ENA多肽抗体免疫功能检测在自身免疫性疾病诊断中的应用价值

裴洪利

【摘要】 目的 探讨可溶性核抗原（ENA）多肽抗体免疫功能检测在自身免疫性疾病（AID）中的应用价值。方法 198例AID患者， 其中系统性红斑狼疮（SLE）99例， 类风湿关节炎（RA）45例， 干燥综合征（SS）24例， 混合性结缔组织病（MCTD）12例， 系统性硬化症（PSS）8 例， 自身免疫性肝炎（AIH）6例， 特发性血小板减少性紫癜（ITP）4例。另选取40例健康体检者作为对照组， 均进行ENA多肽抗体免疫功能检测。观察不同类型AID患者及对照组不同抗原IgG类抗体的免疫功能检测结果。结果 SLE患者的抗核小体抗体（抗NKS）阳性检出率为96.97%（96/99）， RA患者的抗组蛋白抗体（抗His）阳性检出率为46.67%（21/45）， SS患者的抗干燥综合征A抗体（抗SS-A）阳性检出率为66.67%（16/24）， MCTD患者的抗SS-A阳性检出率为58.33%（7/12）， PSS患者的抗硬皮病抗原70抗体（抗Scl-70）阳性检出率为62.50%（5/8）， AIH患者的抗SS-A阳性检出率为50.00%（3/6）， ITP患者的抗Scl-70阳性检出率为75.00%（3/4）。结论 ENA多肽抗体免疫功能检测可以作为AID的重要筛查手段， 尤其是NKS、SS-A、Scl-70抗体的应用敏感度更高。

【关键词】 自身免疫性疾病;可溶性核抗原多肽抗体免疫功能检测;可溶性核抗原

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.23.037

自身免疫性疾病（autoimmune disease， AID）是一種由免疫反应引发的机体相关组织受到功能障碍或损害的疾病， 目前医学界普遍认为AID的发病机制与自身抗原发生改变、免疫调节异常、交叉抗原和遗传因素有着密不可分的关系[1]。临床上针对AID的诊断多以相关免疫功能检测为主， 但由于该病可表现为多种疾病类型， 不仅各类型之间具有不同的特异性， 同时机体会产生不同抗原类型抗体， 但目前此方面相关研究较少[2]。本研究旨在通过分析不同类型的AID患者免疫功能检测结果， 探讨其诊断意义， 为临床诊断和治疗提供指导， 现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2017年1月～2018年12月本院检验科进行ENA多肽抗体免疫功能检测的198例AID患者， 纳入标准：①结合病史、临床诊断后通过抗体检测确诊为AID[3];②年龄20～70岁;③意识清晰， 拥有一定的理解和认知能力;④临床资料完整。排除标准：①哺乳期以及妊娠期或计划6个月内妊娠;②心、肝、肾功能障碍或不全;③入组前已接受相关治疗;④存在血液性疾病或恶性肿瘤病史。所有患者中， 男73例， 女125例;年龄26～65岁， 平均年龄（46.82±8.54）岁;其中20～30岁18例， 31～40岁36例， 41～50岁52例， 51～60岁53例， >60岁39例;疾病类型：SLE 99例， RA 45例， SS 24例， MCTD 12例， PSS 8 例， AIH 6例， ITP 4例。另选取同期的健康体检者40例作为对照组。

1. 2 方法 ①所有患者取清晨空腹静脉血5 ml， 以2500 r/min

的速率进行离心5 min， 分离血清， 置于非抗凝真空管内按照1∶100的比例进行稀释血清备用。②采用蛋白免疫印迹法和相关试剂盒（深圳市亚辉龙生物科技有限公司）进行ENA多肽抗体免疫功能检测， 取出抗原膜条和孵育缓冲液1 ml置入试剂反应槽， 待抗原膜条完全浸湿后1 min加入稀释血清样本1 ml， 在约25℃的室温下通过摇床进行孵育30 min后加入稀释洗涤剂1.5 ml进行反复洗涤3次以去除未结合的蛋白， 洗涤时间约5 min/次， 加入稀释过山羊抗辣根过氧化物酶（稀释比例1∶100）再次孵育30 min、反复洗涤3次后加入四甲基联苯胺（TMB）底部溶液充分反应后使用蒸馏水进行冲洗， 将抗原膜条置入滤纸中等待干燥后与试剂盒配套的特异判读卡进行比较， 比较抗核糖核蛋白抗体（抗nRNP）、抗Smith抗体（抗Sm）、抗Scl-70、抗SS-A、抗干燥综合征B抗体（抗SS-B）、抗多发性肌炎-硬化症抗体（抗PM-Scl）、抗多发性肌炎/皮肌炎标记抗体（抗JO-1）、抗双链脱氧核糖核酸抗体（抗dsDNA）、抗增殖细胞核抗原抗体（抗PCNA）、抗着丝点蛋白B抗体（抗CENP-B）、抗NKS、抗核糖体P蛋白抗体（抗Rib-P）、抗His和抗线粒体抗体-M2亚型（AMM-M2）共14种不同抗原免疫球蛋白G（IgG）类抗体的免疫功能检测结果。

