原发性高血压患者11β-类固醇脱氢酶2活性与肾素关系

吴春丽，李 娟

(佳木斯大学附属第一医院心内一科，黑龙江 佳木斯 154007)

近年来我国高血压发病率呈逐年上升趋势[1-2]。目前原发性高血压发病机制不明，肾素-血管紧张素-醛固酮系统(renin-angiotensin-aldosterone system，RAAS)在原发性高血压(essential hypertension，EH)的发生、发展及维持中起着重要作用[3]。一些学者研究发现，11β-HSD2活性与高血压的发生、发展密切相关[4]。尿中氢化可的松(Hydrocortisone，F)与可的松(cortisone，E)的比值是表示11β-HSD2活性更灵敏可靠的指标[5]。本研究应用高效液相色谱法测得11β-HSD2活性，探讨EH患者11β-HSD2活性与肾素之间的关系。

1 资料与方法

1.1 对象选取2018年10月至2019年7月间我院高血压门诊就诊或住院的未经药物治疗(或停药12周)的原发性高血压患者113例为EH组，其中男性64例，女性49例，平均年龄为(49.79±13.75)岁。EH组的诊断及分级均符合2010年《中国高血压防治指南》[6]诊断标准。排除标准：正在使用降压药物者(β-阻断剂、ACEI/ARB、钙阻剂)、继发性高血压等其他慢性疾病者。随机选取我院同一时期门诊健康体检者121例为对照组，其中男性67例，女性54例，平均年龄为(47.38±12.76)岁。两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经佳木斯大学附属第一医院伦理委员会已审核、批准本研究方案，所有入选患者充分了解知情同意书，并认可其内容，自愿签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 血浆肾素浓度(Plasma renin concentration，PRC)测定 所有受检对象采血前嘱其保持立位，无剧烈活动>2h，均采集清晨空腹肘静脉血5mL置于EDTA抗凝管中，静置20min，离心10min分离出血浆，-20℃冰箱保存待测。采用Auto 2000化学发光仪及其配套试剂完成血浆肾素浓度(立位肾素)检测。根据Alderman M[7]等标准将原发性高血压分为低肾素型、中间肾素型、高肾素型三种，对应肾素水平如下：低肾素型高血压(<4 pg/mL)、中间肾素型高血压(4～38 pg/mL)、高肾素型高血压(>38 pg/mL)(佳大附院实验室指导参数[8]立位肾素的参考范围4～38 pg/mL标准分类)。试剂盒购自郑州安图生物工程股份有限公司。检测前已完成产品在本实验的性能验证，检测过程按照产品说明操作。肾素检测变异系数(CV)<5%。

1.2.2 11β-HSD2活性的测定 留取晨尿10mL，样品处理后，-20℃冰箱保存待测，应用高效液相色谱法测定并计算尿液标本中F和E对内标皮质酮的峰高比，然后代入标准曲线求出F和E的浓度，计算出它们的比值(F/E)，从而测得11β-HSD2活性，F/E值表示11β-HSD2活性，F/E比值越大，11β-HSD2活性越低[4]。经方法学考核得出的回收率和日内、日间精密度表明此方法灵敏、稳定、可靠，符合生物样品检测的方法要求。

1.3 统计学方法采用SPSS 25.0统计学软件分析处理数据。计量资料均符合正态分布，以“均数±标准差”表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用方差分析;计数资料采用卡方检验;EH患者11β-HSD2活性与肾素关系采用Pearson相关性分析，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料比较EH组和对照组一般资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。

2.2 EH组和对照组肾素水平、11β-HSD活性比较EH组肾素水平显著低于对照组(P=0.013)，而两组F/E值相比差异无显著(P=0.519)，见表2。

表2 两组肾素、11β-HSD活性比较

2.3 不同肾素型EH患者与对照组11β-HSD活性比较低肾素型EH患者F/E值显著增高于对照组(P<0.05)；低肾素型EH患者F/E值与高肾素型EH相比也有显著差异(P<0.05)；低肾素型EH患者F/E值与中间肾素型EH相比无显著差异(P>0.05)；高肾素型EH、中间肾素型EH的F/E值与对照组相比，均无显著差异(P>0.05)，见表3。

