转基因植物成分检测方法及标准概述

□ 刘岑杰 杨 滴 大连市检验检测认证技术服务中心

1 引言

随着分子生物学、转基因技术的发展与应用，转基因作物的种植和转基因食品的生产规模日益增长。转基因作物具有高营养、抗病虫、抗除草剂等优势，转基因作物在带来巨大利益的同时也存在许多争议，例如转基因食品的食用安全性，对生态环境的影响，对人类健康的潜在危害等，这些都受到了人们越来越多的关注[1]。因此，许多国家针对转基因食品出台了相应的管理办法，对转基因产品实行强制性标识。转基因成分的检测为转基因食品的科学监管提供了重要的技术保障，因此加强对转基因植物及其成分的检测尤为重要。

2 转基因植物成分检测技术研究进展

目前，国内外常用的转基因产品及其成分的检测方法主要有两大类：一类是核酸水平的检测，如定性PCR技术、实时荧光定量PCR技术、数字PCR技术、等温扩增技术、基因芯片技术以及二代测序技术等[2]；另一类是蛋白水平的检测，如酶联免疫分析技术（ELISA法）、SDS聚丙烯凝胶电泳分析技术等。由于转基因食品中的蛋白质很不稳定，影响了检测的灵敏度，核酸水平的检测具有很好的特异性和灵敏度，因此核酸成分检测技术逐渐发展为转基因产品及其成分检测的常用方法[3，4]。

3 转基因植物成分检测方法标准

目前，对于转基因植物成分检测，国内已发布的现行有效的标准有：国家标准2项，农业部标准及公告91项，行业标准4项及地方标准3项。其中以PCR检测方法为主，还有试纸条法、微流滴数字PCR法等，详细方法标准编号见表1。目前颁布的这些标准中基本涵盖了常见的转基因植物外源性成分，对于可能遇到的转基因植物外源基因均可检测，各检测实验室可以根据这些方法标准的适用范围，自主选择适合检测方法。

表1 转基因植物成分检测方法

农业部标准及公告农业部2259号公告—7—2015农业部2259号公告—8—2015农业部2259号公告—9—2015农业部2630号公告—10—2017农业部2630号公告—11—2017农业部2630号公告—15—2017农业部2630号公告—2—2017农业部2630号公告—3—2017农业部2630号公告—4—2017农业部2630号公告—5—2017农业部2630号公告—6—2017农业部2630号公告—7—2017农业部2630号公告—8—2017农业部2630号公告—9—2017农业部869号公告—10—2007农业部869号公告—11—2007农业部869号公告—12—2007农业部869号公告—13—2007农业部869号公告—14—2007农业部869号公告—4—2007农业部869号公告—5—2007农业部869号公告—6—2007农业部869号公告—7—2007农业部953号公告—1—2007农业部953号公告—2—2007农业部953号公告—3—2007农业部953号公告—4—2007农业部953号公告—6—2007农业部标准及公告农业农村部公告第111号—10—2018农业农村部公告第111号—11—2018农业农村部公告第111号—5—2018农业农村部公告第111号—6—2018农业农村部公告第111号—7—2018农业农村部公告第111号—8—2018农业农村部公告第111号—9—2018 SN/T 1201—2014 SN/T 1202—2010 SN/T 2668—2010 SN/T 2705—2010地方标准行业标准DB12/T 650—2016 DB12/T 841—2018 DB12/T 842—2018

4 讨论与建议

目前，转基因植物成分的PCR检测方法主要是对外源核酸进行检测，检测方法以普通PCR和实时荧光PCR检测方法为主。实时荧光PCR检测技术，因特异性强、灵敏度高、检测效率高等优点而被普遍运用。建议各实验室针对自身的实验条件和检测要求选择适合的检测方法。样品DNA的提取质量对于PCR实验的成败至关重要，针对不同加工方式的产品，应选择不同的方法对样品DNA进行提取，提取的DNA模板应进行浓度和A260nm/A280nm吸光度比值的测定，以判断其是否适合进行下一步的PCR实验。PCR检测实验中，还应该特别注意实验室的日常清洁，注意质量控制，防止实验过程中溶剂喷溅、气溶胶等造成的污染，因此建议实验过程中添加空白、阳性、阴性对照。