枸杞多糖对衰老小鼠皮肤组织总抗氧化能力及脂褐质的影响

2020-09-12 14:28:55 中国民族民间医药·下半月 2020年3期

王彩霞

【摘 要】 目的:观察枸杞多糖对D-半乳糖致小鼠衰老的影响。方法:将50只1月龄昆明种雌性小鼠随机分为空白对照组、模型组、枸杞多糖低、中、高剂量组,每组10只。除空白组外其余各组均每日注射D-半乳糖造成亚急性衰老模型,给药组同时给予不同剂量的枸杞多糖。6周后检测小鼠皮肤组织中总抗氧化能力(T-AOC)活性和脂褐质(LF)含量。结果:枸杞多糖可增强衰老模型小鼠皮肤组织T-AOC活性(P<0.05),降低LF含量(P<0.05)。结论:枸杞多糖可通过提高衰老皮肤抗氧化物酶活性,降低氧化产物含量,从而达到延缓衰老的作用。

【关键词】 枸杞多糖;皮肤衰老;小鼠;总抗氧化能力;脂褐质

【中图分类号】R229 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517(2020)6-0007-03

Abstract:Objective To observe the effect of Lycium barbarum polysaccharide on D-galactose induced aging in mice.Methods 50 health Kunming and female mice were randomly divided into 5 groups-blank group,model group, low dose group,middle dose group and high dose group.In addition to the blank group, daily giving subcutaneous injection of D-galactose into the neck at other groups to establish subacute senile model. At the same time,each experimental group were coated for different dose Lycium barbarum polysaccharide. After 6 weeks the activities of total ant-ioxidation capability (T-AOC) and the content of lipofuscin (LF) in the skin in all groups were tested.Results Lycium barbarum polysaccharide could remarkably enhance the activities of T-AOC(P<0.05) and decrease the content of LF in the Skin tissue of senile mice(P<0.05).Conclusion Lycium barbarum polysaccharide can protect against aging skin through increasing antioxidant enzyme activity and decreasing oxidative product content.

Key words:Lycium barbarum polysaccharide; Skin aging; Mouse; Total ant-ioxidation capability; lipofuscin

枸杞屬茄科落叶灌木,是我国传统的“药食同源”中药材,含有多种营养成分和微量元素[1] 。《神农本草经》曾记载:“枸杞久服,坚筋骨,轻身不老[2]”。枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharde,LBP)是从枸杞中提取出来的一种多糖,是枸杞发挥药效的主要成分之一[1],因其具有多种生物活性越来越受到人们的关注。研究表明,枸杞多糖具有降血脂、降血糖、调节免疫、抗肿瘤、抑制细胞凋亡及延缓衰老等广泛的药理学作用[3]。本研究观察衰老模型小鼠皮肤组织中T-AOC活性和LF含量,从而探究枸杞多糖对D-半乳糖致亚急性衰老小鼠皮肤衰老程度的影响。

1 仪器与材料

1.1 动物 KM 小鼠50只,雌性,体重(20±2)g,级别:SPF。实验动物均购自宁夏医科大学实验动物中心,分笼饲养,自由饮食,规律光照,无不良影响因素,适应性饲养1周后开始实验。

1.2 材料 D-半乳糖(银川祺宝生物有限公司),枸杞多糖(银川市农科院提供),总抗氧化能力(T-AOC)、脂褐质(LF)试剂盒均购于南京建成生物工程研究所。

1.3 仪器 ELx808全自动酶标仪(美国佰腾),DY89-Ⅱ电动玻璃匀浆机(上海将来实验设备有限公司),TDL-5-A型离心机(上海安亭科学仪器厂),测定仪器为722分光光度计(上海第三分析仪器厂),DK-420S型三用恒温水箱(上海精宏实验设备有限公司),BLG10电子秤(上海精科天美科学仪器有限公司)。

2 方法

2.1 动物分组、造模及给药 50只小鼠随机分为5组:空白对照组、模型组、枸杞多糖低、中、高剂量组,每组10只。模型组及给药组每日颈背部皮下注射D-半乳糖(1000mg/kg),建立亚急性衰老模型。空白对照组颈背部皮下注射等量生理盐水。低、中、高剂量组在注射 D-半乳糖的同时灌服枸杞多糖5mg/kg/d、10mg/kg/d、20mg/kg/d,给药容积20mL/kg。模型组、正常组灌服等量生理盐水。以上操作1次/d,连续42d。

