鸡腿菇多糖减轻运动疲劳的机理分析*

2020-03-25 10:37
中国食用菌 2020年2期
关键词:光度自由基多糖

饶 瑶

(江西科技学院,江西 南昌 330098)

鸡腿菇(Coprinus comatus),学名“毛头鬼伞”,通体较白,菌杆细长,形如鸡腿,而且菌肉也与鸡丝形态相似,因此而得名,但其本身却并无鸡肉味。鸡腿菇味道鲜美、肉质细腻,烹饪时久煮不烂,口感滑嫩,是倍受青睐的美食;同时,鸡腿菇也是一种药用菌,具有降糖、通便消渴的功效,对糖尿病、痔疮等有良好的治疗效果,还具有安神助眠、提高人体免疫力的作用,对运动人群还具有抗氧化、抗疲劳的功效[1]。这些功效主要得益于鸡腿菇中含有的多糖,鸡腿菇多糖具有抗菌、抗氧化的作用,可以提高人体耐缺氧能力,降低血液的粘稠度,增加心肌收缩力[2]。因此,常被用于运动员训练后的恢复和保健,对运动员的身体健康,保持运动机能具有重要的作用。鸡腿菇多糖虽然在运动恢复和提升免疫力方面有一定功效,但其作用机理和临床研究还不成熟,而且对于大分子的鸡腿菇多糖,其组成成份比较复杂,多糖的稳定性和抗氧化活性还需要进一步研究。对鸡腿菇多糖的稳定性和对运动员身体的抗氧化性活性开展研究,通过试验讨论鸡腿菇多糖对减轻疲劳的影响。

1 试验材料和设备

1.1 材料与试剂

邻二氮菲,成都化学试剂厂;硫酸亚铁、过氧化氢,西安化学试剂厂;95%乙醇,天津市百世化工有限公司;DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼),日本东京化成工业株式会;以上试剂均为分析纯。蒸馏水,济南青玉元商贸有限公司;磷酸二氢钠、磷酸氢二钠,西安化学试剂厂;以上试剂均为化学纯。

鸡腿菇多糖样品溶液自行配制,使用南京植佰萃生物科技有限公司产的鸡腿菇多糖粉末(多糖含量为50%)。

1.2 仪器与设备

紫外可见分光光度计,上海元析仪器有限公司;电热恒温水浴锅,北京化玻联医疗器械有限公司;JA5003分析天平,上海精科天平有限公司;PHS-3C型pH计,上海精密科学仪器有限公司;FA2004电子天平,上海精密科学仪器有限公司;RHP-225恒温(干燥)箱,东莞市环瑞环境测试设备有限公司。

2 鸡腿菇多糖抗氧化活性试验

自由基又称游离基,是一种含有非偶电子的原子团[3],其化学反应的活性极高,由于自由基缺少电子,因此总是在人体中到处抢夺人体细胞的电子,使正常细胞发生畸变,形成各种肿瘤细胞。人体中的自由基多来自于氧,所以这种自由基“掠夺电子”的现象在化学中称之为“氧化”现象,这种氧自由基对人体的危害极大,会导致各种疾病产生,危害人体健康。即使在非疾病时期,对运动员来说的疲劳、脑缺血、耐力和体能下降等运动生理现象也有极大的影响[4]。因此,寻找外部清除自由基的物质具有重要的意义。近年来的研究发现,多糖类物质具有很好的生物活性,具有清除自由基的功效,因此本文就对鸡腿菇多糖的生物抗氧化活性进行研究。

2.1 鸡腿菇多糖对羟自由基(·OH)的清除试验

·OH通过Fenton反应产生,利用过氧化氢(H2O2)与二价铁离子(Fe2+)的混合反应,Fe2+被羟自由基氧化为Fe3+,产生的·OH氧化效果十分显著,可以将有机化合物氧化为无机状态。

因此,通过Fenton反应来得到羟自由基[5],通过比色法测定·OH的清除率。具体试验过程为,取0.75 mol·L-1邻二氮菲溶液1 mL,在试管中加入0.2 moL·L-1的磷酸盐缓冲溶液(pH 7.4) 1 mL;分别取浓度10%、20%、30%、40%、50%的鸡腿菇多糖样品溶液1 mL,加入试管混合摇匀,空白组加入1 mL蒸馏水;依次分别加入0.75 moL·L-1FeSO4溶液1 mL和0.01%H2O2溶液1 mL混合摇匀,对照组用蒸馏水替代H2O2,放入电热恒温水浴锅于(40±2)℃保持30 min,然后使用分光光度计在540 nm处测量吸光度。·OH清除率(OE,%) 的计算公式为:

式中:X为样品吸光度;X0为空白吸光度;XC为对照吸光度。

2.2 鸡腿菇多糖对DPPH·的清除试验

DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基醇溶液呈紫色,根据DPPH·有单电子,在520 nm处有一强吸收,其醇溶液呈紫色。当有自由自清除剂存在时,单对电子被配对,吸收消失或减弱,抗氧化剂(或称自由基清除剂)能使单电子配对,从而使吸光度值消失或减弱,肉眼观察也会有紫色溶液褪色的现象。因此通过测定吸光度值的减弱程度来可评估DPPH·清除剂的活性。将鸡腿菇多糖样品液2 mL加入到含0.1 moL·L-1的DPPH·的95%乙醇2 mL中,混合均匀后在室温下避光静置30 min,在520 nm处测量吸光度,空白组用2 mL蒸馏水替代样品液。DPPH·清除率(DE,%)的计算公式为:

式中:X、X0分别为鸡腿菇多糖样品组和空白组的吸光值。

3 试验结果与讨论

3.1 鸡腿菇多糖对·OH的清除作用

浓度为10%、20%、30%、40%、50%的鸡腿菇多糖样品溶液对·OH的清除作用见图1。

由图1可知,鸡腿菇多糖对·OH都具有一定的清除活性,且随着浓度的增加清除作用增强。

3.2 鸡腿菇多糖对DPPH·的清除作用

浓度为10%、20%、30%、40%、50%的鸡腿菇多糖对DPPH·的清除作用见图2。

由图2可知,鸡腿菇多糖对DPPH·都具有一定的清除活性,且随着浓度的增加对DPPH·的清除作用增强。

4 结论

通过不同浓度的鸡腿菇多糖溶液对·OH和DPPH·的清除作用试验表明,鸡腿菇多糖对·OH和DPPH·都具有一定的清除活性,且清除率与多糖的浓度成正比关系,这说明鸡腿菇多糖对运动员身体内的自由基有很好的清除作用,而自由基是人体运动后出现疲劳的主要原因,鸡腿菇多糖可以有效提高人体清除自由基的能力,防止人体细胞膜的过氧化损伤,减轻运动员的疲劳。

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