三颗针不同炮制、提取方法对糖尿病小鼠血糖、血脂的影响研究

2019-09-05 08:30魏学军孙晓惠许义红
天然产物研究与开发 2019年8期
关键词:水煎液生品血糖值

李 香,汪 巍,邓 莹,魏学军,孙晓惠,许义红

黔南民族医学高等专科学校,都匀 558003

三颗针BerberidisRadix为小檗科植物小黄连刺BerberiswihonaeHemsl.,拟豪猪刺BarberissoulieanaSchneid.,细叶小檗BerberispoiretiiSchneid.或匙叶小檗BerberisvernaeSchneid.等同属数种植物的干燥根,主含盐酸小檗碱、小檗胺、掌叶防己碱和药根碱等多种生物碱[1]。具有较好的清热燥湿,泻火解毒之功效。由于资源丰富,疗效显著,采集方便,民间常用来代替黄柏、黄连药用,在贵州苗族聚集区被广泛用于解毒、杀菌、镇痛、降血糖等[1],民间亦有老中医将其酒制、醋制[2]后使用。三颗针中生物碱提取方法有煎煮、回流、超声、回流超声等方法,三颗针主含盐酸小檗碱成分,主要用于降血压、降血糖、降血脂等[1]。不同炮制、提取方法对其降血糖作用的影响就笔者查阅文献未见相关报道,本实验通过对三颗针不同炮制、提取方法降血压、降血脂作用进行比较研究,为三颗针的进一步研究与开发应用提供科学依据。

1 材料与仪器

1.1 实验动物

健康KM小鼠,SPF级,雄性小鼠,体重18~22 g,由长沙市天勤生物技术有限公司提供,许可证号:SCXK(湘)2014-0011。小鼠饲养于空调房内,喂养标准颗粒饲料,实验前3天为适应期,期间自由摄食与饮水。

1.2 药品与试剂

三颗针购自北京同仁堂药房,产地河南(批号:170512,生产日期:20170518),经测定为合格药材。盐酸二甲双胍片,石家庄市华新药业有限责任公司,批号:20140023。盐酸肾上腺素注射液,吉林省华牧动物保健品有限公司,批号:2014070011221。链脲佐菌素(streptozotocin,STZ),美国Sigma公司,批号:WXBC2544V。四氧嘧啶(Alloxan),美国Sigma公司,批号:BCBT8817。葡萄糖,天津市科密欧化学试剂有限公司,批号:20121203。柠檬酸、柠檬酸钠,重庆江川化工集团有限公司,批号:20151230。总胆固醇(TC)试剂盒、甘油三酯(TG)试剂盒,批号:20181120。低密度脂蛋白(LDLC)、高密度脂蛋白(HDLC)试剂盒,批号:20181114。所有试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。甲醇,乙醇,盐酸均为分析纯,娃哈哈饮用水。

1.3 主要仪器

MR-96A酶标仪,深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司;SG-4050C型数显恒温水浴锅,上海硕光公司;循环水真空泵,上海予英仪器有限公司;旋转蒸发仪,上海亚荣生化仪器厂;血糖仪,三诺生物传感股份有限公司;血糖试纸,三诺生物传感股份有限公司;DHG-9240A真空干燥箱,上海金山公司;电子天平,瑞士METTLER;OR型低速离心机,德国HERAEUS。

2 方法

2.1 各炮制品的制备

生品:取净制三颗针药材,切片,干燥,备用。

酒制品:取净制药材800 g,按《中国药典》2015版附录炮制通则“酒制”项要求。加黄酒20%(160 g)拌匀,闷润6 h,待酒浸透后取出,置烘箱中,160 ℃烘干,取出,放凉备用。同法制备3份。

醋制品:取净制药材800 g,按《中国药典》2015版附录炮制通则“醋制”项要求。加米醋20%(160 g)拌匀,闷润6 h,待米醋浸透后取出,余同酒制品制备。

2.2 各炮制品不同提取物的制备[3-6]

2.2.1 煎煮法

取生品、酒制品、醋制品粉碎过150目筛,各制品各3份,约120 g,分别置烧杯中,加入10倍量的蒸馏水煎煮2 h,抽滤,滤渣加入8倍量的蒸馏水煎煮1 h,抽滤,合并两次滤液浓缩减压干燥成浸膏,分别得生品、酒制品、醋制品水煎液组。生品水煎液组平均得膏率(4.92%),酒制品水煎液组平均得膏率(5.31%),醋制品水煎液组平均得膏率(6.05%)。

