不同浓度戊二醛对种蛋表面消毒效果的影响

2020-05-21 01:12张柱琦关文怡曹金元周珍辉
养殖与饲料 2020年2期
关键词:福尔马林戊二醛种蛋

张 浩 张柱琦 关文怡 曹金元 周珍辉

北京农业职业学院,北京102442

福尔马林熏蒸消毒是孵化厅消毒种蛋最常用的方法,福尔马林熏蒸法可以杀死蛋壳表面绝大多数病原体[1],消毒效果好,但福尔马林熏蒸消毒存在诸多问题,对人呼吸道及眼的刺激性大,对孵化厅的工人造成伤害。据孙成浩等[2]报道,种蛋入孵前用28 mL/m3福尔马林电磁炉加热0.5 h,种蛋平均消毒合格率仅为80%左右,另外还存在冬季液体福尔马林受冻凝固、熏蒸后残渣不易处理、成本较高等问题。戊二醛是近年来常用于种蛋消毒的一种消毒剂[3],它刺激性小,在国内许多孵化厅替代福尔马林熏蒸消毒,为确定戊二醛的消毒效果,并筛选合适的消毒浓度,本试验选用1%、2%和5% 3 种浓度的戊二醛进行种蛋的消毒效果对比试验。

1 材料与方法

1.1 材料

1)试剂。戊二醛溶液:规格20%(g/g),产品批准文号:兽药字(2014)162821278;培养基:营养琼脂培养基(批号20190305),购于北京天坛生物制品股份有限公司,其制备按厂家提供的说明方法进行。

2)试验仪器。生物安全柜(BSC-1360IIA2,北京东联哈尔滨制造有限公司)、恒温鼓风干燥箱(2XFD-B5140,上海智联分析仪器制造有限公司)、电热恒温培养箱(2XDP-2160,上海智联分析仪器制造有限公司)、立式自动电热压力蒸汽灭菌器(LXB35L,合肥华泰医疗设备有限公司)、一次性使用培养皿(90 mm,泰州市顺飞医疗器械有限公司)等。

3)被测种蛋。来自北京农效禽业有限公司父母代种鸡场280日龄罗曼褐种鸡。

1.2 方法

1)鸡蛋分组编号。从孵化厅取大小基本一致的200 枚鸡蛋,从中随机选取40 枚,随机分成4 组,1%、2%、5%浓度组和对照组,每组10 枚,4 个组的鸡蛋分别放置于消毒的塑料袋内密封,常温保存。

2)消毒液配制。将20%浓戊二醛溶液分别配制成浓度为1%、2%和5%的3 种溶液。

3)制作规板。规板用适当硬度的铁丝圈制成,具有2 个圆环的夹子,圆环直径3.5 cm。

4)培养基制备。按照营养琼脂的配比制备平板培养基。

5)物品灭菌。准备40 个洁净试管、包扎好的棉签,121 ℃高压灭菌30 min,灭菌的物品放置在紫外消毒后的生物安全柜。

6)鸡蛋浸泡消毒。试验组的鸡蛋分别用1%、2%和5%戊二醛浸泡消毒1 min,使鸡蛋完全浸湿,取出后放置于超净工作台中自然干燥,然后放入消毒的塑料袋内密封。

7)取样。将被测种蛋夹在特制的规板内,在装有灭菌生理盐水的试管中浸湿灭菌棉签,在试管壁上挤去多余的盐水,然后在规板范围内的鸡蛋表面来回滚动擦拭20 次,剪下棉签头,浸入装有9 mL灭菌生理盐水的试管中,每个鸡蛋做3 次重复,分别涂擦不同的区域。

8)细菌培养。用灭菌的吸管吸取1 mL 细菌液,注入灭菌的空平皿内,然后倾注熔化并冷却到45~50 ℃的普通琼脂,充分混合。

9)菌落记数。待普通琼脂凝固后,置37 ℃恒温箱中培养24 h,计数平板上的菌落数,平板菌落记数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏。

10)数据的统计与分析。试验数据用Excel 软件进行处理,并进行差异显著性检验。

11)计算杀菌率。根据每个鸡蛋3 次平行试验菌落数,计算平行样菌落平均数,再计算10 个鸡蛋的平均菌落数,求出杀菌率。杀菌率=(消毒前菌落数-消毒后菌落数)÷消毒前菌落数×100%。

2 结果与分析

由表1 可知,1%、2%和5% 3 种浓度的戊二醛消毒液浸泡消毒鸡蛋的杀菌率分别为86.70%、95.61%和96.95%,其中1%戊二醛与2%戊二醛和5%戊二醛以及对照组消毒效果差异显著(P<0.01),而2%戊二醛组和5%戊二醛组差异不显著(P>0.05)。从经济成本考虑,得出结论:消毒种蛋最合适的戊二醛浓度是2%。

表1 3 种不同浓度戊二醛对鸡蛋表面消毒效果的比较

3 讨论

本试验选用的戊二醛推荐使用浓度是2%或5%,从试验结果看,1%戊二醛杀菌率只有86.70%,不能满足种蛋消毒95%以上杀菌率要求[4],而2%戊二醛和5%戊二醛杀菌率分别为95.61%、96.95%,达到了要求,可以做为种蛋消毒药。2%戊二醛和5%戊二醛杀菌率差异不显著(P>0.05),说明戊二醛浓度达到2%以后,随浓度的增加,杀菌率并没有明显增加,所以戊二醛消毒种蛋最合适的浓度为2%。本次试验只做了种蛋表面杀菌效果试验,没有涉及对种蛋孵化率、出雏率及对雏鸡的影响等试验,有一定的局限性[5]。

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