韩 秋
(辽宁省辽阳市结核病医院 检验科,辽宁 辽阳 111005)
为了研究不同实验室检测方法对结核分歧杆菌患者灵敏度和特异度的影响,我们选取了2016年1月~12月我院采集的836份结核标本进行实验室检测,报道如下。
1.1 一般资料:选取2016年1月~12月我院采集的836份结核标本进行实验室检测,标本来源包括患者的痰液、心包积液、肺泡灌洗液、腹透液、胸水、尿液以及腹水等。对所有标本均使用结核分歧杆菌进行培养,并采取罗氏改良培养法、荧光定量PCR法和涂片金胺O染色法进行检测,采取T-SPOT.TB法对患者的静脉血检测,分析患者的特异致敏淋巴细胞。
1.2 方法:在使用改良落实培养法进行检测时,采用法国生物梅里埃公司的改良罗氏培养基,按照相关的试验操作流程进行检测。在使用荧光定量PCR法进行检测时,采用广东达安生物技术有限公司的荧光定量PCR试剂,Roche公司Co-bas Z 480荧光定量PCR仪,按照试剂和仪器的说明书进行检测,操作过程中包括样本处理、核酸提取、PCR扩增等。在使用涂片金胺O染色法进行检测时,采用珠海贝索生物技术有限公司金胺O染色液进行检测,严格按照检测标准和实际说明书进行操作。在使用T-SPOT.TB法进行检测时,采集患者的肝素肝素抗凝外周血5 mL,英国Oxford Im-munotec公司的T-SPOT.TB试剂,按照说明书的操作规范进行检测[1]。当病原结果与患者的检测标本不一致时,对标本的总核酸进行提取,对核算进行DNA序列测定,以测序结果作为检测金标准。
836份结核标本共检出阳性标本41例阳性,阳性率为4.9%,罗氏改良培养法的灵敏度较高,达到100.0%,荧光定量PCR法的特异性较高,达到100.0%,T-SPOT.TB的灵敏度较高,达到96.9%,但是特异度相对较低,为82.0%,涂片金胺O染色法的灵敏度最低,为63.8%。见表1、表2。
表2 836份结核标本的检测结果
表1 836份结核标本的样本来源和阳性率
在本次研究中,罗氏改良培养法的敏感度达到了100.0%,缺点是需要的培养时间比较长,可能会造成患者病情的延误,并且培养基上的菌落特征还需要采取其他方式进行下一步的辨别和鉴定。荧光定量PCR法在临床上的应用比较广泛,能够用于病毒、难生长菌和慢生长菌的检测和辨别,本次研究结果显示,荧光定量PCR法的特异度达到100.0%,检测结果比较准确,并且使用荧光定量PCR法在检测低排菌量标本时具有较大的优势[2]。荧光定量PCR法在检测低排菌量标本时具有较大的优势,并且特异度较高[3]。T-SPOT.TB法能够用于潜伏期的结核分歧杆菌感染检测,但是不能准确区分结核感染是活动性还是潜伏期。在对患者进行实验室检测时,医院要根据患者的特征和需求采取合适的方法进行检测,提高检测的科学性,获得更加准确的诊断结果,为患者的治疗提供科学依据。