结核感染T细胞斑点试验在辅助诊断骨结核中的应用价值分析

饶涛 窦吉辰 刘思源

【摘 要】目的：分析探讨结核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）在辅助骨结核诊断中的应用价值。方法：通过对本院161例疑似骨结核患者的临床资料进行回顾性分析，结合患者的临床表现，病原学、影像学和组织病理学检查结果，以及临床抗结核治疗效果开展诊断，确认骨结核患者81例，非骨结核患者80例。治疗前所有患者均接受过结核菌素纯蛋白衍生物（TB-PPD）试验及T-SPOT.TB。對T-SPOT.TB在辅助诊断骨结核中的效能进行分析。结果：T-SPOT.TB辅助诊断骨结核的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均高于TB-PPD试验数据，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：结核感染T细胞斑点试验诊断敏感性、特异性较高，可作为辅助工具来诊断骨结核[1]。

【关键词】T-SPOT.TB;辅助诊断;骨结核;应用价值

【中图分类号】R529.2;R446.6 【文献标识码】A 【文章编号】1002-8714（2020）02-00-01

1 资料与方法

1.1临床资料

选取2015年3月至2016年3月本医院收治的疑诊骨结核患者161例，男85例，女76例，年龄（32.62±18.3）岁;有卡介苗接种史156例（96.89%），合并肺结核或肺结核病史19例（11.8%），糖尿病史9例（5.6%），慢性肾病3例（3.1%）。根据临床表现，影像学、病原学组织病理学检查结果以及临床抗结核治疗效果等信息对患者进行诊断分组。结果骨关节结核组81例，其中脊柱结核42例、膝关节15例、髋关节16例;排除骨关节结核的患者80例。

1.2采用北京祥瑞生物制品有限公司生产的结核菌素纯蛋白衍生物进行结核菌素纯蛋白衍生物试验（药品规格：5支/盒，20IU/ml.每支1ml，国药准字：S10960018），将TB-PPD[0.1ml（2U）]注射于患者前臂掌侧皮内，72h后观察注射部位皮肤的状况。参照《中国结核病防治规划实施工作指南》（2008版）标准[9]对结果进行判断：硬结直径<5mm判断为阴性;5～9mm判断为弱阳性;10～20mm判断为阳性;>20mm或局部出现水泡、淋巴管炎、坏死等判断为强阳性。检测均在患者治疗前进行。

1.3 T-SPOT.TB

在4h内分离患者的新鲜肝素抗凝全血5～10ml，然后按1∶1的比例跟室温预热的RPMI-1640培养液混合均匀，将血样按3：1比例加在Ficoll淋巴细胞分离液上层，注意血样与分离液避免混合[2]。温度18℃，离心22min，相对离心力1000g。将分离管中的单核细胞层转移到新的15ml无菌尖底离心管内。外周血单核淋巴细胞（PBMCs），按试剂盒说明将分离的PBMCs加入预包被抗人-γ干扰素抗体的板孔中，每个样品加4个板孔，每孔约2.5×105个PBMCs，然后再将细胞培养液、ESAT-6抗原，CFP-10抗原及阳性对照分别加入4个已加样板孔中，放置于培养箱中孵育16到20小时，要求培养箱内37℃，5%CO2、并保持一定的湿度[3]。用碱性磷酸酶偶联的二抗和底物显色，洗板后统计斑点的数量。判定结果为：抗原ESAT-6或CFP-10板孔中任意1孔的点数减去对照孔点数大于或等于6判定为阳性，点数小于6判定为阴性。本检测均在患者治疗前进行。

1.4统计学分析

采用SPSS23.0统计学软件对实验数据进行分析，分别对T-SPOT.TB和TB-PPD两种试验的敏感度、特异性、阴性预测值、阳性预测值、阳性预测值进行计算，采用x2进行检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

比较发现，T-SPOT.TB诊断骨结核的敏感度、特异度、阳性预测值以及阴性预测值均高于TB-PPD试验，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1～3。

3 讨论

传统方法采用活检结核分枝杆菌的方式来检测早期骨结核，此种方法取材难，准确率低，其检测的敏感度、特异度不是很理想，效果也不明显，一直以来医生们都苦于没有一种有效的方法来诊断早期骨结核[4]。进几年，核感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）做为一种新的早期筛查方法，具有简便、快捷、成本低的特点，在结核病的诊断等方面因诊断效果明显而被广泛推广应用，成为目前诊断结核感染的一种常用方法[5]。本研究通过T-SPOT.TB与TB-PPD两种试验对骨结核的诊断效能进行比较，发现T-SPOT.TB辅助诊断骨结核的敏感度为97.88、特异度为92.56、阳性预测值为92.33，阴性预测值为98.58均高于TB-PPD试验数据的51.23，73.15，69.51，61.24，差异显著，具有统计学意义（P<0.05）。这种新的诊断方法为骨结核的检测提供了更方便、快捷的方式，大大缩短了检测时间，提高了检测效率，在辅助检测骨结核上取得了良好的效果。

综上所述，T-SPOT.TB在骨结核检测过程中有较高的检测敏感性和特异度，其检测效果明显优于TB-PPD试验，而且整个检测过程仅需要两天的时间、检测效率高，取材方便，可以作为一种有效的方法来辅助诊断骨结核，具有很高的临床推广应用价值。

参考文献

[1] 吴青，吕幸，李艳，等.结核感染T细胞斑点试验在辅助诊断骨结核中的应用价值[J].广西医学，2016，38（12）：1649-1650.

[2] 李建华，张文龙，鲍玉成，等.结核感染T淋巴细胞斑点试验在骨结核病诊断中的临床应用价值[J].中国实验诊断学，2015（10）：1770-1772.

[3] 李自军.结核感染T淋巴细胞斑点试验在骨结核病诊断中的临床价值[J].河南预防医学杂志，2017，28（5）：388-389.

[4] 苗瑞瑞，张文龙，鲍玉成，等.T-SPOT.TB在骨与关节结核鉴别诊断中的价值[J].赣南医学院学报，2016，36（1）：76-77.

[5] 马俊，肖和平.332例骨关节结核的临床特点分析[C]//第三届骨关节结核临床诊断与治疗进展及其规范化专题研讨会资料汇编.2015.