不同金霉素预混剂对断奶仔猪生产性能及血液中金霉素浓度的影响

李 彬 ，张 攀 ， 张遨然 ， 何开蓉 ， 乔煦玮 ，徐 刚， 董成语， 李 巍， 富相奎， 孙 群， 朱正鹏*

（1．四川大学生命科学学院，四川成都 610064；2．新希望六和股份有限公司，北京 100102；3.成都枫澜科技有限公司，四川成都 611731；4.黑龙江省农业科学院，黑龙江哈尔滨 150086）

金霉素（CTC）属于四环素类广谱抗生素，对多种病原菌有较强的抑制作用，常用于动物疾病的预防治疗。饲用金霉素是公认的有效饲料添加剂，可促进仔猪生长，改善仔猪饲料利用率 （陈旭东，2005），提高仔猪出生重，断奶成活率等（Soma，1975；Sewell，1958），并对呼吸道与肠道疾病原菌有一定的抑制效果（卢建军，2006；陈亮，1992）。 不同的金霉素预混剂因生产工艺的差异，选择载体、稳定剂等的类型和颗粒大小与硬度的不同，造成不同金霉素产品释放速度和程度差异较大，因此不同金霉素预混剂在生物体内的利用度不同，在动物生产中产生的效用也不同（伍涛，2018；曾东平，2012）。金霉素在动物体内代谢迅速，评价金霉素预混剂质量与其在生物体内代谢速度与稳态分布有关，猪通过肠道吸收金霉素，再通过血液达到需要的部位，保持一定的血药浓度有利于动物的治疗。本研究通过比较不同金霉素预混剂对断奶仔猪生产性能的影响及在动物体内代谢速度，旨在考察不同金霉素预混剂对断奶仔猪的保护性。

1 材料与方法

1.1 试验设计及饲养管理 采用单因素设计试验，选择 450 头 21 日龄杜×长×大[（6.51±0.11）kg]断奶仔猪，根据性别和体重相近的原则，随机分为3个试验组，每个试验组6个重复，每重复25头仔猪。试验组1饲喂基础日粮+10%金霉素预混剂，试验组2饲喂基础日粮+25%金霉素预混剂，试验组3饲喂基础日粮+10%微囊金霉素预混剂，三处理组日粮中金霉素添加量均为75 mg/kg。试验用金霉素预混剂均购自金河生物科技股份有限公司。试验预饲3 d，正式试验期14 d，试验期间自由采食与饮水。

