血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin表达水平与冠心病患者病变程度的关系

黄为俊 李艺乐 李同社

[摘 要] 目的 研究冠心病患者血清趨化因子fractalkine（CX3CL1）、硫氧还蛋白互作蛋白（thioredoxin interacting proteins，TXNIP）和内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂（visceral fat-specific serine protease inhibitors，Vaspin）表达水平与疾病病变程度的关系。方法 选取在我院诊治的100例冠心病患者，以同期100例健康人群为对照组，分别检测两组患者入院后的血脂水平和血清Vaspin、CX3CL1、TXNIP，同时分析单独检测和联合检测对患者的不同病变程度预测效率。结果 观察组患者的总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、尿酸（UA）、尿素氮（BUN）水平明显高于对照组，随着患者的Gensini积分的提升，患者的LDL明显上升，HDL明显下降（t=8.21，7.24，P<0.05）;观察组患者血清CX3CL1、TXNIP水平显著高于对照组（t=7.89，5.32，P<0.05），Vaspin水平显著低于对照组（t=8.21，P<0.05），随着患者的Gensini积分的逐渐升高，患者的Vaspin水平显著下降，血清CX3CL1、TXNIP显著上升（P<0.05）;观察组患者的CX3CL1、TXNIP水平与Gensini积分呈现正相关（r=0.65～0.77，P<0.01），Vaspin水平与Gensini积分呈现负相关（r=-0.78，P<0.01），血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平均为冠心病患者严重程度的独立危险因素;通过ROC曲线分析，随着Gensini积分的逐渐升高，血清Vaspin、CX3CL1、TXNIP水平的临界值依次为1.88μg/L，299.35ng/mL，2144.12ng/mL;1.55μg/L，317.12ng/mL，2254.53ng/mL;0.79μg/L，418.12ng/mL，2335.12ng/mL。结论 血清Vaspin、CX3CL1、TXNIP水平在冠心病发生发展的不同阶段表达水平不同，联合检测以上指标对冠心病患者的不同病变程度预测具有重要意义。

[关键词] 人趋化素;内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂;硫氧还蛋白互作蛋白;冠心病

中图分类号：R541.4  文献标识码：A  文章编号：1009-816X（2019）04-0318-05

[Abstract] Objective To study the relationship between the levels of serumCX3 chemokine ligand 1 （CX3CL1）， thioredoxin interacting proteins （TXNIP），visceral fat-specific serine protease inhibitors （Vaspin） and the degree of disease in patients with coronary heart disease. Methods 100 patients with coronary heart disease treated in our hospital were selected， and 100 healthy people were enrolled as control group. The blood lipid levels and serum Vaspin， CX3CL1 and TXNIP were measured. The prediction efficiency of individual and joint testing was analyzed. Results The levels of Total cholesterol （TC）， triglyceride （TG）， low density lipoprotein （LDL）， high density lipoprotein （HDL）， uric acid （UA） and urea nitrogen （BUN） in the observation group were significantly higher than those in the control group （P<0.05）. With the increase of Gensini score， LDL increased and HDL decreased significantly （P<0.05）. The serum levels of CX3CL1 and TXNIP in the observation group were significantly higher than those in control group （P<0.05）. The level of serum Vaspin in observation group was significantly lower than that in control group （P<0.05）. With the gradual increase of Gensini scores， the level of Vaspin in the observation group decreased significantly， while the levels of serum CX3CL1 and TXNIP increased significantly （P<0.05）; CX3CL1 and TXNIP levels in the observation group were positively correlated with Gensini scores， Vaspin levels were negatively correlated with Gensini scores， and serum CX3CL1， TXNIP and Vaspin levels were independent risk factors for the severity of coronary heart disease; ROC curve analysis showed that with the gradual increase of Gensini scores， blood levels were independent risk factors for the severity of coronary heart disease. The critical values of clearing Vaspin， CX3CL1 and TXNIP were 1.88ug/L， 299.35ng/mL， 2144.12ng/mL， 1.55ug/L， 317.12ng/mL， 2254.53ng/mL， 0.79ug/L， 418.12ng/mL and 2335.12ng/mL， respectively. Conclusions The expression levels of serum Vaspin， CX3CL1 and TXNIP are different in different stages of occurrence and development of coronary heart disease .Joint detection of the above indicators is of great significance in predicting different pathological changes in patients with CHD.

