黄粉虫蛹不同处理方式对人工繁育川硬皮肿腿蜂的影响

吴 广，王蕊蕊，熊翅鸿，郭春晖，杨振德

（广西大学林学院，南宁 530004）

川硬皮肿腿蜂（Scleroderma sichuanensis）隶属于膜翅目（Hymenoptera）肿腿蜂科（Bethyli⁃dae），是继管氏肿腿蜂（S.guauiXiao et Wu）后于1994年在四川泸县发现的寄生天牛及其他一些钻蛀性害虫的优势外寄生蜂，能在寄生过程中永久性麻痹寄主，具有重要的生物防治价值[1-6]。川硬皮肿腿蜂寄主范围广，搜索、攻击能力强，寄生率高，发育周期短，繁殖力强，目前已成功地实现利用替代寄主——黄粉虫（Tenebrio molitor）大规模繁殖肿腿蜂，初步具有了规模化生产的能力[7-8]，并展开了一系列防治试验和应用研究，在云斑天牛（Batocera horsfieldi）[9]、锈斑楔天牛（Saperda balsamifera Motschulsky）[10]等部分天牛防治上已取得良好的成效，同时，通过与致病菌结合进行携菌防治[11]等应用研究上也具有较快地发展。虽然关于利用黄粉虫蛹人工繁育川硬皮肿腿蜂及管式肿腿蜂的研究报道较多，但对于如何处理黄粉虫蛹繁殖川硬皮肿腿蜂的报道尚少见，并且不同蛹龄黄粉虫蛹最佳乙醇处理时长、替代寄主不同低温处理及其处理时长等对肿腿蜂寄生效果的影响尚不清楚[12-14]。本文研究乙醇处理不同蛹龄黄粉虫蛹及不同低温处理黄粉虫初化蛹对繁育川硬皮肿腿蜂的影响，旨在找出黄粉虫蛹乙醇和低温处理的最佳条件，为利用黄粉虫蛹高效繁殖川硬皮肿腿蜂提供参考。

1 材料与方法

1.1 寄主和蜂种

黄粉虫幼虫购于广西南宁花鸟市场，在实验室内用麦麸饲养，以少量水果皮补充水分，饲养至3代以上，待幼虫化蛹时挑出虫蛹，电子天平称重，挑选体重大体一致的虫蛹用于试验。

川硬皮肿腿蜂（简称肿腿蜂）蜂种来源于广西林业科学研究院。选择健壮、有光泽、活力强的无翅雌蜂作为种蜂。肿腿蜂放在4℃的冰箱中储存备用。

1.2 试验方法

1.2.1 乙醇处理不同蛹龄黄粉虫蛹对繁育肿腿蜂的影响

取若干蛹龄分别为0、12、24、48 h的黄粉虫蛹分别在75%乙醇中浸泡2 h，将处理后的黄粉虫蛹取出，用滤纸吸干蛹体表面乙醇，滤纸上放置5 min后，按照肿腿蜂与黄粉虫蛹2∶2的比例用毛笔将2头肿腿蜂接入放有黄粉虫蛹的玻璃指形管（14 mm×75 mm）中，塞好棉塞，置于温度28℃、相对湿度75%的恒温恒湿培养箱中。每24 h观察记录寄生情况、产卵量、产卵位置并及时取出发霉的黄粉虫蛹，持续观察30 d左右。

出蜂后代放置到其他处理好的指形管中继续饲养，观察。以蒸馏水处理相应蛹龄的黄粉虫蛹为对照，每个处理20次重复。

1.2.2 乙醇处理黄粉虫蛹对繁育肿腿蜂的影响

根据1.2.1的试验结果，节省成本，选择将黄粉虫蛹龄为12 h的黄粉虫蛹用75%乙醇分别浸泡1、2、3、4 h。处理后，将黄粉虫蛹取出，用滤纸吸干蛹体表面乙醇，滤纸上放置5 min后，分别以2∶2虫蜂比接蜂。接蜂方法与1.2.1相同，每个处理20次重复。

1.2.3 低温处理黄粉虫蛹对繁育肿腿蜂的影响

将蛹龄为0 h的黄粉虫蛹分别置于-6、0、6℃的冰箱中处理6、12、24、36、48 h。将处理结束后的黄粉虫蛹在常温下放置5 min，用吸水纸吸干蛹体表面水分，分别以2∶2虫蜂比接蜂。接蜂方法与1.2.1相同，每个处理20次重复。

1.2.4 数据统计与分析

采用IBM SPSS 22.0软件对数据进行统计分析，数据统一进行Levene方差齐性检验，若出现方差不齐（P＜0.05）的情况，对数据进行转换，直至通过方差齐性检验（P＞0.05）；产蜂量采用单因素或双因素方差分析。

