核酸检测与酶联免疫吸附检测平行筛查血液在基层血站中的意义

缪茜虹

【摘要】 目的：探讨核酸检测与酶联免疫吸附（酶免）检测平行筛查血液在基层血站中的意义。方法：选择2016年10月-2019年9月宁德市中心血站39 905份血液标本，对其进行酶免检测及核酸检测。结果：经酶免检测，A试剂检测HBsAg均为阴性，B试剂检测HBsAg有25份为弱阳性及灰区。经核酸检测，A试剂检测HBsAg阴性标本中有102份为阳性，B试剂检测HBsAg弱阳性及灰区25份标本均为阳性，B试剂检测HBsAg阴性标本中有77份为阳性。结论：在基层血站血液筛查中采用酶免检测与核酸检测平行筛查，可提高血液筛查准确性。

【关键词】 血液筛查 无偿献血 酶联免疫吸附法 核酸检测

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2020.12.030 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2020）12-00-03

Significance of Parallel Screening of Blood by Nucleic Acid Detection and Enzyme Linked Immunosorbent Assay in Primary Blood Stations/MIAO Qianhong. //Chinese and Foreign Medical Research， 2020， 18（12）： -70

[Abstract] Objective： To explore the significance of parallel screening of blood by nucleic acid detection and enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） in primary blood stations. Method： From October 2016 to September 2019， 39 905 blood samples from Ningde City Center Blood Station were selected for ELISA and nucleic acid detection. Result： By ELISA， HBsAg was negative in reagent A， and in reagent B， there were 25 weak positive and grey areas. According to the nucleic acid detection， 102 of the negative samples of HBsAg in reagent A were positive， while 25 of the weak positive and gray areas of HBsAg in reagent B were positive， and 77 of the negative samples of HBsAg in reagent B were positive. Conclusion： The accuracy of blood screening can be improved by parallel screening of ELISA and nucleic acid detection in blood screening of primary blood stations.

[Key words] Blood screening Volunteer blood donation Enzyme linked immunosorbent assay Nucleic acid detection

First-authors address： Ningde City Center Blood Station， Ningde 352100， China

近年来，随着我国社会公益事业的发展和人们公益意识的提高，无偿献血已得到大力提倡，自愿进行无偿献血的志愿者也明显增多。无偿献血为临床输血提供了血液资源，为保证临床输血安全，需对血液标本进行严格筛查，对HBsAg、HCV、HIV等常见血液传染性疾病病毒进行检测，以及时发现不合格血液标本，避免在临床输血时出现报废情况[1-3]。以往，基层血站对血液进行筛查主要是依靠血清酶联免疫吸附法检测，可在一定程度上检出HBsAg、HCV、HIV，但仍存在部分弱阳性及灰区标本，具有局限性[4]。近年来，核酸检测逐渐被用于血液筛查中，具有更高的灵敏度，可对酶免检测弱阳性及灰区、阴性标本进行严格筛查，提高血液筛查的准确性[5-6]。本研究为探讨核酸检测与酶免检测平行筛查在基层血站血液筛查中的应用价值，针对39 905份血液標本进行检测。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2016年10月-2019年9月宁德市中心血站无偿献血者捐献的39 905份血液标本，每份血液标本为5 ml。献血者纳入标准：（1）符合GB18467-2001健康献血者检查标准;（2）自愿参加无偿献血。排除标准：无法配合献血工作。男26 236人，女13 669人;年龄18～55岁，平均（32.46±13.52）岁;学生3 147人，军人499人，普通公司职员7 070人，医务工作者684人，教师653人，其他27 852人。献血者对献血要求知情同意。

1.2 方法

试剂及仪器：（1）酶免检测：A试剂为厦门英科新创HBsAg，B试剂为意大利索灵Murex HBsAg Version，酶免检测仪器为哈美顿STAR加样仪、FAME全自动酶免后处理系统;（2）核酸检测：检测试剂为上海浩源核酸检测试剂，仪器为上海浩源Chitas bss 1200全自动核酸纯化仪、ABI7500实时荧光定量PCR分析仪。

在献血者充分放松状态下采集肘部静脉血10 ml，取5 ml置于酶免管，并以3 000 r/min离心3 min后进行试验;另5 ml置于核酸管，采集后4 h内在低温条件下以离心力1 500～1 800 g离心20 min后进行试验。

采用酶免检测试剂A试剂、B试剂对血液标本中的乙型肝炎表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）进行检测;采用酶免法对血液标本中的丙型肝炎抗体（hepatitis C antibody，HCV）、艾滋病病毒（human immunodeficiency virus，HIV）进行检测，严格按照检测试剂及仪器说明书进行操作，分析检测结果。对A试剂检测HBsAg阴性标本、B试剂检测HBsAg弱阳性及灰区标本、B试剂检测HBsAg阴性标本、HCV阴性标本、HIV阴性标本进行核酸检测，严格按照检测试剂及仪器说明书进行操作，进一步筛查血液标本。