[Key words] Human chemokines; Visceral fat-specific serine protease inhibitors; Thioredoxin interacting proteins; Coronary heart disease

冠心病（CHD）是由于冠状动脉发生粥样硬化导致血管管腔狭窄或阻塞，继而心肌细胞缺血坏死所引起的，其临床表现主要为胸闷、胸痛、心肌梗死等，严重者甚至发生猝死[1]。人趋化因子fractalkine（CX3CL1）在机体炎症反应中起到重要作用，有研究报道，人体在冠状动脉粥样硬化过程中，随着粥样硬化的严重程度增加，患者CX3CL1水平大量表达[2，3]。硫氧还蛋白互作蛋白（TXNIP）是患者冠心病发生发展重要的防御系统之一，广泛参与冠心病的进展。内脏脂肪组织特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂（Vaspin）具有抵抗内皮細胞凋亡的作用[4]，通过增加内皮细胞一氧化氮（NO）的利用度，增加内皮细胞的抗炎作用，进而达到保护血管的作用，与冠心病呈现负相关[5]。本研究将通过冠心病患者血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin表达水平与疾病病变程度的关系研究，为临床诊断和治疗提供科学依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料：研究对象为2016年6月至2017年6月在我院诊治的100例首次因胸痛、胸闷就诊的CHD患者为观察组。纳入标准：（1）所有患者均符合CHD诊断标准[6];（2）所有患者签署知情同意书。排除标准：（1）急性心功能不全、先天性心脏病、原发性心肌病等非冠状动脉狭窄所致的心脏病;（2）脑血管病;（3）肝肾功能障碍;（4）自身免疫性疾病;（5）急性感染、慢性感染急性发作;（6）Ⅱ型糖尿病;（7）活动性肺结核或恶性肿瘤患者;（8）已发生心力衰竭者;（9）年龄不足18周岁者;（10）严重精神疾病患者。以同期100例健康人群为对照组。观察组患者男62例，女38例，年龄51～84岁，平均（66.57±5.04）岁。根据患者的冠状动脉狭窄情况，依据Gensini积分，Gensini积分在30分以下患者39例;Gensini积分在30～60分患者33例，Gensini积分在60分以上患者28例。对照组患者男60例，女40例;年龄51～84岁，平均（66.25±5.11）岁。两组患者性别、年龄之间的差异无统计学意义（P>0.05）。本研究经本院伦理委员会批准，所有患者或其家属均对此次研究知情且签署知情同意书。

1.2 方法：入院第2天清晨空腹抽取外周静脉血5mL，3000r/min离心10min取上清液，-80℃储存。采用RLMax型全自动生化分析仪（德国西门子公司）测定受试者的血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）、尿酸（UA）、尿素氮（BUN）水平。采用酶联免疫吸附（ELISA）法测定血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平，仪器为NDM-9602G型全自动酶标分析仪（北京普朗新技术有限公司），所用试剂为美国R&D公司产品。所有试剂均在有效期内使用，严格按照仪器说明书的实验步骤进行所有操作。

1.2.1 冠状动脉造影检查：对所有患者进行冠状动脉造影检查，采用Gensini积分系统对两组患者进行疾病危险因素分析。Gensini积分[7]：患者冠状动脉狭窄情况在25%以内，则为1分;患者冠状动脉狭窄在26%～50%之间则为2分，患者冠状动脉狭窄在51%～75%之间为4分，患者冠状动脉狭窄在76%～90%之间则为8分，患者冠状动动脉狭窄在91%～99%之间则为16分，患者冠状动脉狭窄为100%为32分。依据患者的病变部位，乘以其相应系数。其中，病变部位为左主干，其系数为5;病变部位为左前降支或回旋支，其系数为2.5;病变部位为左前降支中段，其系数为1.5;病变部位为左前降支远端、左回旋支中远端、右冠状动脉，其系数为1;病变部位为小分支，其系数为0.5。

1.2.2 观察指标：（1）两组及不同Gensini积分患者的TC、TG、LDL、HDL、UA、BUN情况。（2）两组及不同Gensini积分患者的CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平情况。（3）单独检测和联合检测对不同Gensini积分患者的诊断效能对比。其中血清Vaspin、CX3CL1、TXNIP水平的临界值依次为1.88μg/L，299.35ng/mL，2144.12ng/mL;1.55μg/L，317.12ng/mL，2254.53ng/mL;0.79μg/L，418.12ng/mL，2335.12ng/mL。

