溶血和脂浊对ELIsA法检测HBsAg 的影响分析

闫月明

【摘 要】目的：为了探索解决实际工作中ELIsA法检测HBsAg中溶血和脂浊对ELIsA法检测HBsAg 的影响。结论：ELISA法检测HBsAg标本质量很重要，会直接影响检验结果，采血要空腹、避免溶血和脂血。从实验结果可以看出溶血对检验结果有一定的影响，可以造成假阴性。脂血对ELISA法检测HBsAg无影响。

【关键词】ELIsA法;HBsAg;溶血和脂浊;影响因素

【中图分类号】R446.6 【文献标识码】B 【文章编号】1002-8714（2020）02-00-01

乙肝是我国发病率比较高的传染病，乙肝病毒感染人体后很难消除，HBsAg是感染乙肝病毒在人体最早出现的血清学标志物。目前，临床用ELIsA法检测HBsAg，因其灵敏度高，特异性强等优点而受到广泛应用，但我们在实际工作中碰到结果前后不一致，重复性不好，花板等现象，且结果不因检测者的改变而稳定。现对实际工作中各种影响因素，进行如下分析探讨：

1 材料与方法

1.1材料 ELISA法检测 HBsAg试剂为上海科华公司提供所有试剂均在有效期内。标准品由宁夏临检中心提供。

1.2标本来源 本院健康体检各类人群368例，采集静脉血，分离血清。

1.3方法  严格按照试剂说明书进行操作，加样量、水浴温度、孵育时间、洗板、拍板严格操作规程，配置新鲜清洗液，用洗板机洗涤。可疑结果平行反复2次[1]，用标准品对本批次试剂盒进行质量控制，HBsAg阴性、阳性结果均在控。

1.4结果判断 ELISA双抗体夹心法检测HBsAg在检测线和对照线位置出现两条紫红色线结果为阳性，仅在对照线位置出现紫红色线结果为阴性，试纸条上对照线位置未出现紫红色结果为无效。

2 结果

2.1人群筛查结果368例检测标本HBsAg，正常检测其中阳性35例，阳性率9.5%。

2.2将未溶血无脂血标本35例阳性血样，人为用清洁竹签造成溶血后检测HBsAg，出现3例假阴性，假阴性率为8.7%。

2.3让35名阳性患者中有复查检验结果并且自愿配合的人复检结果，采集到餐后脂血20份，复查阳性结果符合率为100%。

3 讨论

ELISA法检测HBsAg中溶血和脂浊是临床检验中最常见的干扰因素，从实验结果可以看出溶血对检验结果有一定的影响，可以造成假阴性。原因有可能是實验中酶标反应孔因为溶血阻碍了实验出现后带现象，造成假阴性。脂血对ELISA法检测HBsAg无影响。[2.3.4]

ELISA法具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点，但是ELISA法易受到加样量、反应温度恒定、反应时间准确、洗涤彻底性等诸多因素的影响，而且操作步骤较多，整个实验过程至少需要2h左右，在实验前校正加样器，保证吸样量的精确，洗板前，应检查洗板机针孔有无堵塞，保证孵育时间、水浴温度稳定。

ELISA法检测HBsAg标本质量很重要，会直接影响检验结果，采血时要空腹、避免溶血和脂血标本，尽量当天标本当天完成，不能完成要及早分离出血清，在冰箱保存。总之，ELISA实验的影响因素比较多，在实际工作中要严格操作规范，避免各种因素的影响，以保证检验结果准确可靠。

参考文献

[1] 叶应妩， 王毓三， 申子瑜. 全国临床检验操作规程， 第3版.南京：东南大学出版社， 2006，618-621.

[2] 孙正伟，薛瑞贤.酶联免疫一步法检测HBsAg前带现象的初步探讨.中华医学检验杂志，，16（6）：279

[3] 周红妹，黄小虎.ELISA法检测HBsAg影响因素分析[J].中国热带医学，2006，6（10）：1867 .

[4] 许斌，朱虎定.ELISA法检测HBsAg影响因素探讨[J].临床检验杂志学，2000，18（4）：232-232 .