焦作某医院中段尿分离粪肠球菌与屎肠球菌耐药性分析

任艳利 ，张伟 ，侯豫娜 ，薄涛 ，商安全

(1.焦作市第五人民医院检验科，河南 焦作 454000；2.同济大学附属同济医院检验科，上海 200065)

肠球菌是人类胃肠道与泌尿道的正常菌群，也是院内感染的常见病原菌之一。随着侵入性体内插管、放化疗、机械式通气呼吸机、激素类、生物制剂及广谱抗菌药物的使用，使得肠球菌尤其是粪肠球菌与屎肠球菌的分离率及耐药性不断增加[1]。在细菌性尿路感染中，粪肠球菌与屎肠球菌的分离率是仅次于大肠埃希菌的致病菌[2]。由于肠球菌细胞壁厚，耐药机制复杂，且对克林霉素、头孢菌素等多种药物天然耐药，临床治疗可选择药物有限[3]。为了解本院中段尿分离粪肠球菌与屎肠球菌耐药性，对2014年1月至2017年12月间中段尿培养分离出的326株粪肠球菌与屎肠球菌耐药性进行回顾性分析，为经验治疗及感染防控提供参考。

1 材料与方法

1.1 菌株来源 菌株来源于本院2014年1月至2017年12月门诊及住院送检的中段尿培养分离病原菌，同一患者剔除相同病原菌。

1.2 质控菌株 粪肠球菌ATCC29212，屎肠球菌ATCC51299。

1.3 方法 按照 《全国临床检验操作规程》（第4版）[4]对中段尿标本进行接种、培养及分离。标本留取严格执行无菌操作，经中段尿定量培养，革兰阳性菌大于104CFU/ml作为感染病原菌，分离培养出的粪肠球菌与屎肠球菌纳入分析数据。采用珠海黑马微生物鉴定产品进行细菌鉴定及药敏实验。药物敏感性试验依据美国实验室临床标准化委员会（CLSI）2015 版文件进行判定[5]。

1.4 数据分析 应用WHONET 5.6软件对药敏数据进行分析处理，采用SPSS 22.0统计软件对数据进行统计分析，计数资料采用χ2检验分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 粪肠球菌与屎肠球菌的检出率 2014年1月至2017年12月中段尿培养标本共分离出粪肠球菌与屎肠球菌326株，其中粪肠球菌188株，占57.67%；屎肠球菌138株，占42.33%。

2.2 粪肠球菌与屎肠球菌对常用抗菌药物的药敏结果 见表1。

3 讨论

来自中段尿分离培养出的326株粪肠球菌与屎肠球菌，粪肠球菌188株，占57.7%，屎肠球菌138株，占42.3%，粪肠球菌分离率高于屎肠球菌，差异有统计学意义（χ2=15.337，P<0.05），与文献报道一致[6]。

药敏结果显示，粪肠球菌与屎肠球菌耐药率差别较大，仅有高浓度庆大霉素和利奈唑胺对两种肠球菌的耐药性相近，差异无统计学意义 （P＞0.05）。粪肠球菌仅对氯霉素和四环素耐药性高于屎肠球菌，而屎肠球菌对氨苄西林、红霉素、青霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、呋喃妥因、利福平耐药性均高于粪肠球菌，与所报道文献一致[7]。

表1 粪肠球菌与屎肠球菌对各抗菌药物耐药率

粪肠球菌对青霉素和氨苄西林的耐药率分别为4.8%、2.7%，屎肠球菌对青霉素和氨苄西林的耐药率分别为 93.5%，92.8%，提示粪肠球菌引起感染时可使用青霉素、氨苄西林经验治疗，而屎肠球菌则不适合使用此类药物，其原因可能由于屎肠球菌青霉素结合蛋白和青霉素亲嗜性减低，对青霉素和氨苄西林的敏感性降低有关[8]。粪肠球菌和屎肠球菌对呋喃妥因敏感性均较高，可作为泌尿系感染经验治疗的首选药物，但呋喃妥因对肾脏有一定的毒性，应谨慎使用[9]。粪肠球菌与屎肠球菌对高浓度庆大霉素耐药率分别为68.6%和76.1%，可能是由于肠球菌产生的氨基糖苷修饰酶导致其耐药性强[10]，因此在经验性用药时，不建议使用高浓度庆大霉素与作用于细胞壁抗生素联合使用。

粪肠球菌与屎肠球菌对环丙沙星的耐药率分别为29.8%和88.4%，粪肠球菌与屎肠球菌对左氧氟沙星的耐药率分别为23.4%和81.9%，差异均有统计学意义（P＜0.05），因此粪肠球菌适宜使用此类抗菌药物进行治疗，但因此类药物可对儿童骨骼产生不良影响，即便药敏结果为敏感，也不应选用[11]。粪肠球菌与屎肠球菌对红霉素耐药率分别为81.4%和 93.5%，两者耐药率菌均超过 80%，高耐药率的原因可能是由于肠球菌erm基因编码红霉素甲基化酶表达，导致红霉素靶点位置发生改变[12]。粪肠球菌与屎肠球菌对利奈唑胺的耐药率分别为1.1%和2.9%，粪肠球菌与屎肠球菌耐药率差异无统计学意义（P＞0.05），两种肠球菌对利奈唑胺耐药率较文献报道[13，14]数据稍高，屎肠球菌对利奈唑胺耐药率稍高于2016年中国CHINET细菌耐药性监测耐药率[15]，使用χ2检验与其报道耐药数据分析，差异有统计学意义（χ2=38.340，P＜0.05）。肠球菌对利奈唑胺这种新型抗菌药物耐药的原因，可能是因为23s rRNA突变、氯霉素－氟甲砜霉素耐药（cfr)基因导致[16]，也可能与本院高频率使用利奈唑胺治疗肠球菌感染有关。粪肠球菌与屎肠球菌未检出对万古霉素与替考拉宁耐药菌株，说明万古霉素与替考拉宁仍对粪肠球菌与屎肠球菌有着很好的抗菌活性，但国内已有耐药菌株的报道[17]，作为肠球菌感染的最后一道防线，临床医生应慎重使用此类药物，以延缓耐药菌株的出现。由于屎肠球菌与粪肠球菌对药物敏感性差异较大，因此要求对菌种准确鉴定到种，依据药敏结果使用抗生素。

综上述所，2014年1月至2017年12月中段尿培养标本中，粪肠球菌分离率高于屎肠球菌，粪肠球菌多数药物耐药性要低于屎肠球菌，治疗肠球菌引起的尿路感染，要求实验室准确鉴定到菌种，并依据抗菌药物敏感性试验来作为药物使用的依据。检出的利奈唑胺耐药粪肠球菌与屎肠球菌，应引起临床医生与感控人员的注意，加强细菌耐药性检测，防止细菌耐药性的增加。