葡萄籽原花青素提取物对鲤血清生化指标的影响

贾申宗， 陈延娜， 林梦君， 冯世坤， 卢荣华， 聂国兴

（河南师范大学水产学院， 河南 新乡453007）

近年来，在我国水产养殖业集约化迅猛发展的同时，养殖鱼类出现脂质过度蓄积和免疫力下降的状况却不断增加。葡萄籽原花青素提取物（Grape seed proanthocyanidins extract，GSPE）是从葡萄籽中提取的一类多酚类化合物[1]，已有研究发现GSPE能够调节脂质代谢[2-4]；在斑马鱼[5]、金鱼[6]、吉富罗非鱼[7]、龙胆石斑鱼[8]、湘江金鲫[9]和星洲红鱼[10]等鱼类中的研究也发现，在饲料中适量添加GSPE可有效降低饵料系数，减轻肝脏脂质的蓄积，并提高机体免疫力和抗氧化能力，从而促进鱼体健康生长。本试验通过灌喂的方式将葡萄籽原花青素短时间作用于鲤，检测鲤血清生化指标的变化，探讨短时间内葡萄籽原花青素对鲤脂代谢等的作用，为GSPE在鱼类上的进一步开发利用提供理论依据。

1 试验材料与方法

1.1 试验用鱼

试验所用鲤为河南师范大学水产学院实训养殖基地提供，挑选其中体格健壮、生长良好的试验用鱼80尾，初始体质量为100 g±1.26 g。

1.2 试验试剂

葡萄籽原花青素提取物（GSPE）由天津市尖峰天然产物研究开发有限公司馈赠；0.65%生理盐水自行配置。

1.3 试验方法

将试验鱼随机分为3组，空白对照组、生理盐水灌喂组和GSPE灌喂组，使用商品饲料暂养一周后进行灌喂试验，灌喂剂量为250 mg/kg*尾。灌喂过程使用灌胃针从鱼口腔进入，缓慢灌喂对应试剂。每个试验组25条鱼，分别进行空白处理、灌喂生理盐水（2 ml）和GSPE（2 ml）组，分别在灌喂后的0 h、1 h和3 h进行抽血，血液在室温下静置2 h后，使用4 ℃离心机以3000 rpm离心15 min，吸取上清至1.5 ml无菌无酶EP管中，做好标记后用全自动生化分析仪检测各项血清生化指标。

1.4 数据分析

血清生化相关指标检测包括甘油三酯（TG）、总胆固醇（CHOL）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、葡萄糖（GLU）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）。使用Microsoft Excel 2016和SPSS 22.0软件对各项生化指标均值进行统计和差异显著性分析（P＜0.05表示差异显著，P＞0.05表示差异不显著）。

2 试验结果

灌喂处理后各时间段的检测结果如图1-3所示。

由图1可知，灌喂GSPE 0 h 时，各项血清生化指标均未出现显著性差异。

由图2可知，灌喂GSPE处理1 h后，血清各项生化指标中，与空白对照组、生理盐水组相比，灌喂GSPE组的甘油三酯水平明显下降，具有显著性差异（P＜0.05）；低密度脂蛋白水平明显降低，具有显著性差异（P＜0.05）；白蛋白水平和球蛋白水平明显上升，差异显著（P＜0.05）。其余指标均未发生显著性变化。

由图3可知，灌喂GSPE 3 h后，GSPE组与空白对照组、生理盐水组相比，低密度脂蛋白水平显著降低（P＜0.05）；白蛋白水平和球蛋白水平明显升高，具有显著性差异（P＜0.05）。其余指标均未发生显著性变化。

3 讨论

血清生化指标可以反映机体的营养水平和健康状况[11]。以往的研究表明，GSPE可以通过减弱氧化应激的不利影响来保护动物的肝脏健康[12]。本试验中，与对照组相比，灌喂GSPE组血清中的葡萄糖含量无显著性变化，白蛋白和球蛋白水平在短期内显著提高。表明GSPE可能通过提高免疫力，对鲤的机体起到一定的保护作用。这与Nader[13]等发现在日粮中添加葡萄籽可以提高鲤鱼免疫指标的结果相似。血清中的谷丙转氨酶、谷草转氨酶是鱼类肝脏中脂质代谢的重要酶，通常情况下，它们在体内的含量较低且相对稳定，当肝脏受损后会导致它们的含量升高[14]。有研究显示，GSPE具有抗氧化和抗应激的功效[15-16]，本试验中，与对照组相比，灌喂GSPE组血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶含量无显著性变化，表明GSPE不会对鲤的肝脏造成损伤。血清中总胆固醇和甘油三酯是血液中脂类的主要组成成分，高密度脂蛋白和低密度脂蛋白是鱼类脂类代谢中转运胆固醇的重要物质，二者含量的高低变化可反映肝脏的功能情况[17-18]。本试验中，与对照组相比，灌喂GSPE组在短期内能显著降低鲤血清中甘油三酯和低密度脂蛋白含量，这与卢俊姣等[19]研究GSPE对吉富罗非鱼血清生化指标的影响结果一致。闫少芳等[20]的研究表明GSPE具有降低血清和肝脏中胆固醇与甘油三酯的功能，也有研究发现原花青素可以通过抑制胆固醇合成关键酶的活性，减少低密度脂蛋白在血管中的停留时间来降低小鼠血清中甘油三酯和低密度脂蛋白水平从而促进脂代谢[21-22]。对鲤灌喂GSPE后甘油三酯和低密度脂蛋白指标的变化机制可能与之相似。但黄光中等[23]研究葡萄籽提取物对黄鳝血液生化指标的影响结果与本试验不同，分析原因可能是由于所用试验动物的种属不同，对受试物的反应不同或所用GSPE剂量不同或者施用药物的方式不同所致，具体原因有待于进一步探索。

4 结论

综上所述，GSPE可以改善鲤脂代谢，从而保护鲤肝脏健康，是一种安全稳定对机体有益的化合物，对研发鱼类绿色、安全的饲料添加剂具有一定的参考价值。关于GSPE调节鲤脂代谢的具体机制，还需要更深入的研究。