怒江州不同产地野生羌活中羌活醇与异欧前胡素的含量测定

和 祎

云南省怒江州食品药品检验所，云南 怒江 673199

羌活又名羌青，为常用中药材，有数千年的药用历史，其味辛、苦、性温，具有解表散寒、祛风除湿、止痛等功效，可用于风寒感冒、头痛项强、风湿痹痛、肩背酸痛等的治疗[1-4]。随着中医药事业的发展，羌活药材不仅在中药配方中广泛应用，也是许多中成药的主要原料，羌活属于三级中药材保护品种，由于过多的采挖，导致野生资源严重减少。鉴于羌活药材的应用广泛，而目前市场上羌活药材紧缺，对野生羌活进行合理的保护和引种种植显得非常重要。怒江州地处滇西北横断山脉纵谷地带，有少量野生羌活资源，但基于羌活品种繁多，辨别起来非常困难，本研究按《中国药典》2015年版一部羌活质量标准的规定，主要通过对怒江州不同产地的羌活进行羌活醇和异欧前胡素含量测定，为怒江州开展羌活引种驯化的种植企业提供参考。

1 材料与试药

1.1 仪器 LC-20A高效液相色谱仪(日本岛津仪器公司)，GH-252电子天平(广州市爱安得仪器有限公司)，CPA225D赛多利斯电子天平(赛多利斯科学仪器北京有限公司，十万分之一)。

1.2 试药 羌活醇对照品(批号：111520-2013，中国食品药品检定研究院，含量99.8%)；异欧前胡素对照品(批号：110827-201812，中国食品药品检定研究院，含量99.6%)；药材采自于2019年10月至11月的新鲜样品，选取根茎和根，除去须根和泥沙，晒干。采集地分别为怒江州兰坪县、泸水县等地。乙腈为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱：Inertisl ODS-3 C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相：以乙腈-水(44∶56)为流动相；流速为1.0 mL/min；柱温：40 ℃；进样量：10 μL；检测波长为310 nm；理论板数按羌活醇峰计算应不低于5000。色谱图如图1所示。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取羌活醇对照品13.20 mg，置25 mL的容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，制成每1 mL含0.5269 mg羌活醇的对照品储备液。另精密称取异欧前胡素13.43 mg，置于50 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，制成每mL含0.2675 mg的异欧前胡素的对照品储备液。分别精密量取以上两种对照品储备液5 mL，置于50 mL的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，及得对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号筛)约0.4 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，称定重量，超声处理(功率250 W，频率50 kHZ)30 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

2.4 加样回收率试验 精密称取已知含量的同一批药材供试品细粉，约0.4 g(兰坪县营排镇小桥村 四川引种种植)，精密称定，置具塞锥形瓶中，共6份，每二份分别加入“2.2”项下配制的对照品溶液储备液1.0、2.0、5.0 mL，按“2.3”项下的方法制成供试品溶液6份，各取10 μL注入液相色谱仪，依法进行测定，计算。结果羌活醇平均回收率为100.26%，RSD为1.74%(见表1)。异欧前胡素平均回收率为100.08%，RSD为1.64%(见表2)。

表1 羌活醇回收率试验结果 (n=6)

表2 异欧前胡素回收率试验结果 (n=6)

2.5 样品含量测定 取不同产地的羌活药材按“2.3”项下方法分别制备供试品溶液，各取10 μL,每份溶液进样2次，计算，不同产地羌活药材中羌活醇和异欧前胡素的含量见表3。

表3 不同产地羌活药材中羌活醇和异欧前胡素测定结果 (n=2)

3 讨论

《中国药典》2015年版规定，羌活中含羌活醇和异欧前胡素的总量不得少于0.40%。从表1得出有3个产地的羌活药材中无羌活醇，甚至有的两个成分都没有，6个不同产地的样品，仅有一个达到《中国药典》的要求。

通过比对，6个样品的含量差别很大。经过分析，笔者认为可能存在几个方面的原因。首先羌活品种繁多，对羌活品种的认定显得尤为重要，一旦品种选择出错，将对企业造成很大的损失。其次由于羌活主要成分受生长环境影响较大，生长环境不同，含量差别也很大。再次种植年限对羌活成分的影响也比较大，种植的时间越长含量越高。此次试验样品均由相关种植企业提供，并非我所试验人员采集。怒江州被列为全国“三区三州”深度贫困地区，在脱贫攻坚的关键时期，建议相关种植企业要引起高度重视，在种植的品种、生长环境等方面要进行认真的选择，以免造成更大的损失。