1.3 统计学处理：采用SPSS20.0版软件对数据进行分析。其中计量资料以（x -±s）表示，三组间比较采用方差分析，多组间的两两比较采用LSD-t检验;计数资料以例（%）表示，组间比较采用χ2检验;血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平与Gensini积分的相关性分析采用Pearson直线相关分析;Gensini积分的危险因素采用二元Logistic回归分析;CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平的诊断价值通过绘制ROC曲线进行判断，采用Hanley-McNeil方法比较ROC曲线下面积。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血脂和血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平比较：观察组患者的TC、TG、LDL、HDL、UA、BUN水平明显高于对照组;观察组患者血清CX3CL1、TXNIP水平显著高于对照组（P<0.05），观察组患者的血清Vaspin水平显著低于对照组（P<0.05），见表1。

2.2 观察组不同Gensini积分患者血脂和血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平对比：对不同Gensini积分患者的TC、TG、LDL、HDL、UA、BUN对比，结果显示随着患者的Gensini积分的提升，患者的LDL明显上升，HDL明显下降，其余指标未见明显差异。通过对不同Gensini积分患者的血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平对比，发现随着患者的Gensini积分的逐渐升高，患者的Vaspin水平显著下降，血清CX3CL1、TXNIP显著上升，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

2.3 血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平与Gensini积分的相关性分析：观察组患者的CX3CL1、TXNIP水平与Gensini积分呈正相关（r=0.65、0.77，P<0.05），Vaspin水平与Gensini积分呈现负相关（r=-0.78，P<0.05）。

2.4 Gensini積分的危险因素多因素分析：通过对不同Gensini积分的多因素回归分析，以Gensini积分为因变量，血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平作为自变量。结果显示血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平均为冠心病患者严重程度的独立危险因素，见表3。

2.5 单独检测和联合检测对不同Gensini积分患者的诊断效能比较：通过对不同Gensini积分患者的诊断效能对比观察，联合检测的ROC曲线下面积及检测灵敏度均高于单独检测，见表4。

3 讨论

根据流行病学研究显示，到2020年CHD将持续成为全球死亡的首位原因[8]。目前对于CHD疾病的治疗研究已经从药物治疗逐渐到介入手术等多层次、多学科的研究，但是，就目前的研究而言，CHD疾病带给患者除了巨大的生理性痛苦外，患者的经济压力与日俱增[9]。所以，在研究治疗CHD的有效方法的同时，还应从诊断切入，做到预防为主的同时，早发现、早诊断、早干预、早治疗。

目前临床医学认为，脂质代谢是冠状动脉粥样硬化最为重要的病理环节之一[10]，同时，随着冠状动脉粥样硬化状态的不断恶化，脂质代谢异常也是冠状动脉斑块形成的重要因素之一[11]。TC和TG对于冠状动脉的血管壁硬化和衰老具有显著作用，最终导致患者血管弹性降低，患者血管炎性反应剧烈，最终导致患者斑块形成，严重影响患者的生命安全[12]。在疾病的进展过程中，血清Vaspin作为机体的保护性因子[13]，在内皮细胞的修复过程中，能够诱导NO的生物合成，改善血管壁的炎症状态及保护内皮细胞的作用，所以在临床工作中血清Vaspin水平可作为患者血管内皮损伤的重要依据[14]。本研究中，随着患者Gensini积分明显上升，患者的血清Vaspin水平明显下降，提示由于患者局部血管的炎性反应造成的内皮损伤超出了患者的自我修复能力，对于疾病的严重程度的诊断具有积极的意义。袁海等[15]在氢氯噻嗪并缬沙坦对高血压患者的治疗中，随着患者血压的控制，血清Vaspin水平明显上升，患者冠状动脉狭窄情况得到明显改善，其冠状动脉狭窄情况与血清Vaspin水平呈现负相关，与本研究相互印证。

在冠心病患者的诊断治疗中，冠状动脉斑块的形成以及发展与患者的预后以及疾病分型密切相关。而血清CX3CL1、TXNIP表达水平与患者的冠状动脉的炎症反应有关。CX3CL1是趋化因子CX3C中的重要成员，在血管平滑肌细胞中高度表达，随着患者的组织因子抗原表达，参与患者凝血酶的形成，进而促进患者冠状动脉血栓形成。同时，还参与患者血栓形成后的炎性反应，导致患者冠状动脉的不稳定性，最终形成恶性循环。TXNIP通过介导患者的应急氧化反应，导致患者的胰岛素抵抗以及炎症反应，激活患者炎性因子，最终导致黏附因子表达。随着炎症反应的不断加剧，患者冠状动脉斑块也随之发生变化，最终导使冠状动脉狭窄甚至堵塞。有研究报道显示，患者的冠状动脉斑块的积聚以及管腔狭窄与炎症反应密切相关。以往研究显示，血清CX3CL1、TXNIP表达水平与患者的疾病进展呈现正相关[11，16]。本研究中，不同型别的冠心病患者，随着病情的加重，其血清CX3CL1、TXNIP水平呈现上升趋势是冠心病患者独立危险因素，与文献报道一致[17]。