2.2.2 回流法

取生品、酒制品、醋制品粉碎过150目筛,各制品各3份,约120 g,分别置圆底烧瓶中,加入10倍量盐酸甲醇(1∶100)水浴回流2 h,抽滤,滤渣加入8倍量的盐酸甲醇(1∶100)水浴回流1 h,余同“2.2.1”项,生品回流组平均得膏率(1.11%),酒制品回流组平均得膏率(1.87%),醋制品回流组平均得膏率(2.46%)。

2.2.3 超声法

取生品、酒制品、醋制品粉碎过150目筛,各制品各3份,约120 g,分别置具塞锥形瓶中,加入10倍量盐酸甲醇(1∶100),称重后浸泡12 h,超声提取1 h,称重,用盐酸甲醇(1∶100)补足重量,余同“2.2.1”项,生品超声组平均得膏率(1.92%),酒制品超声组平均得膏率(2.19%),醋制品超声组平均得膏率(2.65%)。

2.2.4 回流超声法

取生品、酒制品、醋制品粉碎过150目筛,各制品各3份,约120 g,分别置三角瓶中,加入10倍量盐酸甲醇(1∶100)60 ℃水浴回流1 h,超声1.5 h,余同“2.2.1”项,生品回流超声组平均得膏率(6.08%),酒制品回流超声组平均得膏率(6.26%),醋制品回流超声组平均得膏率(6.35%)。

2.3 对正常小鼠血糖的影响

将KM小鼠,随机分成26组,每组6只,分别为正常对照组给予等容量的生理盐水(20 mL/kg);二甲双胍组;各制品水煎液组;各制品回流组;各制品超声组;各制品回流超声组的高中剂量组。根据该药生药量及预实验按照表1中剂量灌胃给药,每天灌胃1次,连续灌胃28天,于末次给药1 h后(禁食不禁水8 h),小鼠尾静脉采血,采用血糖仪测定小鼠空腹血糖值。

2.4 对四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影响[7,8]

小鼠禁食不禁水24 h后,尾静脉注射新配制的四氧嘧啶(70 mL/kg),同时给予高糖高脂饲料,72 h后(禁食不禁水8 h),小鼠尾静脉采血,血糖仪测定小鼠血糖值,选取血糖值大于9.0 mmol/L,小于30 mmol/L的小鼠作为糖尿病模型。将造模成功的糖尿病小鼠随机分成26组,每组6只,另随机取6只正常小鼠作正常对照组,盐酸二甲双胍组及各炮制品不同提取物组的高中剂量组按照设计剂量灌胃给药。模型组和正常对照组给予等容量的生理盐水(20 mL/kg),每天灌胃1次,连续灌胃28天,于末次给药1 h后(禁食不禁水8 h),小鼠尾静脉采血,采用血糖仪测定小鼠空腹血糖值。

2.5 对链脲佐菌素致糖尿病小鼠血糖的影响[9,10]

取小鼠禁食不禁水12 h后,腹腔注射新配制的链脲佐菌素溶液(150 mg/kg),同时给予高血糖饲料,72 h后(禁食不禁水8 h),小鼠尾静脉采血,测定小鼠血糖值,选取血糖值≥9.0 mmol/L的小鼠作为糖尿病模型,纳入实验。分组及给药测定方法同“2.4”项。

2.6 对高浓度葡萄糖致小鼠急性高血糖的影响[9,10]

将KM小鼠,随机分成27组,给药及测定方法同“2.3”项。除正常对照组给予等量生理盐水外,其余各组小鼠均需灌胃2 g/kg葡萄糖溶液,复制小鼠高血糖模型,分别在灌胃葡萄糖前0 h,灌胃葡萄糖后0.5 、1 、2 h,小鼠尾静脉采血,采用血糖仪测定血糖值。

2.7 对盐酸肾上腺素致小鼠高血糖的影响[10-12]

小鼠的分组与给药同“2.6”项操作,于末次给药后1 h(禁食不禁水8 h),除正常对照组给予等量生理盐水外,其余各组小鼠均需腹腔注射0.5 mg/kg盐酸肾上腺素注射液,复制小鼠急性高血糖模型,分别在腹腔注射盐酸肾上腺素前0 h与注射后0.5 h。小鼠尾静脉采血,采用血糖仪测定血糖值。

2.8 对血脂的影响[13-15]

