八珍汤对急性白血病化疗后骨髓抑制的疗效观察及部分机制探析

许崇艳 马志强 牛占恩

摘要 目的：探討八珍汤对急性白血病化疗后骨髓抑制疗效，对其作用机制进行探讨，以期精准治疗。方法：选取2016年5月至2018年12月日照市中医院收治的急性白血病化疗后骨髓抑制患者76例作为研究对象，按照随机数字表法分为对照组和观察组，每组38例。对照组常规西医治疗，观察组加用八珍汤治疗，均同时治疗4周。观察2组患者治疗前、完成治疗后血常规、Notch信号通路相关蛋白、生命质量、免疫功能变化并比较，比较2组患者不良反应和骨髓抑制程度情况。结果：1）完成治疗后2组患者白细胞（WBC）、血红蛋白（HGB）、血小板（PLT）、粒细胞较治疗前均显著升高（P<0.05），完成治疗后观察组以上指标均显著高于对照组（P<0.05）。2）完成治疗后2组患者jagl、notch2较治疗前均显著下降，观察组完成治疗后numb1、nubm2较治疗前均显著升高（P<0.05），对照组完成治疗后较治疗前numb1、nubm2比较，差异无统计学意义（P>0.05），完成治疗后观察组jagl、notch2显著低于对照组，numb1、nubm2显著高于对照组（P<0.05）。3）完成治疗后2组患者疲劳、疼痛、恶心、呕吐积分较治疗前均显著下降，躯体、角色、认知、情绪、社会功能积分较治疗前显著升高（P<0.05），完成治疗后观察组疲劳、疼痛、恶心、呕吐显著低于对照组，余均显著高于对照组（P<0.05）。4）完成治疗后观察组感染、电解质紊乱、肝肾功能异常、黏膜损伤、恶心呕吐发生率均显著低于对照组，比较差异有统计学意义（P<0.05）。5）完成治疗后观察组CD4+、CD4+/CD8+、IgE、IgA、IgM、NK细胞较治疗前均显著升高，CD8+显著下降（P<0.05），而对照组治疗前、完成治疗后比较，差异则不显著（P>0.05），完成治疗后观察组CD8+显著低于对照组，余均显著高于对照组（P<0.05）。6）完成治疗后观察组骨髓抑制程度0级显著高于对照组，Ⅲ级显著低于对照组，比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论：八珍汤能通过提高急性白血病化疗后骨髓抑制免疫功能和血常规，从而改善生命质量，提高疗效，且不良反应发生率低。

关键词 八珍汤;急性白血病;骨髓抑制;免疫功能;生命质量;血常规;不良反应;疗效;Notch信号通路相关蛋白

Abstract Objective：To explore the effect of Bazhen Decoction on bone marrow suppression in acute leukemia patients after chemotherapy，and to explore its mechanism of action in order to achieve precise treatment.Methods：A total of 76 patients with bone marrow suppression after chemotherapy for acute leukemia were enrolled in our hospital from May 2016 to December 2018.They were randomly divided into control group（38 cases）and research group（38 cases）.The control group was treated with routine western medicine and the study group was treated with Bazhen Decoction for 4 weeks at the same time.The changes of blood routine，Notch signaling pathway related proteins，quality of life and immune function before and after treatment were observed and compared between the two groups.The adverse reactions and the degree of bone marrow suppression were compared between the two groups.Results：After treatment，WBC，HGB，PLT and granulocyte in the two groups were significantly higher than those before treatment（P<0.05），and the above indexes in the study group were significantly higher than those in the control group（P<0.05）. 2）After treatment，jagl and Notch2 in both groups decreased significantly，numb1 and nubm2 in the study group increased significantly after treatment（P<0.05）.There was no significant difference in numb1 and nubm2 in the control group（P>0.05）.After treatment，jagl and Notch2 in the study group were significantly lower than those in the control group，and numb1 and nubm2 in the study group were significantly higher than those in the control group（P<0.05）. 3）After treatment，the scores of fatigue，pain，nausea and vomiting in the two groups were significantly lower than those before treatment，and the scores of body，role，cognition，emotion and social function were significantly higher than those before treatment（P<0.05）.After treatment，the scores of fatigue，pain，nausea and vomiting in the study group were significantly lower than those in the control group，and the others were significantly higher than those in the control group（P<0.05）. 4）The incidence of infection，electrolyte disturbance，abnormal liver and kidney function，mucosal injury and nausea and vomiting in the study group were significantly lower than those in the control group after treatment，and the difference was statistically significant（P<0.05）. 5）After treatment，CD4+，CD4+/CD8+，IgE，IgA，IgM and NK cells in the study group were significantly higher than those before treatment，and CD8+ was significantly lower than those before treatment（P<0.05），but there was no significant difference between the control group before treatment and after treatment（P>0.05）.After treatment，CD8+ in the study group was significantly lower than that in the control group，and the rest were significantly higher than those in the control group（P<0.05）._After treatment，the bone marrow depression level 0 in the study group was significantly higher than that in the control group，and grade III was significantly lower than that in the control group，with significant difference（P<0.05）.Conclusion：Bazhen Decoction can improve the quality of life and curative effect by improving bone marrow suppression immune function and Hemogram of acute leukemia patients after chemotherapy，and the incidence of adverse reactions is low.

