快速测试片在食品微生物检测中的应用

2020-12-03 13:28任中锋甘肃奇正实业集团有限公司
食品安全导刊 2020年24期
关键词:大肠菌群滤纸纸片

□ 李 燕 任中锋 甘肃奇正实业集团有限公司

食品安全问题受到全社会的高度重视,尤其是在物质生活条件逐步改善的趋势下,人们对食品质量与安全提出了更高的要求,防止微生物污染等问题的出现,切实保障人们的生命健康安全。微生物会在食品的生产加工、储存运输和销售等环节对其造成污染,进而引起食物中毒或者食品变质。病原菌种类较为丰富,当其在食品中的含量超标时,将会直接威胁食用者健康。开展有效的微生物检测工作,是预防上述问题的关键,国家为此也制定了相应的检测标准,以实现对食品安全问题的有效控制,防止公共卫生事件的发生。传统检测方法不仅效率低下,而且需要动用较多的人力、物力和财力。快速测试片的应用则能够增强操作的便捷性,符合当前社会生产的快节奏特点。

1 快速测试片在食品微生物检测中的应用特点

在样品检测中应用快速测试片,能够大大提升检测工作的效率,同时由于无需使用试剂辅助,提升了检测的便捷性。快速测试片的环保性也较好,不会产生较多的废渣和废液等,在室外检测中的应用较多。快速测试片的应用,能够实现取样和接种的同步实施,保障检测结果的可靠性,防止出现较大的误差[1]。应用快速测试片所需时间较少,因此能够有效防止菌群繁殖对检测结果造成的影响。

2 快速测试片在食品微生物检测中的应用措施

2.1 以滤纸为载体的测试片

2.1.1 菌落总数测试片

在选择滤纸时应该严格检查其质量,确保其无毒且具有较好的吸附力和密度,4.0 cm×5.0 cm为滤纸尺寸合理值。在无菌培养基当中加入TTC,应用无菌滤纸进行吸附,在干燥处理后装入聚丙烯口袋并密封。氧化还原性是TTC的基本特性,能够与氢反应生成红色三苯甲酯,对其中的红点数量进行计算,则能够得到细菌数量。在应用菌落总数测试片时,应该严格控制TTC用量,防止对菌体形成抑制,增强检测的灵敏性。培养箱温度控制在37 ℃为宜,培养时间在17 h左右。

2.1.2 基于染色法的大肠菌群测试片

在制作浸液时,需要对乳化剂、乳糖、琼脂、蛋白胨、TTC和溴甲酚紫等原材料的数量和浓度加以控制,将灭菌环境温度、浸泡温度和烘干温度分别控制在115、60 ℃和55 ℃左右,6.8~7.0为合理的pH范围,培养时间同样控制在17 h左右。当有红色斑点出现,同时外周有黄晕,红色斑点存在于黄色背景当中时则为阳性。培养液的选择性和生物酶作用的特异性,是影响大肠菌群测试片应用效果的直接因素,在检测工作当中应该对TTC和琼脂粉的用量加以严格控制。

2.1.3 基于荧光法的大肠杆菌纸片

细菌会产生代谢产物与代谢酶,应用大肠杆菌纸片荧光法对食品微生物进行检测时,主要是应用酶-底物反应法,对大肠菌落相关酶的活性进行检测,能够实现对微生物的有效计数。培养温度以37 ℃为宜,荧光灯的波长选择365 nm,可以检测浓度在0~4 cfu/mL的微生物,能够起到良好的定性与定量分析效果。

2.2 以Petrifilm为载体的测试片

2.2.1 菌落总数测试片

在纸片中央滴入1 mL样品并覆盖,保持样品的均匀性。为了保障凝胶的良好固化效果,需要静置1 min,恒温箱温度控制在37 ℃,培养时间在48 h左右。

2.2.2 霉菌、酵母菌测试片

在霉菌、酵母菌测试片当中含有营养物质和菌落生长指示剂等,为了对细菌的生长加以抑制,通常需要使用抗生素。培养环境温度控制在21~25℃,培养时间通常在3~5 d左右。酵母菌的菌落一般较小,而且具有清晰可观的外边缘,在颜色上也具有良好的均一性特点,菌落通常隆起。霉菌菌落通常较大,边缘不够清晰,颜色呈现出一定的杂乱性,而且具有扁平性。

2.2.3 大肠菌检测纸片

葡萄糖苷酸酶指示剂和改良的VRB培养基存在于大大肠杆菌检测纸片当中,β-葡萄糖苷酸酶主要是由大肠杆菌产生,能够在指示剂的作用下生成蓝色沉淀物,气体由发酵乳糖产生,在胶膜作用下连接各个气泡,菌落一般呈深蓝色或者蓝色。由于大肠菌群菌落的存在,培养基会呈暗红色,因此在检测大肠菌群时则需要对气泡进行计数。通过颜色和气泡数,有效判断大肠菌群和大肠杆菌及其含量。

3 结语

以滤纸为载体的测试片和以Petrifi lm为载体的测试片,是当前快速测试片的基本类型,对于食品微生物的检测可以起到良好的效果,具有操作便捷、结果可靠的特点。在检测工作当中,应该明确不同测试片的应用条件及要点,从而切实发挥其快速检测的优势,保障食品安全。

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