1.2 试验日粮 基础饲料营养水平参照NRC（2012）推荐的断奶仔猪营养需要配制，基础日粮组成及营养水平见表1。

1.3 指标测定及方法

表1 基础日粮组成及营养水平

1.3.1 断奶仔猪生长性能 试验期间，记录各组仔猪每日的采食量，并在试验的第0、14天饲喂前对仔猪进行空腹称重，测定生长性能指标。

平均日增重/（g/d）=（试验末平均体重-试验初平均体重）/试验天数；

平均日采食量/（g/d）=试验期总耗料量/试验天数；

料肉比=平均日采食量/日增重。

1.3.2 断奶仔猪腹泻率 试验期内，每天统计仔猪的腹泻头数，按照下列公式计算各处理组的腹泻率。

腹泻率/%=试验期间各重复仔猪累计腹泻头数/（各重复总头数×试验天数）×100。

1.3.3 仔猪血浆中金霉素含量的测定 正式试验的第1天，随机从每个重复中选取2头母猪，共计36 头， 在 6:00 饲喂后的第 1、2、4、6、8、10、16、24小时通过前腔静脉采取血液5 mL，放置于抗凝血肝素钠管中，静置10 min后3000 r/min离心5 min，分离血浆，于-20℃冰箱保存至检测。按照国家标准《GB/T21317-2007》所规定的高效液相色谱-串联质谱法检测血浆中金霉素的浓度，具体操作为：血浆样品进行解冻摇匀后，吸取0.4 mL样品加入2 mL 0.1 mol/L EDTA-Mcllvaine缓冲液溶解，漩涡30 s，混匀，静置5 min。然后以12000 r/min离心5 min，吸取全部上清液净化。将上述上清液以1滴/s的速度过HLB固相萃取小柱，依次用3 mL水和3 mL 5%甲醇水溶液淋洗，弃去全部流液，用3 mL甲醇+乙酸乙酯（1+9）洗脱，收集洗脱液于40℃氮气吹干，用1.0 mL流动相溶解残留物，漩涡混匀，转入棕色进样瓶中，自动进样进行HPLC-MS/MS检测。液相色谱工作条件：流动相：V（乙腈）∶V（水）=30:70；柱温：35 ℃；流速：0.3 mL/min；进样量：30 μL。 质谱条件：电喷雾正离子模式（ESI+），多反应监测模式（MRM），其他质谱条件如表2所示，以金霉素的色谱峰面积对相应的药物浓度进行线性回归。

表2 金霉素质谱参数

1.4 数据分析 采用SPSS 21.0软件进行单因素方差分析，运用Duncan’s法进行多重比较。以P＜0.05为差异显著。所有数据以“平均数±标准差”表示。

2 试验结果与分析

2.1 不同金霉素预混剂对断奶仔猪生产性能的影响 从表3可知，在试验结束14 d时，相较于10%和25%金霉素预混剂组，10%微囊金霉素预混剂组仔猪平均日增重提高了6.16%和1.24%，采食量增加了5.06%和1.15%，腹泻率降低了0.84%和0.67%，但差异均未达到显著水平（P＞0.05）。

表3 不同金霉素预混剂对断奶仔猪生产性能的影响

2.2 不同金霉素预混剂对仔猪血浆药物浓度变化的影响 由表4可知，10%金霉素预混剂组仔猪血药浓度为45.21～56.99 ng/mL，25%金霉素预混剂组仔猪的血药浓度为46.27～68.94 ng/mL，10%微囊金霉素预混剂组仔猪血药浓度为57.02～95.14 ng/mL，三处理组在各时间段血药浓度均表现为：10%微囊金霉素预混剂组＞25%金霉素预混剂组＞10%金霉素预混剂组，且在10:00时，10%微囊金霉素预混剂组仔猪血药浓度显著高于10%与25%金霉素预混剂组（P ＜ 0.05），在 12:00、14:00与22:00三个时间点，10%微囊金霉素预混剂组仔猪血药浓度均显著高于10%金霉素预混剂组 （P＜0.05）。根据各处理组仔猪血浆中金霉素含量，绘制出血药浓度-时间曲线（图1），从曲线上可看出各金霉素预混剂的血药浓度在饲喂后6 h达到最高值，各处理组仔猪血药浓度最大分别为 （56.99±5.68）、（68.94±9.69）ng/mL 和 （95.14±11.47）ng/mL。24 h内，10%微囊金霉素预混剂组仔猪血药浓度的最低值（57.02±6.35）ng/mL也高于10%金霉素预混剂组最大血药浓度（56.99±5.68）ng/mL。