1.3 观察指标

观察酶免检测、核酸检测对血液标本HBsAg、HCV、HIV的检出情况。

2 结果

经酶免检测，39 905份血液标本中，A试剂检测HBsAg均为阴性，阴性率为100%（39 905/39 905）;B试剂检测HBsAg有25份为弱阳性及灰区，弱阳性及灰区率为0.063%（25/39 905），

有39 880份为阴性标本，阴性率为99.937%（39 880/39 905）;HCV均为阴性，阴性率为100%;HIV均为阴性，阴性率为100%。

经核酸检测，A试剂检测HBsAg阴性标本中有102份为阳性，阳性率为0.256%（102/39 905），有39 803份为阴性，阴性率为99.744%（39 803/39 905）;B试剂检测HBsAg弱阳性及灰区25份标本均为阳性，阳性率100%（25/25）;B试剂检测HbsAg阴性标本中有77份为阳性，阳性率为0.193%（77/39 880），

有39 803份为阴性，阴性率99.807%（39 803/39 880）;HCV阴性39 905份标本均为阴性，阴性率为100%（39 905/39 905）;HIV阴性39 905份标本均为阴性，阴性率为100%（39 905/39 905）。

3 讨论

无偿献血是指志愿者在自愿、无偿的情况下捐献自身适量的血液，无偿献血中获取的血液资源是临床输血血库的重要来源，可用于多种疾病治疗中[7]。在采集完无偿献血者的血液标本后，为保障临床输血安全性和血液標本质量，主张对血液标本进行筛查[8]。血液标本筛查主要是针对输血传播病原体，可及时筛查出存在污染的血液标本，有利于确保临床输血安全性，避免血液资源浪费，防止临床输血时出现不良输血反应[8-9]。因此，做好基层血站血液标本筛查工作十分重要。

在国内，输血传播病原体筛查主要是针对乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病等传染性疾病的病原体进行筛查，包括HBsAg、HCV、HIV等[10]。以往，临床上针对HBsAg、HCV、HIV筛查多采取酶免法对血清样本进行检测，可在一定程度上筛出携带有HBsAg、HCV、HIV的血液标本，有利于降低临床输血风险。但由于酶免检测血清时受到检测试剂、检测时间、检测温度等多种因素的干扰，检测结果可能会出现假阴性情况，还可能会出现弱阳性及灰区，故还需进一步筛查[11]。

核酸检测是指采用核酸纯化系统对血液标本中的病原体核糖核酸进行检测，是一种分子诊断技术，步骤包括核酸提取、扩增、检测。由于核糖核酸是病毒遗传信息的主要载体，针对病毒核糖核酸进行检测可获取病毒遗传信息，从而对病毒DNA情况进行反映，具有高灵敏度、特异度[12]。在血液标本受到病毒感染后的数天内，采用核酸检测即可检出微量病毒核糖核酸，能够缩短病毒抗原及抗体蛋白结构变异窗口期，提高检测准确性[13]。此外，核酸检测还具有自动化的特点，检测结果不受试剂、病毒基因型等多种因素的干扰，检测结果更加可靠[14]。

为提高血液筛查的准确性，陈艳萍[15]提出对血液标本实施酶免检测与核酸检测联合筛查，即先对血液标本进行酶免检测，再对酶免检测阴性标本、弱阳性及灰区标本进行核酸检测。本研究按此顺序对39 905份血液标本进行筛查，结果显示：（1）经酶免检测，39 905份血液标本中，A试剂检测HBsAg阴性率为100%;B试剂检测HBsAg阴性率为99.937%，弱阳性及灰区率为0.063%;HCV、HIV阴性率均为100%。（2）核酸检测，A试剂检测HBsAg阴性39 905份标本的阳性率为0.256%，阴性率为99.744%;B试剂检测HBsAg弱阳性及灰区25份标本的阳性率为100%;B试剂检测HbsAg阴性39 880份标本的阳性率为0.193%，阴性率99.807%;HCV、HIV阴性标本的阴性率为100%。以上研究结果说明，在酶免检测后对血液标本进行核酸检测，可检出假阴性标本，减少不确定性。

综上所述，在基层血站对无偿献血者的血液标本进行筛查时，采用酶免检测与核酸检测平行筛查可提高血液筛查准确性，减少血液传播疾病风险，有利于保障临床输血安全性。

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（收稿日期：2020-01-13） （本文编辑：李盈）