Key Words Bazhen Decoction; Acute Leukemia; Bone Marrow Suppression; Immune Function; Quality of Life; Blood Routine; Adverse Reactions; Therapeutic Effect; Notch Signaling Pathway Related Protein

中图分类号：R259文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2019.08.032

急性粒细胞白血病是一种常见血液系统恶性肿瘤，其起源于造血干细胞，以粒系幼稚细胞异常增生、正常造血细胞受损为主要表现，目前治疗方案主要是蒽环类药物联合阿糖胞苷方案，完全缓解率60%～80%[1]。但化疗后骨髓抑制是急性粒细胞白细胞化疗后最常见不良反应，临床上表现为感染、贫血和出血等症状。西医在治疗上目前尚无特异性方法，如重度贫血给予静脉滴注红细胞或皮下注射促红细胞生成素注射液，存在感染则皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子等，这些方法费用昂贵，存在药物不良反应，限制其广泛运用。而中医药却有独特治疗优势，能降低化疗不良反应，保护骨髓造血功能，防止骨髓抑制，且能调节机体免疫力，增强化疗效果，改善症状，提高生命质量[2]。中医学将此病归属为“虚劳”范畴，因化疗药物为毒邪，侵犯人体后耗气伤阴，损伤气血，致使气血亏虚，化生无源，又化疗药物直接伤及骨髓精气，导致肾虚、精亏、髓耗，本源受损，血生乏源。而脾为气血生化之源，肾主骨生髓，藏精，而精为血之所成也，肾虚则髓海不能满，血不能生。因骨髓抑制发生部位在骨髓，虚损脏腑为脾肾，累及心肝等，故其和脾、肾紧密相关。在治疗上当健脾益肾、益气养血。本次研究采用八珍汤治疗急性白血病化疗后骨髓抑制取得较好效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2016年5月至2018年12月日照市中医院收治的急性白血病化疗后骨髓抑制患者76例作为研究对象，按照随机数字表法分为对照组和观察组，每组38例。对照组中男18例，女20例;观察组中男17例，女21例，其他资料如：年龄、病程、症状积分、HGB、PLT、WBC等指标比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。见表1。本方案经医院伦理委员会审核批准实施[伦理审批号：2016（伦）审第17号]。

1.2 诊断标准 西医诊断标准参考《内科学》急性髓系白血病诊断标准，经血常规、骨髓细胞形态学、免疫分型、染色体核型及分子遗传学检查明确白血病类型。骨髓抑制即WBC<4×109/L，粒细胞<2×109/L，HGB<110 g/L，血小板<100×109/L。中医诊断标准参考《中药新药临床研究指导原则》进行，辨证为“虚劳”，证型为气血亏虚证。主症为神疲乏力、心悸气短、头晕目眩、面色淡或萎黄，次症为畏寒肢冷、纳呆食少、舌质淡、脉沉细无力[3-4]。

1.3 纳入标准 1）符合以上诊断标准者;2）年龄18～60岁;3）卡氏评分>60分;4）患者签署知情同意书;5）预期生存期>3个月;6）无严重肝肾、心肺功能异常，能坚持化疗者。

1.4 排除标准 1）既往有骨髓增殖性疾病或骨髓增生异常综合征病史;2）高白细胞，即WBC>100×109/L;3）存在活性性出血、慢性感染或炎性反应者;4）受试前2周行相关治疗者;5）骨髓移植患者;6）妊娠或哺乳期妇女;7）对中药过敏者。