将“2.4”项下四氧嘧啶致糖尿病小鼠尾静脉采血测定血糖值后,眼眶静脉丛取血至洁净EP管,血样转速以3 000 rpm,离心20 min,用移液枪取血清至洁净EP管,得血清样本,严格按照试剂盒要求对血清的甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白进行测定。

2.9 统计学方法

3 结果

3.1 对正常小鼠血糖的影响

结果见表1,同正常对照组比较,三颗针不同制品、提取方法的各剂量给药组对正常小鼠空腹血糖值均无明显影响(P>0.05)。

3.2 对四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影响

结果见表2,与正常对照组比较,各小组血糖值极显著升高(P<0.01)。给药28天后,与模型对照组比较,三颗针生品、酒制品、醋制品水煎液组高剂量组,生品回流组高剂量组,酒制品、醋制品回流组,生品、酒制品、醋制品超声组高剂量组,生品、酒制品、醋制品回流超声组均能显著降低四氧嘧啶引起的血糖升高(P<0.05或P<0.01)。

表1 对正常小鼠血糖的影响

注:与正常对照组比较,△P<0.05。

Note:Compared with the normal control group,△P< 0.05.

表2 对四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影响

续表2(Continued Tab.2)

组别Group剂量Dose(g/kg)血糖值Blood glucose level(mmol/L)给药前Before dose给药后After dose 1.216.78±3.47△△15.49±3.10△△醋制品水煎液组Decoction group of vinegar products2.416.77±2.68△△14.67±2.33△△*1.217.99±2.51△△15.10±2.35△△生品回流组Reflux group of raw products2.418.22±3.59△△14.70±2.46△△*1.217.83±3.12△△15.70±1.86△△酒制品回流组Reflux group of wine products2.418.19±2.18△△14.52±1.48△△*1.217.85±2.59△△14.45±2.94△△*醋制品回流组Reflux group of vinegar products2.417.74±3.21△△14.69±3.35△△*1.218.08±2.58△△14.72±2.02△△*生品超声组Ultrasound group of raw products2.417.17±2.53△△14.69±2.58△△*1.217.04±3.51△△14.98±3.30△△酒制品超声组Ultrasound group of wine products2.417.69±2.62△△14.57±2.85△△*1.217.86±2.57△△15.10±2.70△△醋制品超声组Ultrasound group of vinegar products2.418.07±3.51△△14.59±3.00△△*1.218.26±3.49△△14.87±2.28△△生品回流超声组Reflux-ultrasound group of raw products2.417.30±2.67△△14.02±1.68△△**1.217.06±2.53△△14.15±2.66△△*酒制品回流超声组Reflux-ultrasound group of wine products2.417.31±3.45△△13.78±2.44△△**1.218.13±3.73△△13.75±2.35△△**醋制品回流超声组Reflux-ultrasound group of vinegar products2.417.30±2.02△△13.33±1.55△△**1.217.37±2.29△△13.64±2.11△△**

注:与正常对照组比较,△P<0.05,△△P<0.01;与模型对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。

Note:Compared with the normal control group,△P< 0.05,△△P<0.01;Compared with the model control group,*P<0.05,**P<0.01.

3.3 对链脲佐菌素致糖尿病小鼠血糖的影响

结果如表3所示,与正常对照组比较,各组给予链脲佐菌素造模后,各组小鼠血糖均极显著升高(P<0.01)。给药28天后,与模型对照组比较,三颗针醋制品水煎液组高剂量组,酒制品回流组高剂量组,醋制品回流组,生品、酒制品、醋制品的超声组与回流超声组的小鼠血糖显著降低(P<0.05或P<0.01)。

表3 对链脲佐菌素致糖尿病小鼠血糖的影响

续表3(Continued Tab.3)

组别Group剂量Dose(g/kg)血糖值Blood glucose level(mmol/L)给药前Before dose给药后After dose 醋制品水煎液组Decoction group of vinegar products2.414.09±2.83△△13.10±1.73△△1.213.78±3.73△△13.08±2.89△△生品回流组Reflux group of raw products2.414.51±2.74△△12.77±1.86△△*1.213.84±2.70△△13.06±2.44△△酒制品回流组Reflux group of wine products2.412.88±3.05△△12.15±2.23△△**1.213.09±2.75△△12.43±1.99△△*生品超声组Ultrasound group of raw products2.412.93±2.96△△12.56±2.34△△*1.212.63±2.86△△12.26±2.60△△*酒制品超声组Ultrasound group of wine products2.412.47±2.47△△12.07±2.15△△**1.212.85±2.15△△12.20±1.76△△**醋制品超声组Ultrasound group of vinegar products2.413.13±2.11△△12.05±1.99△△**1.212.72±2.79△△11.89±2.66△△**生品回流超声组Reflux-ultrasound group of raw products2.413.31±2.85△△11.87±2.02△△**1.212.48±2.90△△11.57±2.59△△**酒制品回流超声组Reflux-ultrasound group of wine products2.412.35±2.67△△10.71±2.14△△**1.213.40±2.41△△11.05±1.55△△**醋制品回流超声组Reflux-ultrasound group of vinegar products2.413.12±3.01△△9.98±1.60△△**1.213.61±3.16△△10.67±2.48△△**

