乌灵参镇静催眠有效部位研究*

戴 一，朱向群，吴灵刚

（安徽新华学院药学院，安徽合肥 230088）

乌灵参为炭角菌科黑柄炭角菌Xylaria nigripes (KI.) Sacc的菌核，据《四川中药志》记载，该药材主产于四川、云南等地，性温，味微苦，能益气补血，民间主要用于镇静、安眠、补肾等[1]。乌灵参所含化学成分丰富，主要包括多糖、酚类、萜类及生物碱等[2]。现代药理学研究表明，乌灵参除具有镇静催眠作用外，还具有抗氧化[3]、降血糖[4]及抗炎保肝等作用[5]。但目前对乌灵参产生镇静催眠作用的具体成分研究较少，其镇静催眠有效部位的研究亦未见报道。为揭示乌灵参镇静催眠作用的物质基础，本研究采用不同浓度乙醇对乌灵参进行超声提取，并将提取物给予小鼠灌胃，观察小鼠外观行为及与戊巴比妥的协同作用，以期为确定乌灵参镇静催眠的有效部位提供依据。

1 材料

1.1 仪器 PT-10435s型电子天平（天津市顺诺仪器科技有限公司），CB3201数字描记式小动物测定仪(中国川北电子工业公司设计制造)，CJ-060S超声清洗仪（深圳市超洁科技实业有限公司），IKA RV8 V旋转蒸发仪(艾卡(广州)仪器设备有限公司)，DZF-6050A型真空干燥箱（上海坤天仪器有限公司）。

1.2 药材与实验动物 乌灵参，购于亳州药材市场，产地四川，经安徽新华学院陆松霞老师鉴定为Xylaria nigripes(KI.)Sacc的菌核。实验动物：昆明种小鼠，18g～22g，雌雄各半，由安徽医科大学实验动物中心提供(合格证号：皖医实动准字第01号) 。

2 方法与结果

2.1 各极性部位样品溶液的制备 称取乌灵参粉末（过4号筛）5份，每份50.0g，分别用不同浓度乙醇（100%乙醇、75%乙醇、50%乙醇、25%乙醇、水）超声提取，固液比为1g：10ml，每份用同种浓度乙醇提取3次，每次30min，提取液合并浓缩成浸膏状在60℃真空干燥48h，得不同浓度乙醇提取物，计算得膏率。结果：各组得膏率均在10%以上，且随着乙醇浓度的增加，得膏率逐渐降低；乙醇浓度达到50%以后，得膏率降低并不明显。见表1：

表1 乌灵参醇提物得膏率

2.2 小鼠自主活动实验[6]昆明种小鼠60只，随机分成6 组，每组10只，即空白对照组、100%乙醇提取物组、75%乙醇提取物组、50%乙醇提取物组、25%乙醇提取物组、水提取物组。各组小鼠灌胃给药(称取适量浸膏以生理盐水溶解，给药容积0.5ml/20g，给药剂量5.0g提取物/kg)，空白对照组给予生理盐水，其余各组给予受试药物。给药30min后测定10min内小鼠自主活动次数。结果：与其它各组比较，乌灵参100%乙醇提取物组能明显减少小鼠自主活动次数，说明该剂量下乌灵参100%乙醇提取物对小鼠具有明显镇静作用，为乌灵参镇静作用的有效部位。见表2：

表2 乌灵参不同浓度乙醇提取组对小鼠自主活动的影响(±s , n=10)

组别 剂量(提取物 g/kg) 10min内活动次数空白对照组 -- 164.6±18.3水提取物组 5.0g 155.3±17.1 25%乙醇提取物组 5.0g 150.4±23.7 50%乙醇提取物组 5.0g 138.1±19.8 75%乙醇提取物组 5.0g 113.9±21.3无水乙醇提取物组 5.0g 100.8±24.1

2.3 对戊巴比妥钠阈下催眠剂量下小鼠的催眠作用[7]另取小鼠40只，随机分组为2组，空白对照组和100%乙醇提取物组，每组20只。小鼠灌胃（剂量、容积同2.2）给药30min后，分别腹腔注射30mg/kg戊巴比妥钠，观察30min各组小鼠入睡率(以翻正反射消失达1min以上为入睡)。结果：乌灵参100%乙醇提取物可明显增加阈下剂量戊巴比妥钠引起的小鼠入睡率。见表3：

表3 乌灵参100%乙醇提取组对小鼠入睡的影响(n=20)

3 讨论

乌灵参作为一种名贵药材，主要用于中枢神经系统疾病的治疗，但其药理作用物质基础的研究较少。本研究采用不同浓度乙醇提取乌灵参，发现各组得膏率在均在10%以上，且随着乙醇浓度的增加，得膏率逐渐降低。有文献报道，乌灵参中含多糖、酚类、萜类及生物碱等化学成分[2]。同时，乌灵参中还含有一些初级代谢产物，这些成分大多极性较大，在水中有较好的溶解度，因此，低浓度乙醇有较好的得膏率。本研究发现，乌灵参100%乙醇提取物对小鼠的自主活动次数具有明显的抑制作用，且与戊巴比妥具有协同作用，能增加阈下剂量戊巴比妥钠引起的小鼠入睡率，提示乌灵参100%乙醇提取物具有明显的镇静催眠作用，为乌灵参镇静催眠的有效部位。