GC—ECD检测马齿苋中六六六和滴滴涕的农药残留

谷勇 唐文丽 罗成 侯杰荣

【摘 要】 目的： 考察马齿苋中六六六（BHC）和滴滴涕（DDT）农药残留量，为该药食两用药材的质量控制提供依据。方法：采用GC-ECD对马齿苋中BHC（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC）、滴滴涕（PP'-DDE、OP'-DDT、PP'-DDD、PP'-DDT）8 种有机氯类农药残留的限量检测。结果：所建立的含量测定方法线性关系良好，平均回收率为91.9%～97.3%，RSD为1.5%～4.2%，检出限为0.0026～0.032μg·L-1。结论： 该方法测定结果准确，灵敏度高，适合于马齿苋中有机农药残留量的测定。

【关键词】 马齿苋；六六六；滴滴涕；有机农药残留

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2018）04-0025-03

Abstract：Objective To establish a method for determination of hexachlorocyclohexane（BHC） and clofenotane （DDT） pesticide residues in Portulacae oleracea L. by GC-ECD，and provide the basis for quality control of the medicine and food dual-purpose. MethodsUsing gas chromatography （GC） for limited detecting the eight kinds of organochlorine pesticide residues， such as BHC （α-BHC，β-BHC， γ-BHC， and δ-BHC） and DDT （4，4'-DDE，4，4'-DDD，2，4'-DDT，and 4，4'-DDT） in Portulacae oleracea. Results The detection linearity of BHC and DDT were very good， the average recovery rates were 91.9%～97.3%，1.5%～4.2% RSD，The detection limitation was 0.0026～0.032μg·L-1. Conclusion The established method is accurate， highly sensitive， and can be used for the determination of organchlorinated pesticide residues in Portulacae oleracea L..

Keywords：Portulacae oleracea L.；BHC； DDT； Organochlorine pesticide residues

马齿苋来源于马齿苋科植物马齿苋Portulaca oleracea L.的干燥地上部分。在《本草经集注》、《新修本草》等古籍中均有记载，又称为五行草、马齿菜、长命草等。我国南北各地均有分布，生于菜园、农田、路旁等，盛产于四川，在我国作为传统中药已经有数千年的历史。其味酸性寒，归肝、大肠经，具有清热解毒、凉血止血、止痢的功效，用于热毒血痢、脓肿、湿疹、丹毒、毒蛇咬伤、便血、痔血、妇女崩漏下血[1]。马齿苋含有有机酸、黄酮、多糖等药用成分，还富含氨基酸、维生素C、维生素B1及维生素B2等，具有较高的药用及食用价值[2-3]。其被我国卫计委列入101种药食同源名单，属药食两用植物，在各地被广泛用作菜肴。为保障该药食两用植物的安全性，笔者实验采用GC-ECD对其中的六六六（BHC）和滴滴涕（DDT）共8种有机氯农药残留量进行了检测[4-6]，了解该类农药在马齿苋中的残留水平，现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent 7820A 气相色谱仪系统（安捷伦科技有限公司），ECD检测器；湖南湘仪TD3（800B）自动平衡离心机（湖南湘仪公司）；KQ-50B 型超声清洁器（昆山舒美）；Sartorius BT 25S电子天平（德国赛多利斯）。

1.2 材料 二氯甲烷和石油醚（60～90℃）为色谱纯，氯化钠和无水硫酸钠为分析纯。8种有机农药标准品：α-BHC（GBW（E）081427）、β-BHC（GBW（E）081428）、γ-BHC（GBW（E）081429）、δ-BHC（GBW（E）081430）、PP'-DDE（GBW（E）081683）、OP'-DDT（GBW（E）081635）、PP'-DDD（GBW（E）081632）、PP'-DDT（GBW（E）081662），由國家标准物质研究中心提供。

3批马齿苋样品购自宜宾市不同地，经西南医科大学侯杰荣主管中药师鉴定为马齿苋科植物马齿苋。

2 方法

2.1 GC色谱条件 弹性石英毛细管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm）OV-1701，63Ni-ECD 电子捕获检测器。进样口和检测器温度分别为230℃、 300℃，进样方式为不分流进样，进样量1μL。程序升温：初始温度150℃，8℃/min升至230℃，保持15 min。理论塔板数按α-BHC峰计算不低于1×106，相邻2 个色谱峰均得到较好的分离，峰型对称性良好。