2.2 取材及指标检测 连续给药42d后,小鼠断颈处死,速取小鼠背部两肩胛部之间脱毛区域的皮肤,面积为3cm×3cm,并迅速将取下的皮肤冰冻保存,待用。取脱毛后背部皮肤组织块0.5g左右,量筒量取该组织块9倍重量的预冷生理盐水匀浆,浆液以3500r/min的速度离心20min,取其上清液分别按照试剂盒说明书测定小鼠总抗氧化能力(T-AOC)及脂褐质(LF)含量。

2.3 统计学处理 实验数据用SPSS13.0统计软件进行处理,各组实验参数以表示,组间比较按方差分析进行显著性检验,P<0.05表示差异有统计学意义。

3 结果

与空白对照组比较,模型组小鼠皮肤组织T-AOC活性明显降低(P<0.01),LF含量明显升高(P<0.01)。相对于模型组,枸杞多糖低、中、高剂量组小鼠皮肤T-AOC活性均显著升高(P<0.05,P<0.05,P<0.01),LF含量明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。表明枸杞多糖低、中、高剂量均能提高衰老模型组小鼠皮肤组织T-AOC活性,降低LF含量。详见表1。

4 讨论

衰老是生命过程中正常而又复杂的生理现象,皮膚作为人体最大的器官,其衰老是人类生命历程中不可抗拒的规律[4]。皮肤老化分为时呈老化与光老化,前者是内源性因素所致,是衰老的根本,受遗传、内分泌等生理进化因素影响;后者是外源性因素所致,是皮肤衰老的重要影响条件,受紫外线、季节、生活压力、生活习惯、疾病等影响。皮肤衰老是内源性因素与外源性因素共同作用的结果。其显著特征是皮肤出现松弛及皱纹,暴露处皮肤粗糙、弹性降低、血管扩张、色素沉着、表皮角化不良等[5]。

现代医学对衰老的解释有不同学说,其中较为公认并得到广泛认可的是自由基学说,它认为皮肤衰老是自由基产生和消除发生障碍的结果。机体每天代谢时产生的自由基在正常情况下可被清除,但随着年龄的增长,氧自由基加速形成。自由基形成后,不断攻击细胞膜中的不饱和脂肪酸,形成过氧化脂质(Lipide Peroxide,LPO),后者则与膜脂、膜蛋白聚合,交联形成脂褐质(LF)并沉积于组织中,造成细胞功能障碍,加速细胞衰老[7]。因此,LF含量的高低间接反应了机体细胞受自由基损伤的严重程度。健康生物体内有抗氧化的酶系统和非酶系统,其中酶系统包括超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)等,非酶系统有VitE,生育酚,β胡萝卜素,谷胱甘肽,白蛋白等,这些物质均可及时处理氧自由基。因此,抗氧化力的测定引起人们的广泛关注。而总抗氧化能力(T-AOC)是一个全面反映皮肤组织抗氧化能力的良好指标,它的活力高低可全面反映皮肤组织中酶与非酶全部的抗氧化物。

研究结果显示,模型组小鼠皮肤细胞损伤,代谢紊乱,皮肤T-AOC活性明显降低,LF含量显著升高。枸杞多糖低、中、高剂量均可明显提高D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠皮肤组织T-AOC活性,降低皮肤组织LF含量,提示枸杞多糖能从一定程度上提高抗氧化能力,清除体内自由基,减轻或抑制脂质过氧化损伤,从而起到延缓衰老的作用。

参考文献

[1]苗婷婷,严青,王君洁,等.枸杞多糖抗衰老研究进展[J].亚太传统医药,2019,15(6):178.

[2]郑棋月,任建武.枸杞多糖延缓衰老的研究进展[J].中国园艺文摘,2014,12:48.

[3]汪建龙.枸杞多糖药理作用的研究进展[J].时珍国医国药,2005,16(10):1032.

[4]王明军,谭敏谊,刘洋,等.养颜驻颜口服液改善皮肤衰老的作用研究[J].中药材,2017,40(3):716.

[5]朱华伟,葛亚中,汪晓凌,等.复方美姿力口服液对D-半乳糖联合紫外线照射致皮肤衰老裸鼠模型的影响[J].中药材,2019,42(3):667.

[6]孙程,王冬东,张辉靠,等.茶树提取物经皮给药对衰老小鼠皮肤的影响[J].中成药,2017,39(8):1693.

[7]敖拉哈.衰老与自由基[J].老年医学与保健,1999,5(2):112.

(收稿日期:2019-12-09 编辑:刘斌)