表4 不同金霉素预混剂对仔猪血药浓度变化的影响ng/mL

3 讨论

3.1 不同金霉素预混剂对仔猪生产性能的影响金霉素作为公认的有效饲料添加剂，口服吸收良好，但随着应用的广泛，抗生素滥用的问题日益突出，因此我国《药物饲料添加剂使用规范》要求仔猪金霉素的添加量为25～75 mg/kg。综合前人的研究，饲料中添加25 mg/kg金霉素饲喂仔猪，生产性能无显著差异（刘家国，2005），而添加量为75 mg/kg（陈旭东，2005）、75 mg/kg 和 150 mg/kg（卢建军，2006）、120 mg/kg 时（王彩玲，2004），仔猪的生产性能均得到了提升，这表明金霉素添加量在日粮中达到75 mg/kg时，已经对仔猪生产性能起到了改善作用，这些效用的发挥可能是有效剂量金霉素通过改善仔猪肠道黏膜的形态结构，提高仔猪采食量，降低腹泻率（卢建军，2006），提高干物质消化率（黄俊文，2002），改善仔猪健康状况来实现。在合理范围内金霉素的添加量越高对仔猪的效果也越好，因此在添加量范围内选择具有更高效用的金霉素预混剂产品对于养猪生产具有重要的意义。本试验中选用了不同含量（10%与25%）且不同生产工艺（包被与非包被）的金霉素预混剂产品，所添加的金霉素含量均为75 mg/kg，试验结果表明，尽管试验期较短（14 d），但10%微囊金霉素预混剂组仔猪平均日增重相较于10%和25%金霉素预混剂组提高了6.16%和1.24%，同时采食量增加了5.06%和1.15%。对比不同含量金霉素预混剂（10%与25%），含量高的金霉素预混剂（25%）在仔猪上的应用效果优于含量低的产品（10%），同时微囊金霉素预混剂（10%）在仔猪上的应用效果优于普通的金霉素预混剂产品（10%与25%）。

3.2 不同金霉素预混剂对仔猪血药浓度的影响多数抗生素进入血液后，逐步向机体各组织、器官和体内分布，这过程与药物在血液中的浓度密切相关，只有药物吸收进入生物体内部循环达到一定浓度时才能发挥效用。本试验中，口服相同剂量（75 mg/kg）金霉素的条件下，三种金霉素预混剂组仔猪的血药浓度上升速度基本相同，在12:00左右（饲喂后6 h）达到最高值，这与曾东平等（2012）的研究结果相似，其原药组血药浓度上升最快，在3～4 h达到最高峰浓度，而本试验的三种金霉素预混剂则在给药后6～8 h达到峰浓度。通过测定24 h内仔猪血药浓度的变化发现，三个处理组在各时间段内血药浓度均表现为：10%微囊金霉素预混剂组＞25%金霉素预混剂组＞10%金霉素预混剂，10%微囊金霉素预混剂组仔猪血药浓度在24 h内均高于10%金霉素预混剂组最高血药浓度。同时三试验组仔猪最大血药浓度分别为 （56.99±5.68）、（68.94±9.69）ng/mL和（95.14±11.47）ng/mL，10%微囊金霉素预混剂组仔猪最大血药浓度显著高于10%金霉素预混剂组，表明相较于普通金霉素，微囊金霉素更易被仔猪吸收进入血液达到更高的血药浓度，并且在24 h内保持更高的血药浓度。药物进入体内能达到的最大药物浓度，是临床最重要的指标，达到有效浓度药物才会具有疗效，虽然有研究表明临床上金霉素对病原菌产生抑菌活性需要金霉素的血药浓度大于500 ng/mL（曾东平，2012），本试验中三个处理组仔猪血药浓度均低于500 ng/mL，有研究表明相较于静脉注射给药，通过饲喂获得金霉素的仔猪，血药浓度出现一定的降低（Nielsen，1996）。市场上最常见的15%金霉素预混剂，在饲料中添加量为75 mg/kg时，动物血液中金霉素的浓度为20～100 ng/mL（王冉，2010），本试验的血药浓度在其范围内。综上，饲喂相同添加量的金霉素，微囊金霉素能够显著增加仔猪血液中金霉素的浓度，提高对仔猪的保护性，因此微囊金霉素预混剂组仔猪腹泻率有一定程度的下降，生产性能得到一定程度的提升。

4 结论

本试验条件下，在日粮中添加相同量的金霉素（75 mg/kg），相较于10%和25%金霉素预混剂，10%微囊金霉素预混剂能够显著提高仔猪血浆中金霉素浓度，增加对仔猪的保护性，能一定程度提高仔猪的生产性能。