注:与正常对照组比较,△P<0.05,△△P<0.01;与模型对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。

Note:Compared with the normal control group,△P< 0.05,△△P<0.01;Compared with the model control group,*P<0.05,**P<0.01.

3.4 对葡萄糖致小鼠高血糖的影响

结果如表4所示,连续灌胃28天后,与正常对照组比较,模型组小鼠灌胃高浓度葡萄糖后血糖值逐渐升高,0.5 h时模型组血糖达最高值,其余各组小鼠血糖值极显著升高(P<0.01)。与模型对照组比较,灌胃葡萄糖后0.5 h,三颗针醋制品回流组高剂量组,醋制品超声组中剂量组,生品回流超声组高剂量组,酒制品、醋制品回流超声组对高浓度致小鼠高血糖显著降低(P<0.05或P<0.01)。1 h后,三颗针生品、酒制品、醋制品水煎液组高剂量组,酒制品、醋制品回流组,酒制品超声组中剂量,醋制品超声组,生品、酒制品、醋制品回流超声组有显著降血糖作用(P<0.05或P<0.01)。2 h后,酒制品、醋制品回流超声组高剂量组有显著降血糖作用(P<0.05)。

表4 对葡萄糖致小鼠高血糖的影响

续表4(Continued Tab.4)

组别Group剂量Dose(g/kg)血糖值Blood glucose level(mmol/L)0 h 0.5 h 1 h 2 h 1.23.71±0.9413.79±2.32△△13.48±2.22△△12.84±2.45△△生品回流组Reflux group of raw products2.44.14±0.9813.81±1.95△△13.29±1.94△△12.36±2.27△△1.23.51±0.8413.99±2.55△△13.57±2.59△△12.80±2.06△△酒制品回流组Reflux group of wine products2.43.34±0.9813.37±1.61△△12.95±1.65△△*12.07±1.56△△1.23.89±1.1713.51±1.30△△12.57±2.28△△*12.43±1.98△△醋制品回流组Reflux group of vinegar products2.43.49±0.7513.14±2.39△△*12.85±1.53△△*11.99±1.63△△1.24.10±0.9813.31±2.23△△13.08±2.37△△*12.32±1.98△△生品超声组Ultrasound group of raw products2.43.62±1.1213.89±2.39△△13.37±2.03△△13.59±1.77△△1.24.09±1.1113.91±2.38△△13.65±2.04△△13.03±1.67△△酒制品超声组Ultrasound group of wine products2.44.05±0.7913.44±2.86△△13.10±2.47△△12.49±2.04△△1.23.62±1.1213.53±2.10△△12.92±2.40△△*12.14±1.83△△醋制品超声组Ultrasound group of vinegar products2.43.97±0.8413.25±2.74△△12.43±2.86△△**11.76±2.57△△1.24.08±0.9413.20±2.29△△*12.68±2.52△△*11.58±2.37△△生品回流超声组Reflux-ultrasound group of raw products2.44.27±0.6913.06±3.02△△*12.81±3.04△△*11.83±2.25△△1.23.84±0.7513.43±2.26△△12.57±2.44△△*12.17±2.38△△酒制品回流超声组Reflux-ultrasound group of raw products2.43.51±0.8512.75±3.03△△*12.73±1.82△△*10.97±1.57△△*1.23.71±0.9013.17±2.98△△*12.31±2.14△△**11.49±2.54△△醋制品回流超声组Reflux-ultrasound group of vinegar products2.44.02±0.9812.20±2.74△△**11.96±2.27△△**10.76±1.65△△*1.23.91±0.8312.44±3.12△△**12.46±1.68△△**11.34±1.84△△

注:与正常对照组比较,△P<0.05,△△P<0.01;与模型对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。

Note:Compared with the normal control group,△P< 0.05,△△P<0.01;Compared with the model control group,*P<0.05,**P<0.01.

