国产精子计数板在长白公猪精液检测上的应用研究

崔小荣，陈志林，黄梅，师晓杰，陈兴荣，梁振华，陈斌灿，严广宽

（温氏食品集团股份有限公司，国家生猪种业工程技术研究中心，广东 云浮 527400）

精液的常规检测是评价公猪精液质量的一项基本检查。近年来，养猪行业逐渐出现一些新的自动检测技术应用在精液的常规分析检测中，如CASA(Computer-aided sperm analysis)分析系统、EasyCyte分析仪、Magapor GESIPOR 分析系统等。然而这些精液分析仪配套的精子计数板存在价格高、不便清洗等缺点[1]。此试验主要以精子计数板为研究对象，研究国产的精子计数板产品代替进口的精子计数板产品的可行性，以期为猪的精液检测节省费用并提供参考与借鉴。

1 材料与方法

1.1 试验动物

试验动物来自温氏食品集团股份有限公司山东聊城地区种猪场，共计81 头长白温系公猪，公猪不同生理阶段饲粮营养水平依据中国《猪饲养标准》（NY/T 65—2004）。试验数据采集于2019 年6 月至2019年10 月，试验过程主要对公猪的耳号、精液采集时间及采精量、精子密度、精子活力、正常及异常精子数量等指标进行记录。

1.2 试验主要材料

猪精液的质量分析采用进口的自动检测系统（如图1），其中进口的精液自动检测系统、进口的精子计数板、移液枪等采购于西班牙某公司；国产的精子计数板则由广州某公司提供，国产精子计数池的深度设计为10 μm。

1.3 试验方法

公猪站采精人员每天上下午各采精1次，具体操作时间如表1所示。采精完成后，精液检测步骤如以下：1）对原精进行称重，并记录参数；2）打开自动检测系统GESIPOR3.0，在页面中的相应位置输入公猪耳号，并打开采精检测页面；3）点击公猪、采精员，并录入相应信息；4）把原精轻轻地搅拌，使其均质，再取100 ul 原精和900 ul 稀释液在等温37 ℃下稀释混合；5）混合均质后取3.5 ul 滴到相应的精子计数板上；6）用10 倍物镜和10X 光圈检测活力、对屏幕视野进行拍照分析，随机分析3 个不同视野，然后再点击活力、密度和正常形态等分析，同时在采精页面读取检测结果。

1.4 统计方法

试验数据采用Microsoft Excel 2010 进行整理筛选，精子数、精子密度、精子活力等指标使用SPSS 19.0 软件的单因素方差分析LSD 法进行差异显著性检验，结果均使用平均值±标准误的形式表示。

2 结果与分析

2.1 不同精子计数板对长白公猪精液参数的影响

由表2 可知，不同的精子计数板对长白公猪精液的精子密度、精子活力、正常精子比例等参数没有产生显著差异性。进口组精子计数板测得的随机3 个视野平均精子数、精子密度、精子活力、正常精子比例分别为566.06个、249.56×106/ml、92.65%、71.52%；国产组则对应测得为577.02 个、252.68×106/ml、91.32%、72.65%，以上两组的同一指标相比均差异不显著。综合以上，相比进口的精子计数板，国产的精子计数板在长白公猪精液的各项参数间无统计学差异；国产的精子计数板替代进口的精子计数板是可行的。

表1 公猪站采精时间

表2 不同精子计数板对长白公猪精液参数的影响

3 讨论

精子计数板作为精液常规分析的必备工具已在养猪生产上广泛使用。不论是传统的光学显微镜分析还是新的自动检测系统分析，精液必须滴入精子计数池后才能进行分析[2]。而不同厂家配套的精子计数池其深度一般不统一，以10 μm和20 μm 深度的计数池最为常见。此试验的国产精子计数池深度为10 μm，用以分析精液的精子密度、精子活力、正常精子比例等参数，探讨其代替进口的不可重复使用的精子计数板产品的可行性。试验结果表明，与进口的精子计数板产品相比，国产的精子计数板产品在长白公猪精液的各项参数间无统计学差异；国产的精子计数板产品可替代进口的精子计数板产品在养猪生产中应用。

此外，国产计数板产品对于降低使用成本上也有一定优势。当前，精液自动分析仪配套的进口精子计数板产品一般存在价格高、不可重复使用等问题，其一般市场售价为5 ～6 元/腔，25 ～30 元/板；而此试验的国产计数板产品的市场价格 一 般 在2 ～3 元/腔，10 ～15元/板，且可重复使用2 ～3 次。因此，使用国产计数板产品更加经济适用，有利于降低公猪精液的检测成本。