1.5 脱落与剔除标准 1）自行退出患者;2）依从性差，无法判断疗效者;3）发生严重不良事件或出现特殊生理变化者。

1.6 治疗方法 对照组化疗方案为蒽环类+阿糖胞苷为主，IA方案为去甲氧柔红霉素[辉瑞制药（无锡）有限公司，国药准字H20040600]10 mg/（m2·d），静脉滴注，第1～3天;阿糖胞苷（海正辉瑞制药有限公司，国药准字H20054695）150 mg/（m2·d），第1～7天。并必要支持治疗，适当充分水化、碱化、止呕、护胃、护肝等，PLT<20×109/L则输注同型机采血小板，并止血药物;当HGB<60 g/L则输注同型红细胞悬液;中性粒细胞<0.5×109/L則注射重组人粒细胞刺激因子，若感染则予敏感抗菌药物治疗，连续治疗4周。观察组在对照组基础上加用八珍汤治疗，药物组成有党参、白术、茯苓、黄芪各30 g，当归、川芎、芍药、甘草、鸡血藤、何首乌、补骨脂各10 g，熟地黄20 g。并随症加减，如脾虚加薏苡仁、山药、扁豆各10 g，低热加黄柏、地骨皮、知母各10 g，腹胀加陈皮、厚朴各10 g，纳差加麦芽、神曲各10 g，盗汗加浮小麦、麻黄根各10 g，失眠加肉桂、远志各10 g。（所有中药均购自亳州市安博药业有限公司，生产批号28392829）以上药物水煎煮，取汁400 mL，每日1剂，分早晚2次服用，连续治疗4周。

1.7 观察指标

观察2组患者治疗前、完成治疗后血常规、Notch信号通路相关蛋白、生命质量、免疫功能变化并比较，比较2组患者不良反应和骨髓抑制程度情况。

1.7.1 2组患者血常规指标评价 观察2组患者治疗前、完成治疗后血常规指标HGB、粒细胞、PLT、WBC变化并比较。空腹抽取静脉血3 mL，2 000 r/min离心15 min，-70 ℃冰箱中保存，采用血常规仪器进行。

1.7.2 2组患者Notch信号通路相关蛋白指标评价  观察2组患者治疗前、完成治疗后Notch信号通路相关蛋白变化并比较。空腹抽取静脉血3 mL，2 000 r/min离心15 min，-70 ℃冰箱中保存。经电泳、转膜、封闭、加一抗、洗膜、加二抗、洗膜、发光，采用OmageJ分析图片条带灰度值[5]。

1.7.3 2组患者生命质量比较 观察2组患者治疗前、完成治疗后生命质量QLQ-C30评分变化并比较。评价指标总共有9个项目，包括躯体、角色、认知、情绪、社会功能等5个功能项目，疲劳、疼痛、恶心、呕吐等4个症状项目。每个项目分成4个等级，1分为无发生，2分为有时发生，3分为经常发生，4分为频繁发生。功能项目评分越高则生命质量越高，症状项目则评分越高则生命质量越低[6]。

1.7.4 2组患者不良反应比较 观察2组患者治疗过程中是否存在感染、电解质紊乱、肝肾功能异常、黏膜损伤、恶心呕吐等不良反应，完成治疗后进行统计[7]。

1.7.5 2组患者免疫功能比较 观察2组患者免疫功能指标CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IgA、IgM、IgE、NK细胞变化并比较。空腹抽取静脉血3 mL，2 000 r/min离心15 min，-70 ℃冰箱中保存，采用酶联免疫吸附法检测IgA、IgM、IgE，采用流式细胞仪检测CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、NK细胞[8]。

1.7.6 2组患者疗效比较 按照世界卫生组织骨髓抑制标准，观察2组患者完成治疗后骨髓抑制分级保护情况，分为0～Ⅳ级，级别越高则骨髓抑制程度越重[9]。

1.8 统计学方法 采用SPSS 22.0统计软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，本研究所有数据均符合正态分布，用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组患者血常规指标比较 完成治疗后2组患者HGB、粒细胞、PLT、WBC较治疗前均显著升高（P<0.05），完成治疗后观察组以上指标均显著高于对照组（P<0.05）。见表2。

2.2 2组患者Notch信号通路相关蛋白比较 完成治疗后2组患者jagl、notch2较治疗前均显著下降，观察组完成治疗后numb1、nubm2较治疗前均显著升高（P<0.05），对照组完成治疗后较治疗前numb1、nubm2比较，差异无统计学意义（P>0.05），完成治疗后观察组jagl、notch2显著低于对照组，numb1、nubm2显著高于对照组（P<0.05）。见表3。

2.3 2组患者生命质量指标比较 完成治疗后2组患者疲劳、疼痛、恶心、呕吐积分较治疗前均显著下降，躯体、角色、认知、情绪、社会功能积分较治疗前显著升高（P<0.05），完成治疗后观察组疲劳、疼痛、恶心、呕吐显著低于对照组，余均显著高于对照组（P<0.05）。见表4。

2.4 2组患者不良反应比较 完成治疗后观察组感染、电解质紊乱、肝肾功能异常、黏膜损伤、恶心呕吐发生率均显著低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表5。

2.5 2组患者免疫功能指标比较 完成治疗后观察组CD4+、CD4+/CD8+、IgE、IgA、IgM、NK细胞较治疗前均显著升高，CD8+显著下降（P<0.05），而对照组治疗前、完成治疗后比较，差异无统计学意义（P>0.05），完成治疗后观察组CD8+显著低于对照组，余均显著高于对照组（P<0.05）。见表6。

