而对于未知残留物的检测局限性比较大。

3.2.4 流动注射免疫法

流动注射免疫法的特点主要是抗体需要固定在可更换的一次性膜上。

简而言之，免疫法检测是一种操作简便、灵敏度高且效率高的一种生物检测方法，免疫法对有机磷农药残留进行检测时，其核心在于制备出有机磷抗体，虽然其检测对象和检测精确度还有待检验，但是目前我国各主要食品农药检测机构常用免疫法来对农药残留进行检测和分析。

3.3 酶抑制法

酶抑制法的原理就是利用酶的活性在有机磷以及其他物质的影响下导致其活性受到干扰和抑制。在检测过程中，若检测样品内不含有有机磷农药残留，那么酶的活性就不会受到影响，若有有机磷农药残余时，再结合pH值、吸光度、荧光度以及其他参数变量来对有机磷农药存留进行分析和研究。例如，在利用分光光度计进行吸光度测试时，需要根据标准曲线来判断有机磷农药残留的状况，在实际研究检测过程中，利用乙酞胆碱酶作为催化酶，利用其活性来对有机磷的存在进行检测，并根据吸光度来对其含量进行定量分析。由于该方法对于样品的前处理要求较低，且能够确保样品在极短的时间内获得检测结果，所以适用于一些需要快速检测的样品，且容易在食品检测和生产企业进行推广。但是，该检测方法也存在着检测准确性不高且药品回收率低等缺点，所以还需要后期的进一步优化。

4 结语

我国政府和民众对于食品安全的重视程度逐年提高，政府监管机构以及企业自身对于食品内有机磷农药残留物的检测也对后期政策执行和生产起着指导性的作用。因此，建立健全有机磷农药检测机制，规范有机磷农药的使用和食品安全，对我国食品安全具有积极的影响和意义。

[1]王福璇.食品中有机磷农药残留检测的前处理方法[J].农技服务,2017，34（7）：153-154.

[2]杜卫侠.食品中常见有机磷农药残留的检测方法[J].食品安全导，2016（6）：59.

[3]池浩超.浅析食品中有机磷农药检测方法[J].生物技术世界，2014（12）：4.