宁波新生儿遗传性耳聋基因突变1781例分析

鲍幼维，潘小莉，潘澍青，潘婕文，李海波

宁波市妇女儿童医院出生缺陷综合防治重点实验室，浙江宁波市315012

先天性耳聋是高发的先天性出生缺陷疾病。我国听力残疾人2780 万，约占残疾人总数的33.5%[1]。每年约有3.5 万例先天性耳聋患儿出生[2-3]，其中遗传因素约占60%左右[4-7]。中国人群中常见的耳聋基因为GJB2、GJB3、mtDNA 和SLC26A4[1，8]。耳聋基因筛查可以发现听力学筛查难以发现的迟发型耳聋、药物敏感性耳聋和渐进性耳聋。

1 对象与方法

1.1 对象

2019 年1 月至9 月在本院出生的新生儿1781 例，其中男性937 例，女性844 例。家长自愿接受耳聋基因筛查，告知风险并签署知情同意书。

本研究已获得本院医学伦理委员会批准。

1.2 方法

新生儿出生后3～7 d，由专业人员按要求采集足跟血，制成干血片标本，晾干后2～8 ℃冷藏保存。按规定送至杭州甄元健康科技有限公司进行检测。

采用Blood DNA mini kit(QIAGEN 公司)提取干血斑中基因组DNA，Qubit dsDNA HS Assay Kit(INVITROGEN 公司)测定浓度，-20 ℃保存。采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MSAGENA BIOSCIENCE 公司)进行检测，使用配套软件TYPER 4.0 进行分析。共包括4个耳聋基因，22个突变位点。见表1。

对所有耳聋基因检测阳性的新生儿建立健康档案，对其父母进行遗传咨询。

1.3 统计学分析

采用SPSS 18.0 进行描述性分析。计数资料以构成比表示，组间比较采用χ2检验。显著性水平α=0.05。

2 结果

2.1 耳聋基因携带率

共有104 例检出耳聋基因突变位点，总突变率5.84% (104/1781)。其中男性突变率6.30% (59/937)，女性突变率5.33% (45/844)，男女间无显著性差异(χ2=0.752，P=0.386)。

2.2 突变位点

在耳聋基因携带者中，各基因突变频率有非常高度显著性差异(χ2=87.692，P＜0.001)，两两比较，GJB2＞SLC26A4＞GJB3=mtDNA。

GJB2基因突变频率最高的3 个位点分别为GJB2基因235delC 杂合突变(突变率2.53%)、SLC26A4基因919-2A＞G 杂合突变(突变率0.95%)、GJB2基因299-300delAT 杂合突变(突变率0.56%)。未检出纯合突变和复合杂合突变。见表1。

表1 新生儿耳聋基因筛查情况

3 讨论

自王秋菊等[9]提出在新生儿听力筛查的基础上增加耳聋基因筛查，国内学者对新生儿耳聋基因筛查越来越关注。耳聋基因筛查可以弥补新生儿听力筛查的不足，对携带耳聋突变位点的高危儿可以早发现、早诊断、早干预，从而避免发病以及因聋致哑；还可以对其父母进行再生育指导，并对携带者的婚配、生育进行遗传咨询。

由于遗传性耳聋基因有较高的遗传异质性，不同地区和人群基因突变位点和突变频率有一定差异。本研究总突变率为5.84%，与王敏等[10]报道的杭州(5.79%)和杨晶群等[11]报道绍兴(5.42%)耳聋基因突变率一致；但是高于全国平均突变水平(4.39%)[12]。

我国约50%遗传性耳聋由GJB2基因突变所致[13]。GJB2为常染色体隐性遗传基因[14]，正常人携带率2%～3%[15]，主要编码Cx26 蛋白[16]。基因突变后产生无功能Cx26 蛋白，导致耳蜗毛细胞钾离子循环障碍，引起Corti 器钾中毒，从而引起听力异常。大部分患儿通过植入人工耳蜗可恢复听力[17-18]。由于GJB2基因突变引起的听力下降个体差异大，对于携带者要做好定期检测、随访工作[19]。本研究共检出GJB2基因突变59例，均为杂合突变，突变率高于文献报道[15，20-21]。

GJB3是由夏家辉等[22]首先克隆的耳聋基因，编码Cx31 蛋白，与Cx26 蛋白、Cx30 蛋白协同，维持耳蜗电解质内稳态；基因突变主要引起高频感音神经性听力障碍[23]。GJB3基因的杂合突变可以隐性方式存在，也可以表现出听力受损：患儿出生时往往听力正常，但是到青壮年时期听力有不同程度下降[24]。本研究共检出GJB3基因突变10 例，均为杂合突变，携带率较低。

mtDNA 基因突变为母系遗传，使用氨基糖苷类抗生素可造成听力障碍[25]。对携带有该基因突变的新生儿要禁用耳毒性药物。该基因筛查对母系所有亲属也有指导作用。父亲也有较低概率(1/5000)将mtDNA基因传给子代[26]。所以该基因携带者如果母亲未发现突变位点，应考虑是否为父亲遗传。本研究共检出mtDNA基因突变7例，均为杂合突变。

SLC26A4基因的不同突变类型都可引起前庭水管扩大[27]，发生感音神经性听力障碍，可伴有耳鸣和眩晕。其基因突变频率仅次于GJB2基因。正常人群携带率1%～2%[15，19，28]，在剧烈撞击、感冒或发烧等诱因作用下，可引起感音神经性听力障碍[29]。携带该基因突变的新生儿要避免外力撞击，避免“一巴掌至聋”的悲剧发生。本研究共检出SLC26A4 基因突变28 例，与文献报道相一致[19，28，30]，均为杂合突变。

90%～95%耳聋患儿出生在听力正常家庭中[31]。宁波地区是耳聋基因突变高发地区，新生儿听力筛查联合耳聋基因筛查是目前较为理想的筛查模式。