2 结果与分析

2.1 乙醇处理2 h对肿腿蜂寄生效果的影响

不同蛹龄的黄粉虫蛹对肿腿蜂寄生效果影响明显（表1）。在蒸馏水处理的条件下，黄粉虫蛹龄小于24 h，出蜂率达10%以上，蛹龄大于48 h时，出蜂率为0，即肿腿蜂无法寄生2日龄及以后的黄粉虫蛹。在黄粉虫蛹相同蛹龄前提下，与对照相比，用75%乙醇处理，可以显著提高肿腿蜂对黄粉虫蛹的寄生效果，出蜂率和产蜂量都有明显提高。用乙醇处理后，肿腿蜂也能寄生2日龄的黄粉虫蛹。

2.2 不同乙醇处理时间对繁育肿腿蜂的影响

75%乙醇浸泡蛹龄为12 h的黄粉虫蛹3 h后再进行接蜂，肿腿蜂的出蜂率及产蜂量最高，出蜂率为50%，平均产蜂量为27.6头（表2）。各处理时长之间的产蜂量均有显著差异（P＜0.05）。黄粉虫蛹被浸泡处理时间越长，接蜂后的肿腿蜂寄生效果越好；但浸泡处理时间达到4 h时肿腿蜂寄生效果下降。

2.3 不同低温和贮藏时长对肿腿蜂繁育的影响

当贮藏时长一致时，肿腿蜂产蜂量随着贮藏温度的升高有逐渐降低的趋势；低温对肿腿蜂产

表1 不同蛹龄黄粉虫蛹对产蜂率、产蜂量的影响Tab.1 Effect of different ages of Tenebrio molitor pupae on the emergence rate and yield of offspring parasitoids

表2 75%乙醇处理黄粉虫蛹不同时长对出蜂率、产蜂量的影响Tab.2 Effectofdifferenthourswith75%ethanolforTenebriomolitorpupaeonemergencerateandyieldofoffspringparasitoids

同列数据（平均值±标准差）后不同小写字母表示同一蛹龄不同处理间差异显著（P＜0.05）。Different lowercase letters（mean±SD）in the same column indicate significant difference among different treatments at the same age（P＜0.05）.蜂数有显著影响（P＜0.05），其中，以-6℃处理黄粉虫蛹的效果最好，平均产蜂量达18.43头（表3）。当温度一致时，肿腿蜂产蜂量先随虫蛹贮藏时间增加而增多，超过24 h之后，又随之减少；贮藏时长小于24 h时，各贮藏时长处理后的肿腿蜂产蜂量间存在显著差异（P＜0.05），超过24 h之后，各处理间的产蜂量间差异不显著，处理时长为24 h时，肿腿蜂平均产蜂量达最高值18.46头。在15种不同虫蛹处理中，肿腿蜂的寄生效果以-6℃冻藏24 h黄粉虫虫蛹的处理方式为最佳，显著高于其他14种不同虫蛹处理后的肿腿蜂寄生效果，平均产蜂量达最大值21.5头。

表3 不同低温和贮藏时长处理黄粉虫蛹对肿腿蜂产蜂数的影响Tab.3 Effects of different low temperatures and storage duration on the yield of offspring parasitoids

3 结论与讨论

在合适的环境条件下，肿腿蜂能否成功寄生寄主很大程度上取决于寄主类型及龄期。本试验结果表明，黄粉虫蛹的蛹龄对人工繁育川硬皮肿腿蜂有明显的影响。肿腿蜂对不同蛹龄的黄粉虫蛹寄生效果不同，蛹龄越大，寄生效果越差，而且肿腿蜂不能寄生2日龄黄粉虫蛹。用75%乙醇处理不同蛹龄的黄粉虫蛹2 h可以显著提高肿腿蜂对黄粉虫蛹的寄生效果。

肿腿蜂作为一种活体寄生蜂，对寄主的寄生与寄主的发育状态有密切的关系。如果寄主死亡，肿腿蜂会放弃在寄主体表产卵，导致繁殖失败。在适于肿腿蜂寄生活动的环境条件下，黄粉虫蛹的发育及体壁硬化较快，代谢活动强，呼吸损耗营养物质多，不利于肿腿蜂寄生。通过低温和乙醇处理可以延缓黄粉虫蛹的发育，提高肿腿蜂的寄生效果[15-16]。本研究中75%乙醇处理蛹龄12 h黄粉虫蛹最佳乙醇处理时长为3 h，肿腿蜂出蜂率可达50%，平均产蜂量可达27.6头，寄生效果与杨希等[14]报道黄粉虫1日龄蛹经过75%乙醇浸泡，可显著提高子代蜂产量一致。不同低温贮藏黄粉虫初蛹及其贮藏时长对肿腿蜂寄生效果有明显影响，其中，以-6℃冻藏黄粉虫蛹24 h为最佳，平均产蜂量达最大值21.5头，与胡镇杰等[13]报道低温处理黄粉虫蛹24 h的寄生效果相似。本实验中的低温和酒精处理可以延缓黄粉虫的发育，使肿腿蜂能够很好的寄生繁殖，但在肿腿蜂规模化人工繁育中，黄粉虫蛹最佳处理方式仍有待进一步的研究。