三七葡萄籽软胶囊抗氧化功能实验研究

周艳梅，马 妮 ，高明菊，杨 福，李建明

（1.云南七丹药业股份有限公司，云南文山663099；2.文山学院文山三七研究院，云南文山663099）

三七葡萄籽软胶囊是以三七提取物、葡萄籽提取物为主要成分研究开发所得的保健食品。方中三七提取物是从五加科人参属植物三七中提取的活性成分，其主要成分为三七总皂苷（PNS）、黄酮、糖类等。有学者测定三七多糖、总黄酮、总皂苷（PNS）还原/抗氧化能力及清除DPPH自由基、羟自由基、ABTS自由基、超氧自由基能力，均表明三七具有较强的抗氧化作用，能保护DNA免受自由基氧化损伤[1～2]。葡萄籽含有丰富的亚油酸、原花青素、蛋白质等活性成分，而葡萄籽提取物为从葡萄籽中提取的生物类黄酮，具有抗氧化活性，广泛应用于食品、药品、化妆品等领域[3]；葡萄籽提取物能升高小鼠血中SOD和GSH-Px活性，具有明显的抗脂质过氧化作用[4]。

1 材料

1.1 实验动物

实验动物为北京维通利华实验动物科技有限公司提供的SPF级ICR品系雄性小鼠100只，体重25g～30g。实验动物生产许可证号：SCXK （京）2012-0001。

1.2 样品

三七葡萄籽软胶囊，由云南七丹药业股份有限公司提供。规格0.5g/粒。人口服推荐剂量为每日2次,每次2粒,成人体重按60kg计算,折合人体日推荐剂量33mg/kg·bw。取胶囊内容物进行实验。

1.3 主要仪器及试剂

天平、TU1901型紫外可见分光光度计、酶标分析仪、恒温水浴锅。

橄榄油，D-半乳糖，注射用生理盐水，丙二醛（MDA）测试盒，蛋白质羰基试剂盒，微量还原型谷胱甘肽（GSH）试剂盒，SOD 试剂盒（WST-1法）。

2 实验方法

健康雄性成年小鼠100只，适应性饲养3天，选取25g～30g小鼠 （剩余小鼠处死），用D-半乳糖100mg/kg BW腹腔注射造模，注射量0.1ml/10g，每日1次，连续造模6周，眼眶取血测定血清MDA，按MDA水平分组，随机分为1个模型对照组和3个受试物剂量组，每组15只小鼠（剩余小鼠处死）。受试物3个剂量组小鼠分别经口给予受试样品1000.0mg/kg BW，333.3mg/kg BW,166.7mg/kg BW（分别相当于人体日推荐用量的30、10、5倍），模型对照组给予等体积橄榄油，每天给予1次，同时继续腹腔给予100mg/kg D-半乳糖，连续给予30天，给予期间每周测1次体重。实验结束处死小鼠，测定小鼠脂质氧化产物，丙二醛（MDA）含量，蛋白质氧化产物，蛋白质羰基含量，抗氧化物质，还原性谷胱甘肽（GSH）含量，抗氧化酶，谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力。

3 数据处理和统计方法

实验数据采用SPSS11.5软件做方差分析。

4 实验结果

4.1 三七葡萄籽软胶囊对小鼠体重的影响

结果如表1所示，给予受试物实验期间，受试物各剂量组与模型对照组相比，小鼠体重无显著性差异（P＞0.05）。

表1 三七葡萄籽软胶囊对小鼠体重的影响（X±SD，n=15）

4.2 三七葡萄籽软胶囊对小鼠血清MDA含量的影响

结果如表2所示，给予受试物30天后，受试物各剂量组与模型对照组相比，脂质氧化产物MDA含量均显著降低（P＜0.01）。

表2 三七葡萄籽软胶囊对小鼠血清MDA含量的影响（X±SD，n=15）

4.3 三七葡萄籽软胶囊对小鼠血清蛋白质羰基含量的影响

结果如表3所示，给予受试物30天后，受试物高、中、低剂量组与模型对照组相比，蛋白质羰基含量均显著减低（P＜0.01，P＜0.05，P＜0.01）。

表3 三七葡萄籽软胶囊对小鼠血清蛋白质羰基含量的影响（X±SD，n=15）

4.4 三七葡萄籽软胶囊对小鼠血清GSH含量的影响

结果如表4所示，给予受试物30天后，受试物各剂量与模型对照组相比，抗氧化物质GSH含量均无明显差异。

表4 三七葡萄籽软胶囊对小鼠血清GSH含量的影响（X±SD，n=15）

4.5 三七葡萄籽软胶囊对小鼠血清GSH-Px活力的影响

结果如表5所示，给予受试物30天后，受试物各剂量组与模型对照组相比，抗氧化酶GSH-Px活力均显著性提高（P＜0.05 或P＜0.01）。

表5 三七葡萄籽软胶囊对小鼠血清GSH-Px活力的影响（X±SD，n=15）

5 结论

分 别 以 1000.0mg/kgBW、333.3mg/kgBW、166.7mg/kg BW （分别相当于人体日推荐用量的30、10、5倍）剂量的三七葡萄籽软胶囊，经口给予D-半乳糖氧化损伤模型小鼠30天，能够降低小鼠血清中脂质氧化产物和蛋白质氧化产物含量，同时提高抗氧化酶活力，但对抗氧化物质无明显影响。根据国食药监保化[2012]107号文附件1：抗氧化功能评价方法判定[5]，三七葡萄籽软胶囊对D-半乳糖氧化损伤模型小鼠具有抗氧化功能。

6 讨论

三七葡萄籽软胶囊选方以三七提取物和葡萄籽提取物为主要原料，其中三七提取物中含三七总皂苷等活性成分，高云涛[2]等发现，三七总皂苷具有良好的清除氧自由基和抗氧化能力；胡军霞[6]发现，三七醇提物对体外氧化损伤模型有很强的抗氧化作用，对辐射引起的大鼠体内肝脏氧化损伤具有一定的抗氧化损伤修复功效。而葡萄籽提取物中有大量的活性酚羟基，是氢的供体，能有效地清除多种活性氧自由基，影响某些酶的生物活性，具有极强的抗氧化活性[7]。

本实验中，D-半乳糖氧化损伤模型中，经口连续给予不同剂量的三七葡萄籽软胶囊30d，可明显降低血清中的MDA含量，并提高GSH-Px活力。提示三七葡萄籽软胶囊的抗氧化作用可能通过抑制MDA的生成，提高GSH-Px的活性起作用。GSH-Px是机体内催化过氧化氢分解的一种酶，它特异性催化还原谷胱甘肽（GSH）还原过氧化氢反应，增强这些抗氧化酶清除自由基的能力，减少过氧化产物丙二醛的生成，从而减少氧化应激反应；由此表明三七葡萄籽软胶囊可抑制血清中MDA的生成，而增强GSH-Px活力达到抗氧化作用。