HS-SPME-GC-MS分析荆芥及其炮制品的挥发性成分△

龚敏，卢金清，韩怡

湖北中医药大学/湖北省药用植物研发中心，湖北 武汉 430065

荆芥为全草类中药，别名香荆荠、假苏等，且最早以“假苏”载于《神农本草经》[1]，被列为中品。荆芥性微温，味辛，归肺、肝经，有解表散风、透疹消疮之功效[2]。临床常用于感冒、头痛、麻疹、风疹、疮疡等。荆芥除药厂用作原料外，近年来还广泛应用于饲料、香料等加工行业，荆芥挥发油出口各国的数量逐渐增加，社会需求量不断增大[3]。自宋代以来记载荆芥的炮制方法已达十余种，现代临床上荆芥多以其生品、炒制品和炭品入药。临床研究表明，荆芥炒制后具有祛风理血的作用，可用于妇人产后血晕。然而荆芥炒制品未被2015年版《中华人民共和国药典》收载，因此有必要研究荆芥及其炮制品的物质基础。国内外并无文献报道荆芥及其炮制品炒荆芥的挥发性成分物质基础，所以本实验首次采用HS-SPME-GC-MS对荆芥及其炮制品炒荆芥的挥发性成分进行提取和分析比较，探寻炒制对荆芥挥发性成分的组成和含量的影响，为荆芥的临床应用提供参考。

1 材料

1.1 仪器

手动固相微萃取装置(德国IKA公司)；65 μm PDMS/DVB萃取纤维头(Supelco公司)；顶空瓶(15 mL)；Agilent 6890-5973型GC-MS联用仪(Hewlett-Packard公司)；电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司，JY1002，d=0.01 g)。

1.2 药材

荆芥药材购于湖北强康中药饮片有限公司(批号：170801)，经湖北中医药大学生药教研室杨红兵教授鉴定为唇形科植物荆芥SchizonepetatenuifoliaBriq.的干燥地上部分。

2 方法

2.1 炒荆芥的制备

参照2015版《中华人民共和国药典》四部0213炮制通则中的炮制方法：取荆芥生品适量，置炒制容器内，用文火加热，并不断翻动，使药物表面呈微黄色或颜色加深，取出，放凉，阴干打粉，即得。

2.2 顶空固相微萃取条件

综合考察确定顶空固相微萃取的最佳条件为：荆芥打粗粉，取0.6 g，置顶空瓶中，插入萃取纤维头(65 μm PDMS/DVB)，在150 ℃下平衡10 min后，再压缩手柄伸出萃取头萃取15 min，取出，立即插入气相色谱仪进样口(温度230 ℃)解析3 min，不分流进样。炒荆芥的制备见2.1。

2.3 气相色谱-质谱条件

色谱柱：HP-5MS(30 m×0.25 mm，0.25 μm)；载气：高纯度He；流速：0.8 mL·min-1；进样口温度：230 ℃；程序升温：50 ℃以20 ℃·min-1升温至100 ℃，再以8 ℃·min-1升温至210 ℃。

质谱条件：离子源EI源；离子源温度230 ℃，电离电压70 eV；四级杆温度150 ℃；扫描质量范围m/z35～550。

3 结果

通过气质联用仪分析，数据库检索确定各个组分。从荆芥生品中分离出30种成分，并鉴定出27种成分，占挥发性成分总量的96.35%；从炒荆芥中分离出32种成分，并鉴定出26种成分，占挥发性成分总量的89.22%。具体结果见图1～2及表1。

图1 HS-SPME-GC-MS分析荆芥生品挥发性成分总离子流图

图2 HS-SPME-GC-MS分析炒荆芥挥发性成分总离子流图

4 讨论

荆芥炒制后，结果表明，其挥发性成分的组成、含量较生品均发生了改变。荆芥生品中挥发性成分含量最高的为薄荷酮，占挥发性成分的48.57%，其次为哒嗪(5.46%)、柠檬烯(4.16%)、大根香叶烯(1.69%)等。炒荆芥中挥发性成分含量最高的为胡薄荷酮，占挥发性成分的36.24%，其次主要为异薄荷酮(26.57%)、哒嗪(6.92%)、薄荷醇(4.28%)、大根香叶烯(2.33%)等。与荆芥生品相比，炒荆芥中新增了14种成分，醇酯类成分组成个数增多，减少了15种成分，烯酮类成分组成个数减少。荆芥炮制前后的共有挥发性成分有12种，主要表现为酯类含量明显减少，醇类含量基本不变，烯类含量保持不变或明显增多。

表1 荆芥及其炮制品挥发性成分

续表1

注：—代表不出现该成分。

荆芥中所含的挥发性成分较为丰富，其中部分特有成分具有广泛的药理活性。如薄荷酮有抗病毒、抗炎、抑菌、利胆、促渗作用[4-6]，还有局部麻醉作用和止痛作用[7]；柠檬烯具有抑菌、抑制兴奋、抗肿瘤、祛痰、止咳、平喘和溶解胆结石等功效[8-9]；月桂烯具有抗肿瘤、抗氧化、镇痛和祛痰止咳作用[10-13]；薄荷烯酮具有麻醉、抗炎和镇痛作用[14]；水杨酸甲酯具有驱虫作用[15]，且可促进局部的血液循环，起消肿、消炎、止痒和镇痛作用[16]。然而炒荆芥中并未检测到这些活性成分。故从挥发性成分的角度考虑，荆芥生品优于炒荆芥，这也符合荆芥在临床上多以生品入药的用药习惯。活性物质的改变必然引起临床疗效和应用的变化，荆芥生品重在解表散风，炒制品重在祛风理血。本研究对荆芥生品及其炒制品的挥发性成分进行分析比较，为临床合理用药提供了一定参考。