本文通过对三种血清因子的单独检测和联合检测ROC曲线分析发现，联合检测血清Vaspin、CXCL13、TXNIP对于CHD患者不同病变程度的判定检测效率较高，推断认为，三种血清因子对于冠心病的发生发展在不同的阶段进行作用，血清Vaspin主要对患者的炎性反应和内皮损伤情况进行评估，血清CXCL13主要对患者斑块形成的不稳定因素进行作用，而TXNIP则是在对患者的冠心病最起初的病因进行刺激作用，通过对不同阶段患者的全面预后分析，其效率较高。

综上所述，血清Vaspin、CX3CL1、TXNIP表达水平对冠心病发生发展的不同阶段进行作用，联合检测以上指标，对CHD患者的不同病变程度预测具有重要意义，值得在临床工作中进行推广。

参考文献

[1]Khamis RY， Ammari T， Mikhail GW. Gender differences in coronary heart disease[J]. Heart，2016，102（14）：1142-1149.

[2]陈慧敏，许逸飞.曲美他嗪联合阿托伐他汀钙治疗冠心病心绞痛伴血脂异常的临床研究[J].中国临床药理学杂志，2016，32（11）：966-968.

[3]陈航，卢聪，闫亚非.他汀类药物在冠心病治疗中的多效性[J].现代临床医学，2013，39（5）：386-389.

[4]陈伟光，王柏春，官莹，等.G1254023X对白细胞介素6受体、趋化因子CX3CL1的抑制作用及其对冠心病的影响[J].国际免疫学杂志，2017，40（4）：396-400.

[5]杨阿应，白亚娜，解芝洞，等.2001-2013年金昌队列人群冠心病死亡趋势及疾病负担研究[J].中华疾病控制杂志，2017，21（3）：261-264.

[6]韩雅玲.冠心病抗栓诊治中国临床循证及指南共识[J].中华医学信息导报，2016，31（20）：16.

[7]Anil A， Serdar F， Mustafa TM， et al. Association between the Gensini score and carotid artery stenosis[J]. Korean Circ J，2016，46（5）：639-645.

[8]王阶，李军，毛静远，等.冠心病心绞痛主要证型的辨证诊断标准[J].中国中西医结合杂志，2018，38（2）：154-155.

[9]李永姝，张宝欢，贾克刚，等.CX3CL1和CX3CR1与动脉粥样硬化性心脏病损伤机制的研究现状[J].检验医学，2016，31（11）：1002-1010.

[10]童方念，张效林，程茗慧，等.趋化因子CX3C受体1基因rs3732378多态性与急性冠状动脉综合征的相关性[J].中国动脉硬化杂志，2017，39（2）：173-178.

[11]张效林，梁振洋，孙莹，等.趋化因子CX3CL1与冠心病合并2型糖尿病发病的相关关系[J].现代生物医学进展，2017，17（4）：645-648.

[12]杨明琦，刘妍妍.血清Vaspin、ATGL水平与老年患者冠心病危险因素及严重程度的相关性[J].现代医学，2018（4）.402-406.

[13]Chen X， Deng Q， Na AN， et al. Value of serum Fractalkine and Vaspin contents for the diagnosis of coronary heart disease and the correlation with cardiac function and myocardial injury[J]. Journal of Hainan Medical University，2017，23（19）：15-18.

[14]張汝锋，娄国忠.不同类型冠心病患者的血清Vaspin、ATGL水平及基因表达量研究[J].中华全科医学，2017，10（1）：45-47.

[15]袁海.氢氯噻嗪并缬沙坦对高血压患者疗效、心功能及血清RBP4、Vaspin水平的影响[J].心血管康复医学杂志，2017，26（5）：503-507.

[16]盛蕾，祝聪聪，罗松辉，等.血清硫氧还蛋白结合蛋白在冠心病中临床意义[J].中西医结合心脑血管病杂志，2016，14（17）：2046-2048.

[17]张效林，梁振洋，孙莹，等.血清CX3CL1水平对冠心病的临床意义探讨[J].现代生物医学进展，2017，7（3）：27-30.