酶联免疫吸附试验法与化学发光免疫分析法检测乙型肝炎病毒血清学标志物的准确率

张万平

厦门市海沧区妇幼保健院 （福建厦门 361000）

乙型病毒性肝炎是临床常见的肝脏疾病，主要由乙型肝炎病毒引起，病变部位以肝脏为主，患者临床表现为肝区疼痛、食欲下降、乏力等，部分患者伴有黄疸、肝功能损害等，如果不能早发现、早治疗，则会发展为肝硬化，甚至肝癌。乙型病毒性肝炎具有传染性，以血液传播为主要感染途径，一旦出现感染，若不能及时清除病毒，则会降低患者的免疫功能，进而引发全身性感染，诱发多种疾病，严重威胁患者的生命安全。目前，乙型病毒性肝炎已经成为世界公共卫生问题，在我国1～59岁人群中乙型肝炎表面抗原 （HBsAg）阳性率高达7．18%［1］。虽然经过多年的发展和乙型肝炎疫苗在新生一代人口的普及，但我国人们的乙型肝炎病毒携带率依旧居高不下［2］。血清学标志物检测是临床乙型肝炎病毒检测的重要手段，主要的检测方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）法与化学发光免疫分析 （CLIA）法。CLIA法被认为是更高效的检测乙型肝炎病毒血清学标志物的方法［3］。本研究旨在比较ELISA法与CLIA法检测乙型肝炎病毒血清学标志物的准确率，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年7月至2018年7月于我院就诊的72例乙型肝炎病毒感染患者，其中男40例，女32例；年龄24～54岁，平均 （38．7±1．9）岁；文化程度，初中及以下34例，高中20例，高中以上18例。患者均知情同意本研究，且已签署知情同意书。纳入标准： （1）符合 《乙型肝炎诊断标准 （WS299-2008）解读》［4］中的乙型肝炎诊断标准；（2）患者出现不同程度的恶心、肝脏肿大、腹水等症状。排除标准：（1）合并严重脏器疾病或精神疾病患者；（2）妊娠或哺乳期女性。

1.2 检测方法

采集患者清晨、空腹状态下的肘静脉血3～5 ml，采用离心机进行离心处理，3 000 r／min，时间10～15 min，分离上清血液，并将其置于-20℃的冰箱中保存。应用全自动化学发光免疫分析仪 （长沙腾健医疗器械有限公司生产，型号ChemLiteTM 1200）、酶标免疫检测仪 （北京普朗研发生产，型号DNM-9602G）对患者进行ELISA法、CLIA法检测，检测试剂为配套试剂，严格按照试剂盒上的说明书，根据操作流程，对血清学标志物相关指标进行检测，并进行详细记录。

1.3 临床评价

比较两种检测方法的准确率，以及两种检测方法检测HBsAg、乙型肝炎表面抗体 （抗-HBs）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）、乙型肝炎e抗体 （抗-HBe）、乙型肝炎核心抗体（抗-HBc）的阳性率。

1.4 统计学处理

采用SPSS24．0统计软件进行数据分析，计数资料以率表示，采用χ2检验，P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两种检测方法的准确率比较

72例患者，经CLIA法检测确诊乙型肝炎病毒感染69例，准确率为95．83%；经ELISA法检测确诊乙型肝炎病毒感染61例，准确率为84．72%；CLIA法检测准确率高于ELISA法，差异有统计学意义 （χ2=5．064，P＜0．05）。

2.2 两种检测方法检测血清标志物的阳性率比较

CLIA法检测HBsAg、HBeAg的阳性率均高于ELISA法检测，差异均有统计学意义 （P＜0．05）；两种检测方法检测抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc的阳性率比较，差异均无统计学意义 （P＞0．05）。见表1。

表1 72例经两种检测方法检测血清标志物的阳性率比较 ［例 （%）］

3 讨论

乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒引起的一种具有感染性的肝脏疾病。随着人们生活方式的不断改变，乙型病毒性肝炎患者的数量越来越多，发病率呈现显著的上升趋势，对患者的生活、健康安全均造成极大的影响。基于此，对乙型病毒性肝炎患者采取早期诊断，并予以有效控制，对患者预后具有十分重要的意义。传统诊断乙型病毒性肝炎患者的方法效果并不理想，延误了患者的临床治疗。提高乙型病毒性肝炎患者的临床诊断准确率，便于制定合理的治疗方案，以控制患者病情，减轻患者痛苦。

近年来，ELISA法、CLIA法在临床乙型病毒性肝炎的诊断中得到广泛应用，并取得显著的效果。ELISA法是指将抗原、抗体的特异反应连接酶、待测物，通过底物、酶两者发生反应，从而达到检测的目的。ELISA法的原理可以分为两种：（1）抗原 （或抗体）与某种酶连接，形成酶标抗原 （或抗体），且该形成物不但具有免疫活性，还同时存在酶活性；（2）抗原 （或抗体）结合到某固相载体表面，且保存免疫活性。ELISA法虽然操作简单，成本较低，但由于手工加样、孵育时间、洗板等因素影响容易导致非特异性反应的发生，易造成结果不稳定。当标本中的待检物质浓度过高时会因钩状效应出现假阴性结果而造成漏检；并且ELISA法是使用酶显色进行检测，通过颜色深浅来判断实验结果，在抗原 （抗体）与酶结合物浓度低时，吸光度值太小，易出现假阴性情况，且由于检测方法的局限而造成HBsAg假阴性的漏检情况也常有出现［5］。

CLIA法是新型的免疫测定方法，是电化学发光、免疫测定共同结合的产物，其作用原理是利用电化学作用在电极表面引起的特异性化学反应，进行免疫测定。通过应用电化学发光剂对抗体进行标记，以颗粒分离技术、抗原抗体反应为基本原理，根据在电极上电化学发光剂的光强度大小，对抗原 （或抗体）进行定量、定性等分析。CLIA法具有检测时间短、灵敏度高、应用范围广等优势，且检查的准确率高，因此，备 受 临 床 医 师 的 认 可［6-7］。HBsAg、抗 -HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc血清标志物是临床诊断乙型病毒性肝炎的重要物质。本研究中，CLIA法检测准确率高于ELISA法，差异有统计学意义 （P＜0．05）。CLIA法检测HB-sAg、HBeAg的阳性率高于ELISA法检测，差异均有统计学意义 （P＜0．05）；两种检测方法检测抗 -HBs、抗 -HBe、抗-HBc的阳性率比较，差异均无统计学意义 （P＞0．05）。说明与ELISA法比较，应用CLIA法对乙型病毒性肝炎进行诊断更具价值。

综上所述，乙型肝炎病毒血清学标志物应用CLIA法检测的准确率高于ELISA法。