对比分析菌落总数检测片与国标法用于生鲜乳中菌落总数的检测

,

(河北省兽药监察所, 河北 石家庄 050000)

0 引言

食品安全国家标准中规定：生鲜乳中菌落总数应小于或等于 200 万 cfu/mL。目前，生鲜乳菌落总数的测定方法主要为国标法，关于菌落总数检测片检测生鲜乳中菌落总数的报道较少，本试验主要通过将菌落总数检测片法和国标法的检测结果作为对比，以讨论菌落总数检测片方法的可行性。

1 材料与方法

1.1 仪器与设备

生化培养箱；自动压力蒸汽灭菌器；玻璃试管；移液枪。

1.2 材料与试剂

营养琼脂；生理盐水；细菌总数检测片(Charm)；一次性灭菌枪头；一次性使用培养皿。

1.3 试验内容及方法

将随机抽取的50批生鲜乳样品分别进行检测片法和国标法检测，国标法检测作为对照组，检测片法检测作为试验组。对照组检测依据国标法GB 4789.2-2010。用无菌枪头吸取生鲜乳样品 25 mL置 225 mL装有无菌生理盐水的无菌均质袋中，拍打 1～2 min，选择三个适宜稀释度(10-3、10-4、10-5)进行稀释，分别将三个稀释度样品于无菌培养皿内，同时作空白对照。将培养基倒入培养皿内，使其混合均匀。琼脂凝固后置于(36±1)℃ 培养箱内倒置培养 (48±2) h，记录稀释倍数和相应的菌落数量，菌落计数以菌落形成单位(CFU)表示。

试验组应用菌落总数检测片进行检测。分别取上述对照组中三个稀释度(10-3、10-4、10-5)的样品1 mL加入检测片内，同时作空白对照。标记检测片，提起粘合片，竖直加入样品，重新盖上粘合片，保持表面平整。培养方法与菌落计数同对照组。

1.4 结果计算

选取菌落数为30～300CFU，无蔓延菌落生长的培养皿计数菌落总数。若只有1个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算2个平板菌落数的平均值；若2个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按计算公式：N=ΣC/(n1+0.1n2)d。(注：N—样品中菌落数；∑C—平板菌落数之和；n1—第1稀释度平板个数；n2—第2稀释度平板个数；d—稀释因子。)

1.5 统计学方法

2 检测结果

从表1可知，两组空白对照均无菌落生长；在相同条件下，计算2组菌落总数结果显示，试验组的菌落总数与对照组相比较低，但差异不显著(P>0.05)。

表1 两种不同检测方法对生鲜乳菌落总数检测的结果比较

注：与对照组比较，*P<0.05

3 讨论

生鲜乳的质量检测包括理化检验以及菌落总数等，菌落总数是反应生鲜乳质量的一个重要指标。其检测方法包括国标法和快速检测方法。传统的国标法检测生鲜乳中的菌落总数较为准确，但是操作相对复杂，使用的材料也相对较多。随着检测技术的快速发展，不断研发出先进的检测方法。菌落总数检测片是用来检测食品中菌落总数的一种新方法，它以标准琼脂方法为基础，其培养基中含有酶的底物2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)，此种底物可以被活菌还原成红色。所以，在经过加样和培养后，细菌菌落在检测片上显出红色的菌斑，方便观察和计数。菌落总数检测片是一种可以代替普通培养皿的新型检测产品，优点包括无需配制培养基，方便携带和使用，培养时可叠加，节省空间。其操作和结果观察都较为简便可靠。综上所述，应用菌落总数检测片检测生鲜乳中菌落总数具有一定的应用价值，且操作方便，易于携带，值得推广。