碘过量对成年Balb/c小鼠小脑形态学的影响

宋翠荣 张海峰

摘 要：[目的]探讨碘过量对Balb/c小鼠小脑形态学的影响。方法 取断乳一个月的Balb/c小鼠，雌雄各半，随机分为3组：适碘组（NI），10倍碘组（10HI），50倍碘组（50HI）。给与不同剂量碘化钾饲养三个月后处死取大脑。 焦油紫染色和镀银染色观察小脑形态并进行计量学分析。[结果]与同月份NI组比较，实验3个月亲代各碘过量组小脑形态学无明显改变（P>0.05）。结论 碘过量不会造成成年Balb-c小鼠的小脑形态学变化。

关键词：高碘;小鼠;小脑

小脑维持机体平衡，调控运动协调功能。碘摄入量过低会使仔鼠小脑发育受阻，国内某些学者在碘过量的小鼠也发现其脑发育落后，尽管碘过量会使小脑功能障碍的研究已有报道，但尚缺乏进一步细致的定量研究。为进一步探明碘过量对小脑功能障碍的影响，本实验选择3个月成鼠作为观研究对象，采用焦油紫染色和镀银染色观察不同剂量碘对小脑皮质和髓质形态的影响。

1 材料和方法

1.1 实验动物分组与饲养方法

1.2 实验方法和实验指标

1.2.1 脑绝对、相对重量

以上三组动物分别喂养至三个月及六个月，用断颈的方法把动物处死，称体重后完整取出脑组织，用冷盐水清洗后滤纸拭干，接着用1/1000分析天平称重，计算脑组织的相对重量（全脑重量除以其体重）。

1.2.2 组织切片及染色

把固定液中的大脑租出，在正中矢状面切开，右侧大脑进行石蜡包埋。在距端脑（嗅脑）9mm处开始作冠状连续切片，厚度5μm，每隔6张取一张，每只动物取8张，贴于涂有蛋白甘油的载玻片，作焦油紫染色， 做硝酸银染色的切片厚度为20μm，每隔5张取一张。

1.2.3 形态计量学分析

依照大鼠断层图谱定位在小脑原裂及其前方的山顶区，拍摄低倍镜下（10×10）下小脑图像（焦油紫染色），继而在每个小叶皮质的侧壁处随机选取8个部位测量其分子层、颗粒层厚度;然后选用油镜（100×10）拍摄此区域的蒲肯野细胞层蒲肯野细胞的图像，计算蒲尼氏体在肯野细胞胞体中的面积比，每张切片随机选10个细胞，每只小鼠计量8张切片。

1.3 统计学方法

测量数据以均数±标准差（x±s ）表示，采用SPSS21.0统计学软件包进行统计学分析。

2 结果

2.1 全脑绝对重量和相对重量（见表1）

经方差分析：各碘过量组脑绝对重量和相对重量和适碘组比没有明显变化。

2.2 小脑的形态学观察

2.2.1 焦油紫染色

在低倍镜（4×10）观察适碘组小鼠，其表面是小脑皮质即灰质，皮质下为髓质即白质，表面被浅沟分隔成许多个小叶片。小脑皮质从外到内分为三层：即分子层、蒲肯野细胞层和颗粒层。高倍镜（40×10）可见分子层较厚，神经元较少;蒲肯野细胞层由一层蒲肯野细胞胞体组成;颗粒层有密集的颗粒细胞和一些高尔基细胞组成。油镜（100×10）下观察蒲肯野细胞，可见其胞体略呈梨形，核大而圆、位于中央染色浅、核仁明显，胞质内可见染色为深紫色、颗粒状或斑块状尼氏体。各碘过量组小鼠小脑镜下形态与同月份相近，未见明显改变。

2.2.2 镀银染色观察

各实验组小鼠小脑皮质各层分层明显，小脑山顶区蒲肯野细胞可见棕黑色蒲肯野细胞，其胞体成梨形，从顶端发出2～3条粗的主树突伸向分子层，树突的分枝繁多，数突棘多而密集，未见到其轴突。各实验组小鼠小脑前叶的蒲肯野细胞密集程度和着色深浅未见明显不同。

2.3 形态计量学分析结果

焦油紫染色形态计量学分析结果（分子层、颗粒层厚度和尼氏体占胞体的面积比）。

经统计学分析：各碘过量组与同月份NI组比较，其小脑山顶区的分子层、颗粒层厚度均无明显改变（P>0.05）。

经统计学分析：实验3个月各碘过量组与同月份NI组比较小脑蒲肯野细胞层蒲肯野细胞胞体中尼氏体的面积比均无明显差异（p>0.05）。

3 讨论

碘是合成甲状腺激素的主要原料，甲状腺激素是调节脑发育的一种重要激素。甲状腺激素通过促进细胞的增殖;合成微管结合蛋白和微管蛋白，增加微管的组装;促进轴突、树突的生长;促进突触的发生和髓鞘的形成等途径刺激神经系统的发育，影响小脑神经细胞的增殖分化、神经元的移行、神经突起的分支、轴突的延伸、髓鞘化和突触形成等。

本研究结果表明，机体摄入过量的碘时，甲状腺会呈现较强的自我保护和代偿能力，使其自身的含碘量维持在一个相对稳定的水平，来稳定甲状腺的功能。当碘摄入量为正常摄入量的50倍以内时，不会明显影响仔鼠小脑的发育。但当仔鼠长期处于严重碘过量，即大于生理需要量50倍以上时，由于长期摄入过多的碘造成甲状腺功能的失代偿，甲状腺激素水平减少，会引起小脑发育落后。本实验结果为碘过量的防治提供了有力的实验依据，并可能为进一步探明碘过量引起小脑功能障碍的机制提供了新的定量形態学资料。

参考文献

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