3.5 对盐酸肾上腺素致小鼠高血糖的影响

结果如表5所示,连续灌胃28天后,与正常对照组比较,腹腔注射盐酸肾上腺素0.5 h后各组小鼠血糖值极显著升高(P<0.01)。与模型对照组比较,酒制品、醋制品回流组高剂量组,醋制品超声高剂量组,生品、酒制品、醋制品回流超声组高剂量组小鼠血糖显著降低(P<0.05或P<0.01)。

表5 对盐酸肾上腺素致小鼠高血糖的影响

续表5(Continued Tab.5)

组别Group剂量Dose(g/kg)血糖值Blood glucose level(mmol/L)0 h0.5 h 酒制品回流组Reflux group of wine products2.44.52±1.0412.38±1.82△△*1.24.02±1.4112.93±2.47△△醋制品回流组Reflux group of vinegar products2.43.91±1.1311.64±2.07△△**1.23.84±0.9612.69±2.61△△生品超声组Ultrasound group of raw products2.44.59±0.8413.43±2.39△△1.23.99±0.9414.02±2.07△△酒制品超声组Ultrasound group of wine products2.45.01±1.1312.86±1.83△△1.23.91±1.1913.65±2.05△△醋制品超声组Ultrasound group of vinegar products2.43.94±1.1912.16±2.94△△*1.23.89±0.9813.10±3.14△△生品回流超声组Reflux-ultrasound group of raw products2.44.32±0.9712.01±2.21△△*1.23.90±0.7312.94±2.22△△酒制品回流超声组Reflux-ultrasound group of wine products2.43.98±0.9711.27±1.85△△**1.24.00±0.9212.83±2.83△△醋制品回流超声组Reflux-ultrasound group of vine-gar products2.44.02±0.9610.64±1.72△△**1.25.05±1.0612.47±2.05△△

注:与正常对照组比较,△P<0.05,△△P<0.01;与模型对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。

Note:Compared with the normal control group,△P< 0.05,△△P<0.01;Compared with the model control group,*P<0.05,**P<0.01.

3.6 对血脂的影响

由表6可见,由四氧嘧啶建立的高血糖,模型对照组小鼠血清TC、TG、LDLC含量显著高于正常对照组(P<0.01)。各制品各提取方法的TC值均显著低于模型对照组(P<0.05或P<0.01)。酒制品、醋制品水煎液组、酒制品与醋制品回流组、生品、酒制品超声组高剂量组,醋制品超声组,生品、酒制品、醋制品回流超声组的TG值均显著低于模型对照组(P<0.05或P<0.01)。醋制品水煎液组、生品、酒制品回流组高剂量组、醋制品回流组、醋制品超声组、生品回流超声组高剂量组,酒制品、醋制品回流超声组LDLC值均显著低于模型对照组(P<0.05或P<0.01)。模型组小鼠血清HDLC值显著低于正常对照组(P<0.01)。酒制品、醋制品回流组,生品、酒制品超声组高剂量组、醋制品超声组、生品、酒制品、醋制品回流超声组HDLC显著高于模型对照组(P<0.05或P<0.01)。

组别Group剂量Dose(g/kg)TC (mmol/L) TG (mmol/L) HDLC (mmol/L) LDLC (mmol/L) 正常对照组Normal control group-4.17±0.78**1.46±0.38**2.81±0.83**1.90±0.72**模型对照组Model group-6.58±1.033.22±0.661.71±0.543.49±1.05二甲双胍组Metformin group0.44.34±0.57**2.04±0.50**2.70±0.57**2.04±0.77**生品水煎液组Decoction group of raw products2.45.35±0.66**2.91±0.442.08±0.562.85±1.131.26.08±0.902.84±0.741.84±0.712.96±1.08酒制品水煎液组Decoction group of alcoholic products2.45.12±0.52**2.72±0.34*2.18±0.432.76±1.071.25.96±0.692.93±0.452.03±0.462.69±1.21醋制品水煎液组Decoction group of vinegar products2.45.09±0.88**2.75±0.57*2.13±0.422.43±1.17*1.25.96±0.892.81±0.482.09±0.642.60±0.91

续表6(Continued Tab.6)

