病理术中特殊组织冰冻切片的制片技巧和应用分析

杨秀媚

【摘 要】目的：分析病理术中特殊组织冰冻切片的制片技巧和应用情况。方法：择取本院病理科2019年1月-2019年12月外检手术快速病理样本共计7560例开展研究，针对于不同组织，开展针对性的冰冻切片制备方式，分析结果。结果：针对于各个种类组织样本，应使用合适的方式完成切片，镜下查看组织结构较为清晰，其完全符合病理术中快速冰冻之诊断要求。结论：因为各个组织内组成成分配比存在差别。所以说，工作人员在开展实际工作中应当依照自身性质，择取适宜的制片方式，以取得满意成效。

【关键词】特殊组织;冰冻切片;技巧分析;温度;染色

现如今，冰冻切片已经在临床手术病理诊断中得以全面应用。其所取得的效果获得了诸多学者们的肯定与认可。但值得说明的是，在这种情况下，针对于病理医师合理掌握冰冻切片诊断技术也提出了更为严苛的标准与要求。病理科医师需要在最短的时间内分辨出送检样本具体性质，为病患的下一步治疗提供证据[1]。术中病理快速冰冻切片具体特征为要求明确、材料较少、时间紧张等等。病理切片的制片技巧会在很大程度上对最终病理诊断准确度造成影响。并且值得注意的是，术中快速诊断所承担的风险较高。由此能够看出，病理医师应当有效掌握送检样本制片技巧，进而取得质量过关的冰冻切片。结合实际情况，本文全面探究病理术中冰冻切片特殊组织制片技巧以及应用情况，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

择取本院病理科2019年1月-2019年12月外检手术快速病理样本共计7560例开展研究。在此其中包含骨组织、淋巴结、肾脏、大脑、胃肠、乳腺以及甲状腺等等。本实验利用ThermoNX50恒温冰冻设备完成切片。

1.2 方法 择取适宜的冷冻时长以及箱体温度，将样本放在冰冻设备内预冷处理，同时准备好乙醇灯染色剂以及固定液等等物品。取材器械和送检组织应当尽量避免沾水。具体的组织规格应当为2.0cm×2.0cm×2.0cm。切片包埋具体处理方式为：择取规格适宜的组织，放入到包埋剂之中。修整组织直至最大面积、细修。同时实现均匀速度切片。

组织染色以及固定方法为：将切片于室温环境下自然晾干。片刻之后使用甲醇固定时间为1min。苏木精染处理，时间为0.5min～1min。利用浓度为1%的盐酸乙醇完成分化，时间为15s。后开展液返蓝以及碳酸锂饱处理。使用浓度为1%的乙醇性伊红20s，浓度为95%的乙醇脱水。利用滤纸吸干处理样本，二甲苯透明后，使用中性塑胶完成封片。

2 结果

切片方式冷冻温度以及冷冻时间等等因素均会对具体的切片治疗造成影响。由于切片组织材质不均等，使得标本质量差异显著。因此，应当结合具体组织则取适宜的方式完成制片，通过观察可以发现细胞染色均匀度高，组织形态完整，细胞形态与常规性切片差异不大。

2.1 温度与时间 温度和时间对冰冻切片会产生较高影响。因为不同的组织样本形态与结构成分存在一定差异。所以说，针对于冰冻性切片所对应的要求也各不相同[2]。冰冻切片实现条件有差别。通过实践研究证实：脂肪以及乳腺温度最低，其远低于肾脏、肝脏、大脑、甲状腺等等样本箱体温度。

2.2 其他 除却冷冻温度以及时间以外，在开展病理术中冰冻切片特殊组织碎片过程中，也应当注意取材过程中是否充分去掉了异物、钙化物以及粘液等等。如果囊壁较薄，应当注意具体的组织包埋方向。完成切片之后，第一时间做好固定工作，定时更换染色液确保新鲜度，避免其变质，进而对最终诊断结果造成影响。

3 讨论

病理术中冰冻切片一般应用于术中病理诊断。最近几年，病理术中切片愈加受到临床医生的青睐，通过质量优秀的冰冻切片、精湛的切片技术实施病理诊断，要求病理科医师于短期内对于送检样本开展性质鉴别，进而为手术医生决定下一步治疗提供可靠依据。

从具体的冰冻切片常见组织和制片技巧方面来看，具体为：

（1）甲状腺。针对于甲状腺样本，应当有效掌握温度以及冷冻时间。通过严格控制后能够取得质量过关切片。具体切片要点为必须完整切格甲状腺包膜，开展组织修片过程中，应当有效查看切面情况。若发现小型结节，必须要切到，以免影响微小癌疾病诊断[3]。

（2）乳腺。和其他类别切片相比，乳腺纤维瘤切片制备相对简单。倘若纤维成分含量较多，例如乳腺髓样癌、乳腺病等等。经过冷冻后组织脆性升高，切片过程中非常容易出现空洞。所以说，应当将切片温度控制在-17～-18℃之间，厚度为7μm，匀速慢切。通常要大于6个切缘，箱温度应调节至-25℃，冻头温度为-30～-40℃，也可以利用冷冻锤全面催化冷冻过程，降低冰晶形成概率。

（3）脑部组织以及肾穿刺活检等样本。这些组织样本内部含有水分较高。如果操作不到位，非常容易生成冰晶。所以说，针对于大脑组织以及肾活检穿刺等等要本推荐速冻法加以处理。在对小型组织开展包埋过程中，应当上垫底部，预防切片机损坏现象发生。在进行样本上托时，应当现放少量包埋剂，大约在50%冷冻时把组织摊开，后使用冷冻锤轻压组织，厚度保持在4～5μm。完成切片之后，稍稍晾干后固定，可预防脱片现象发生。

（4）囊壁组织。较为常见的囊壁组织包含粘液性纤维瘤、卵巢胎肌瘤等等。上述标本外表通常附着大量脂肪、毛发、血液黏液等成分，因此不可贸然用水清洗。只需尽量将其剔除干净。取出病变位置切成长条。制成团样或者U型垂直放于冷冻托上[4-5]。开展切片过程中，应当确保全层完整度。对于畸胎瘤，应当切除具有特点的头节区域。

（5）高脂肪含量样本。由于此类样本内含有大量的脂质，且仅有少量疏松性结缔组织。在切片过程中，如果温度控制不良，很容易发生空洞，甚至完全无法切出。所以说，针对于脂肪组织，箱体温度必须控制在-35℃左右，开启设备功能。切片厚度应当为15-20μm。冻头温度保持在-45～-50℃之间。加长冷冻时间。当取得满意切片硬度之后，切片过程中必须快速。切片进刀要快。

总而言之，因为各个组织内组成成分配比存在差別。所以说，工作人员在开展实际工作中应当依照自身性质，择取适宜的制片方式，以取得满意成效。

参考文献

江浩，卢正亮，鲁芒，廖金龙，谭丽梅.甲状腺乳头状微小癌快速冰冻切片的病理特征分析[J].赣南医学院学报，2019，39（11）：1133-1136.

张玲，李理.甲状腺微小乳头状癌术中冰冻未能明确诊断的原因分析[J].实用癌症杂志，2019，34（12）：1959-1961.

林明华.富含脂肪的组织冰冻切片制作要点[J].临床合理用药杂志，2019，12（34）：184-185+187.

刘露露.乳腺导管内乳头状肿瘤术中冰冻病理诊断价值[J].中国继续医学教育，2019，11（33）：96-98.

赵爱荣.医学检验科生物安全的风险及防控分析[J].世界最新医学信息文摘，2019，19（04）：194+209.