2.2 对照品储备液的制备 精密称取各对照品适量，用石油醚制成每毫升约含0.25 mg的溶液，摇匀即得对照品储备液，精密量取上述溶液50μL，置25 mL 量瓶中，用石油醚制成每毫升含250 ng的混合储备液；再精密量取该混合储备液1 mL置10 mL 量瓶中，用石油醚制成每毫升含25 ng 的混合对照品溶液，摇匀即得。

2.3 供试品溶液的制备 取适量于60℃干燥3 h的样品，粉碎成细粉，取3 g，精密称定后置于200 mL 具塞锥形瓶中，加入20 mL水浸泡，过夜。精密加入50 mL丙酮，称定质量，超声处理35 min，放冷，再称定质量，加丙酮补充减少质量，加入氯化钠6 g，精密加二氯甲烷25 mL，称定质量，超声处理20 min，放冷，再称定质量，用二氯甲烷补充减少质量，静置分层，将有机相快速转入装有一定量无水硫酸钠的具塞锥形瓶中，放置4 h。精密量取40 mL，在38 ℃水浴上减压浓缩到近干，加入少量石油醚如前反复操作除净二氯甲烷及丙酮，用石油醚溶解并转移至10 mL具塞刻度离心管中，加石油醚精密稀释至5 mL，小心加入硫酸1 mL，振摇1 min，离心（3000 r/min）10 min，吸取上清液备用。

3 方法学考察

3.1 溶剂空白试验 以提取溶剂石油醚作为空白样品直接进气相色谱仪，考察石油醚溶剂的干扰。结果见图1。

3.2 标准曲线及线性关系考察 精密吸取混合对照品溶液1、2、5、10、15、20 μL，按相应色谱条件进样，以峰面积计算，得相应农药的回归方程。结果见表1。

3.3 精密度试验 取同一混合对照品溶液，按2.1色谱条件连续进样6次，得到各组分各次的峰面积，计算相对标准偏差，RSD在1.25%～2.92%，表明进样精密度良好。

3.4 稳定性试验 取同一份供试品，按照拟定方法进行供试品的制备，分别于 0、6、12、24 h 间隔进样4次，测定各对照品的峰面积积分值，α-BHC、γ-BHC、β-BHC、δ-BHC的RSD值分别为2.8%、1.7%、2.6%、4.1%， PP′-DDE、OP′-DDT、PP′-DDD、PP′-DDT的RSD值分别为3.3%、3.1%、1.5%、2.7%。结果表明样品在 24 h 内稳定。

3.5 重复性试验 取马齿苋样品 6 份，按照拟定的方法进行供试品的制备和检测，测定结果α-BHC、γ-BHC、β-BHC、δ-BHC、 PP′-DDE、OP′-DDT、PP′-DDD、PP′-DDT的RSD值分别为2.4%、1.1%、2.9%、3.4%、1.5%、2.2%、2.7%、3.6%，表明该方法重复性良好。

3.6 加样回收率试验 精密称定含量已知的马齿苋样品 6份，每份约1.5g，分别加入样品含量80%、100%、120%的各成分对照品，照2.3方法制备供试液，计算各组分回收率及RSD值，结果见表2。

3.7 样品测定 精密吸取供试品溶液平行进样2次，取均值，按外标法以峰面积计算马齿苋中8种有机氯农药的残留量，测定结果见表3。

4 讨论

在中药材生产中，存在肥料施用不科学、滥用农药等问题，导致药材质量不稳定或者下降。大量使用的化肥、农药，对我国的生态环境造成巨大破坏。中药材在种植过程中，不可避免地会有农药残留。中药材成为化学农业的“受害者”。农药残留是中药材不可回避的问题，也是藥品安全性的重要指标之一，《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》规定：含总BHC（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC ）不得超过0.1mg·kg-1；含总滴滴涕（PP′-DDE、OP′-DDT、PP′-DDD、PP′-DDT）不得超过0.1mg·kg-1。实验的结果表明，马齿苋药材中BHC和DDT测定结果均低于限量。本实验采用的是对卤代烃有特殊选择性的ECD检测器，灵敏度高，选择性好，所建立的检测方法准确、可行， 可用于马齿苋中8种有机氯农药的含量检测。

参考文献

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].2015版.北京：中国医药科技出版社，2015：49.

[2]牛广财，朱丹.马齿苋化学成分及其药理作用研究进展[J].安徽农业科学，2005，33（6）：1090-1092.

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