局部组织工程室诱发组织新生的实验研究

雷忱　王彪

摘要：目的 探索组织工程室诱导脂肪组织新生的模式。方法 取成年雄性新西兰大白兔12只，分离背部脂肪瓣将其一半植入背部同期构建的组织工程室内，1个月时，进行取材。取腹股沟脂肪瓣作为对照组。结果 1个月时，组织工程室内构建物未充满工程室，小室内脂肪组织与小室外体积相当。使用排水法测量体积为（11.17±1.97）ml，增大（744±132）%。组织学观察为成熟的脂肪组织。结论 脂肪组织工程室不仅能诱导其内的脂肪再生。亦可诱导脂肪组织工程室外的脂肪组织再生。

关键词：组织工程脂肪；轴心血管；组织工程室；脂肪瓣

中图分类号：R318 文献标识码：A 文章编号：1006-1959（2017）26-0034-03

Abstract：Objective To explore the differentiation of adipose tissue of newborn tissue engineering chamber model.Methods 12 adult male New Zealand white rabbits were implanted into the tissue engineering room with the back of the fat flap and the back half of the flap.Rats were killed at 1 month.The inguinal fat flap as the control group.Results At 1 month，the tissue engineering chamber was not filled with engineering chambers，and the fat cells in the chambers corresponded to the small outdoor volume.The drainage volume was（11.17±1.97）ml，an increase of （744±132）%.Histological observation of mature adipose tissue.Conclusion Adipose tissue engineering room can not only induce the fat regeneration inside.Adipose tissue engineering can also induce the regeneration of adipose tissue outside.

Key words：Tissue engineered fat；Axial vessels；Tissue engineering chamber；Fat flap

软组织缺损的修复是整形科医生面临的挑战之一。近年来随着人工替代材料及自体脂肪移植技术的发展，能够修复体积较小的软组织缺损。但是对于诸如乳房、肿瘤切除术、先天发育不良或外伤等造成的大体积软组织缺损，却依然缺乏可行的解决方案。传统的金标准皮瓣修复会不可避免地造成继发供区缺损，且手术难度大。组织工程技术的提出，有望在软组织缺损领域产生一种全新的修复方式：使用自身组织修复缺损的同时，不造成继发的大体积缺损。基于传统组织工程室三要素的研究虽然能构建出由成熟脂肪细胞构成的工程化脂肪。但其体积均为超出1ml，这是由于传统的组织工程仅通过周围的组织向支架材料内生长的方式重构工程化组织的血管。而这样的新生血管方式在短时间内难以使大体积的工程构建物完 成血管化。因此，为了构建大体积的工程化组织，其在短时间内的血管化方式被逐渐重视。

2003年，Hofer[1-2]等人通过在刚性硅胶小室内引入完整的轴心血管在体内构建出了体积超过1 ml的新生构建物，并将这种技术命名为组织工程室（TEC）技术[3]。其后的研究进一步指出，组织工程室内渗出的纤维蛋白支架决定了最终构建物的体积。本实验室的前期研究也发现，部分实验组中，组织工程室外的脂肪组织也出现了体积地扩增。并且，这种体积地增大速度高于实验动物本身体积速度。基于此，我们提出假说：将组织工程室中渗出液引流至带轴心血管的脂肪组织能激发脂肪组织的自发再生。

1 材料与方法

1.1实验动物

取成年雄性新西兰大白兔12只，每只体重约2.0～2.2 kg（福建医科大学动物实验中心提供）。实验动物均为SPF级，层流室内饲养。

1.2组织工程室准备

取边长2 cm×2 cm×1 cm长方体方体型硅胶模具，并于各侧壁打孔，间隔0.5 cm，并于两对称侧壁分别取0.5 cm×0.5 cm方形孔洞，用于工程室放置及引流液引流，完成后高压消毒备用。

1.3組织工程室模型模型构建方法

手术前1 d，兔背部备毛。手术当天，使用10%水合醛0.3 ml/100 g腹腔注射麻醉，麻醉满意后，在兔背部正中取5 cm手术切口，切开至皮下，分离一侧肩胛骨上脂肪瓣，使其与周围组织充分游离，使用排水法测得脂肪瓣体积后，实验组将脂肪瓣末端植入预先高压消毒的工程室中，调整位置后丝线固定于兔背部。取兔腹股沟3 cm切口，分离修剪腹股沟脂肪瓣，使用排水法测得脂肪瓣体积后，调整位置后丝线固定于兔背部。

1.4形态学及免疫组化染色

分别于14 d、28 d时完整切取组织工程室内工程化组织，保存于多聚甲醛固定24 h，然后石蜡包埋切片，行苏木素-伊红（HE）染色。

1.5统计学方法

计量资料以（x±s）表示，应用SPSS 13.0统计软件分析，组间比较采用随机资料单因素方差分析，以P<0.05为差异学有统计意义。

2 结果endprint