2.6 2组患者骨髓抑制程度比较 完成治疗后观察组骨髓抑制程度0级显著高于对照组，Ⅲ级显著低于对照组，比较差异有统计学意义（P<0.05）。见表7。

3 讨论

在八珍汤中，以党参和熟地黄为君药，有益气养血功效。党参甘平，归脾肺经，能补中益气生津，补脾养胃、鼓舞清阳、振动中气，且无刚燥之弊，且润肺生津而不犯寒凉、滋胃阴而不湿，养血而不滋腻。熟地黄甘温，归肝肾经，具有补血养阴、填精益髓功效。记载称“填骨髓、长肌肉、生精血、补五脏内伤不足、通血脉、利耳目”，是补虚之要药，以白术、茯苓、当归、白芍、补骨脂为臣药，白术、茯苓能益气健脾渗湿，白术为补气健脾第一要药，两药能防止当归、熟地黄、何首乌等滋腻碍脾，能協助党参健脾补后天作用[10]。当归、白芍能养血和营，和何首乌、熟地黄协调可滋补肝肾、补髓填精、补益精血，达到精血同源。血能化精，精能生髓化血，故精血充盛，抑制骨髓精血复生，补骨脂补肾助阳，阴阳双补。余药均为佐使药，川芎活血行气，能防止补益药物补而滞;鸡血藤活血补血，祛瘀生新，和当归、白芍能活血补血、养血敛阴，和川芎同用能活血行气;黄芪补益脾胃，和当归能补气补血活血，无形之气促有形之血生长，甘草调和诸药，益气和中[11-12]。现代药理学认为，党参能调节脾胃、抗疲劳、增强免疫、促进骨髓造血功能，能促进机体生长、增强机体免疫功能，促进血细胞生成，改善血液系统作用，兴奋中枢神经。白术挥发油能调节胃肠功能，增加机体免疫力，减轻化疗药物不良反应，提高生命质量[13]。茯苓能调节细胞分子分泌，活化巨噬细胞，NK细胞等，强化机体细胞、体液免疫，能逆转肿瘤耐药性。当归能促进造血干细胞增殖，改善造血微环境，抗免疫调节，信号转导通路作用，能加速造血微环境恢复。川芎嗪能促进骨髓内皮细胞表达，血管内皮生长因子磷酸化，改善放射损伤小鼠骨髓微环境，促进造血恢复重建。白芍能增加巨噬细胞吞噬性，拮抗环磷酰胺对外周血T淋巴细胞抑制性，且有止痛、抗炎、保肝作用。熟地黄多糖能抑制全血细胞减少，促进造血干细胞增殖、分化，发挥补血功效[14]。何首乌能促进红细胞生成素受体和转录因子表达，促进骨髓抑制贫血造血功能恢复。黄芪水煎液能刺激造血红系祖细胞增殖分化，促进G0期红系细胞进入S期，恢复骨髓造血功能，改善骨髓髓腔形态学，升高白细胞、单核细胞、红细胞和血小板，诱导骨髓造血功能恢复。鸡血藤促进骨髓增殖，减轻化疗骨髓抑制作用，有抗癌、刺激造血双重作用，减少骨髓抑制性。补骨脂中的香豆素类、黄酮类等有抗肿瘤、免疫调节、雌激素作用，能抗氧化、抗菌和抗抑郁等作用，能通过诱导凋亡、诱导线粒体变性达到抗肿瘤作用[15-16]。

Notch信号通路是一种高度保守通路，是骨髓损伤再修复过程中重要调控通路。Notch信号通过和jagl调控化疗后骨髓抑制造血恢复，且抑制髓系分化，其能参与造血调控，广泛存在各种动物细胞中，对造血系统起重要作用，能调控干细胞增殖、分化，高度表达于造血干细胞，造血微环境中骨髓基质细胞[17]。Numb是一种膜相关蛋白，其不对称分布对细胞分化起关键作用，和肿瘤发生紧密相关，而Notch是一种跨膜受体蛋白，numb和Notch互为拮抗关系，numb通过抑制notch活性来调节细胞不对称关系，numb蛋白位于notch上游，拮抗notch通路活性，numb适活则会引起异常细胞分化、增殖，导致肿瘤形成、骨髓抑制发生[18]。结果显示，经八珍汤治疗后jagl、notch2显著下降，numb1、nubm2显著升高，这说明八珍汤能抑制过度激活notch信号通路，减轻骨髓抑制。

结果显示，八珍汤治疗后患者QLQ-C30評分功能评分显著提高，症状积分显著下降，且血常规HGB、粒细胞、PLT、WBC均显著提高，这和八珍汤能提高免疫球蛋白和T淋巴细胞，免疫力增加有关[19]。且从不良反应上发生率较低，骨髓抑制程度低，可见该汤剂能提高化疗后骨髓抑制病情，能提高疗效。

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（2019-03-06收稿 责任编辑：王明）