1. 3 观察指标 观察不同类型AID患者及对照组不同抗原IgG类抗体的免疫功能检测结果。

2 结果

SLE患者的抗NKS阳性检出率为96.97%（96/99）， RA患者的抗His阳性检出率为46.67%（21/45）， SS患者的抗SS-A阳性检出率为66.67%（16/24）， MCTD患者的抗SS-A阳性检出率为58.33%（7/12）， PSS患者的抗Scl-70阳性检出率为62.50%（5/8）， AIH患者的抗SS-A阳性检出率为50.00%（3/6）， ITP患者的抗Scl-70阳性检出率为75.00%（3/4）。见表1。

3 讨论

AID根据临床表现而不同可分为器官特异性AID和系统性AID， 后者多由于机体的抗原抗体长期在血管壁内沉积等原因导致多器官发生胶原纤维增生从而受损， 常见的类型包括SLE、RA、系统性血管炎（SV）、SS、MCTD、PSS、皮肌炎（DM）、AIH和ITP等， 如未得到及时治疗会导致病情发展迅速， 诱发多种并发症， 对患者的生活质量带来严重影响， 致残率和致死率均较高[4]。

抗ENA抗体具体可分为可溶于等渗盐水的抗原（主要包括nRNP、Sm、Scl-70、SS-A、SS-B、PM-Scl、JO-1等）和不可溶于等渗盐水的抗原（主要包括dsDNA、PCNA、CENP-B、NKS、Rib-P、His、AMA-M2等）两种IgG类抗体[5]。本研究通过对198例不同类型AID患者及40例对照组进行不同抗原IgG类抗体的免疫功能检测发现， SLE患者的抗NKS阳性检出率为96.97%（96/99）， RA患者的抗His阳性检出率为46.67%（21/45）， SS患者的抗SS-A阳性检出率为66.67%（16/24）， MCTD患者的抗SS-A阳性检出率为58.33%（7/12）， PSS患者的抗Scl-70阳性检出率为62.50%（5/8）， AIH患者的抗SS-A阳性检出率为50.00%（3/6）， ITP患者的抗Scl-70阳性检出率为75.00%（3/4）。上述结果说明， 不同类型AID患者的抗体特异性指标不同， 这是由于抗体滴度与疾病活动性有关， 据刘萍[6]的研究证实， AID患者具有多种自身抗体， 进行ENA抗体检测能为病情的诊断和鉴别提供重要依据， 其结果与本研究结果基本一致。

综上所述， ENA多肽抗体免疫功能检测可以作为AID的重要筛查手段， 尤其是NKS、SS-A、Scl-70抗体的应用敏感度更高。

参考文獻

[1] 夏金金， 汪涛. 自身免疫性疾病发病机制新进展. 国际免疫学杂志， 2016， 39（2）：193-198.

[2] 周莲， 符明昌， 羊文芳. 抗核抗体和抗核抗体谱联合检测诊断自身免疫性疾病的临床价值. 海南医学， 2016， 27（18）：2965-2968.

[3] 高仕萍， 杨文勇， 资云菊， 等. 抗核抗体和抗核抗体谱联合检测在自身免疫性疾病诊断中的临床应用价值. 检验医学与临床， 2014， 11（2）：222-223.

[4] 辛雪亭， 杨春晓. 自身免疫性疾病研究进展. 中华神经医学杂志， 2016， 15（1）：105-107.

[5] 陈水绵， 俞翀曌， 李恩灵， 等. 自身免疫性疾病患者及健康体检者自身抗体相关实验室指标分析. 检验医学， 2018， 33（1）：31-36.

[6] 刘萍. 3578例ANA、dsDNA和ENA抗体谱联合检测结果分析. 西南国防医药， 2016， 26（5）：559-561.

[收稿日期：2019-05-24]