组别Group剂量Dose(g/kg)TC (mmol/L) TG (mmol/L) HDLC (mmol/L) LDLC (mmol/L) 生品回流组Reflux group of raw products2.45.13±1.28**2.79±0.542.21±0.622.49±1.11*1.25.40±0.66**2.84±0.412.11±0.542.70±1.33酒制品回流组Reflux group of wine products2.44.97±0.75**2.64±0.41*2.41±0.48*2.49±1.21*1.25.26±0.64**2.76±0.332.27±0.50*2.67±1.02醋制品回流组Reflux group of vinegar products2.45.03±0.80**2.53±0.71**2.44±0.67**2.38±1.12*1.25.12±0.60**2.60±0.37**2.30±0.42*2.54±1.00*生品超声组Ultrasound group of raw products2.45.21±0.59**2.72±0.64*2.29±0.58*2.55±1.011.25.32±0.46**2.81±0.712.12±0.562.67±1.07酒制品超声组Ultrasound group of wine products2.45.04±0.72**2.60±0.59**2.33±0.64*2.60±1.201.25.25±0.57**2.78±0.452.21±0.812.67±1.21醋制品超声组Ultrasound group of vinegar products2.45.09±1.04**2.54±0.48**2.36±0.65*2.46±1.17*1.25.13±0.87**2.70±0.46*2.26±0.77*2.61±1.03生品回流超声组Reflux-ultrasound group of raw products2.44.97±0.85**2.59±0.52**2.41±0.69*2.37±1.17*1.25.25±0.81**2.71±0.52*2.31±0.46*2.60±0.95酒制品回流超声组Reflux-ultrasound group of wine products2.44.67±0.98**2.45±0.37**2.51±0.66*2.31±1.04*1.25.03±0.54**2.55±0.51**2.40±0.62*2.45±0.93*醋制品回流超声组Reflux-ultrasound group of vinegar products2.44.44±0.80**2.26±0.54**2.62±0.74**2.20±0.99**1.24.86±0.68** 2.41±0.53**2.47±0.57**2.34±1.08*

注:与模型对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。

Note:Compared with the model control group,*P<0.05,**P<0.01.

4 结论

糖尿病已成为危害人类健康的疾病之一,四氧嘧啶、链脲佐菌素可影响胰岛素分泌,导致高血糖,本实验选取两者建立糖尿病动物模型造模用药。肾上腺素通过受体激动作用,使血糖升高造成急性高血糖。为深入研究三颗针降血糖、血脂活性,本实验采取三颗针常用炮制方法与生物碱常用提取方法,比较不同炮制、提取方法对血糖血脂的影响。本实验研究表明三颗针不同炮制、提取方法具备一定降血糖和调节血脂代谢作用,且不同炮制提取方法存在一定差异。

对四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影响,各制品的回流超声组与生品水煎液组中剂量组比较存在显著差异(P<0.05)。

对链脲佐菌素致糖尿病小鼠血糖的影响,醋制品超声组中剂量组,生品、酒制品、醋制品回流超声组与生品水煎液组存在显著差异(P<0.05);酒制品、醋制品回流超声组与酒制品水煎液组高剂量组存在显著差异(P<0.05);酒制品回流超声组高剂量组,醋制品回流超声组与醋制品水煎液高剂量组存在明显差异(P<0.05);醋制品超声组中剂量组,生品、酒制品、醋制品回流超声组与醋制品水煎液组中剂量组存在明显差异(P<0.05);醋制品回流超声组高剂量组与醋制品回流组、生品超声组、酒制品超声组、醋制品超声组高剂量组存在明显差异(P<0.05)。

给予高浓度葡萄糖2 h后酒制品、醋制品回流超声组高剂量组与生品、酒制品水煎液组;酒制品、醋制品回流超声组高剂量组与生品超声组存在显著差异(P<0.05)。

腹腔注射盐酸肾上腺素0.5 h后,醋制回流超声组高剂量组与生品、酒制品各提取方法高剂量组存在显著差异(P<0.05)。

醋制品回流超声组高剂量组与生品水煎液组、超声组血清中TC值存在显著差异;醋制品回流超声组高剂量组与生品、酒制品水煎液组、生品回流、超声组TG值存在显著差异(P<0.05);醋制品回流超声组高剂量组与生品水煎液组HDLC存在显著差异(P<0.05)。

本课题开展不同提取方法与炮制方法对三颗针降血糖、降血脂的影响研究,同一种提取方法,炮制后比炮制前降血糖、血脂效果好,表明炮制后达到增效目的,符合中药炮制目的。同一种制品采用回流超声提取法的降血糖效果优于其他提取方法,推测可能回流与超声结合提取,更利于活性成分溶出。不同炮制与提取方法对活性成分如小檗碱含量的影响是下一步研究方向。本文为三颗针资源合理利用,为三颗针炮制加工研究提供一定依据。

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