表3 不同肾素型高血压与对照组11β-HSD2活性比较

注：与对照组相比，*P<0.05；与高肾素型EH相比，#P<0.05

2.4 EH患者11β-HSD2活性与肾素之间相关性分析F/E值与肾素相关性分析结果显示，F/E比值与肾素之间存在负相关关系(r=-0.797，P=0.000)，而F/E比值越大，11β-HSD2活性越低，所以，EH患者11β-HSD2活性与血浆肾素之间呈正相关。

3 讨论

11β-HSD属于微粒体酶，分为11β-HSD1、11β-HSD2两种同工酶，与原发性高血压有关的主要是11β-HSD2。它主要作用是将血液中F转化为E(在啮齿动物为皮质醇、脱氢皮质醇)，使F浓度降低，从而使盐皮质激素受体(Mineralocorticoid receptor，MR)特异性与醛固酮结合，发挥正常生理功能。因此，肾组织内F、E水平的高低主要取决于11β-HSD2的活性[9]。

本实验结果显示，EH组血浆肾素显著低于对照组，与梁莉红、吴红珍、王朝晖等[10-12]报道一致，这是由于EH患者受到长期的恶性循环刺激，导致RAAS系统处于活跃状态，长期的高血压环境及低渗环境会导致肾素浓度降低，其诱发高血压的机制可能与钠水潴留及细胞外液容量增加有关[13]。曾报道Soro[14]对68名未治疗的EH患者皮质醇排泄分析表明11β-HSD和5β-还原酶活性比对照组偏低(P<0.05)，但亦有报道差别无显著性[15]。姚兵等[16]对84例原发性高血压患者和健康志愿者11β-HSD活性的测定研究表明，原发性高血压患者11β-HSD2活性与健康志愿者相比无显著差异，但发现EH患者中有12%的F/E偏高。本研究结果显示：EH患者F/E与对照组相比也无显著差异(P<0.05)，可能是因为未对EH患者进行肾素分型时，所有EH患者的F/E均值与对照组较接近。

蒋文龙等[17]对54名EH患者测定11β-HSD2活性的研究表明，在血浆肾素水平降低的EH患者中发现11β-HSD2活性降低。Wilson[18]等报道了一例11β-HSD基因缺陷导致低肾素型高血压，该研究从侧面提示在众多低肾素型高血压中可能隐藏着11β-HSD活性异常降低。张林等[19]探讨EH与肾11β-HSD2活性之间关系研究表明，11β-HSD2活性下降，导致水钠潴留及血浆肾素分泌受抑，可能是引起低肾素型EH的原因之一。本实验结果显示：低肾素型EH患者11β-HSD2活性与对照组相比显著降低，与高肾素型EH相比也有显著差异，表示EH患者11β-HSD2活性与肾素关系密切。进行相关性分析结果F/E比值与肾素之间存在负相关关系，而F/E比值越大，11β-HSD2活性越低，患者11β-HSD2活性与血浆肾素之间呈正相关，原因可能为11β-HSD2活性降低，导致氢化可的松转化为可的松减少，使游离氢化可的松增多，与醛固酮竞争MR，表现为体内钠水潴留、血容量增加，即产生了高血压，同时通过负反馈又抑制了血浆肾素分泌，导致血浆肾素水平降低。近年来研究[20-21]11β-HSD2活性与高血压的关系较为统一观点是11β-HSD2活性下降，血压升高，但EH患者11β-HSD2活性与肾素关系的研究国内外尚未见报道。王述琦[22-24]等人研究证实，11β-HSD2参与原发性高血压的发病，且与低肾素型高血压的关系密切，但具体作用途径尚存在争议。

综上所述，原发性高血压患者血浆肾素水平降低，肾素水平与11β-HSD2活性呈正相关，11β-HSD2在原发性高血压发病中可能有重要的作用，有待进一步扩大样本量进行深入研究，为原发性高血压发病机制的研究提供新的线索。