浅谈高效液相色谱仪日常维护经验

□ 柴梅梅 榆林市食品检验检测中心

1 高效液相色谱仪

高效液相色谱，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，各成分在色谱柱内被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。高效液相色谱仪是应用高效液相色谱原理分析高沸点不易挥发、热不稳定和分子量大的有机化合物的分析仪器。它由储液容器、泵、进样器、色谱柱、检测器与记录仪等组成。

2 高效液相色谱仪各单元日常维护

2.1 储液容器

储液器是储存流动相的容器。储液器最好选用仪器公司配制的储液瓶，不要乱用；超过有效期的流动相和用久了的试剂瓶应定期废弃，防止瓶中生长微生物和组分改变；每个储液器要储存固定的溶剂；要保证储液器的清洁，定期清洗内壁，经常更换附件。

2.2 泵

提高泵的使用寿命主要有以下措施：时刻关注泵压大小，根据泵压变化及时发现漏液和堵塞的情况；使用缓冲液做流动相一定要用0.45 μm 滤膜过滤；每次使用完要把泵中的缓冲液冲洗干净，防止盐分沉积，最好浸在有机溶剂中；使用过滤滤芯，并且定期清洗更换，防止泵阻塞。

2.3 检测器

保证检测器的清洁，每次使用后冲洗；做好排气工作，整个流路中只要有一个气泡就会在检测器上得到强烈的信号反映，所有流动相以及管路一定要排气，以防气泡残留在检测器内部；不要频繁开关检测器，频繁的开关会缩短灯的使用寿命，检测结束长时间不用时一定记得关灯。

2.4 自动进样器及进样阀的维护注意事项

样品在装瓶前必须用0.45 μm 或0.22 μm 滤膜过滤，以减少微粒对进样阀的磨损或阻塞；防止缓冲盐和样品残留在进样阀中，每次检测结束后要记得冲洗进样阀，通常可用水冲洗，或先用能溶解样品的溶剂冲洗，再用水冲洗。

2.5 色谱柱

日常检测工作中，对色谱柱的正确使用和维护非常重要。如果使用不当就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。因此，要注意以下5 点。

①流速的调节，调节流速要缓慢，柱压的急剧变化会影响柱内的填充情况；②按照箭头方向安装色谱柱，不要反冲色谱柱，反冲会迅速降低柱效；③安装预柱和保护柱，并且定期更换；④选择使用适宜的流动相（尤其是pH），使用前一定要仔细看说明书，在合适的pH 范围内使用；⑤长时间不用或存放色谱柱时，柱内应充满溶剂（甲醇或乙腈），并拧上堵头。

3 液相色谱仪短期关机和长期关机的维护工作

3.1 液相色谱仪短期不使用时维护（两三天如周末不用）

短期不使用液相色谱仪时，首先用超纯水冲洗系统，尤其是在使用盐类缓冲液以后，以防盐结晶等有害沉淀留在管路中损坏仪器；然后用甲醇/水（甲醇比例由低到高逐渐增加）冲洗，再用纯甲醇冲洗30 min 以上；最后关闭泵、检测器、进样器的电源[1]。

3.2 液相色谱仪长期不使用时维护（一周以上长期不用）

长时间不使用液相色谱仪时，一定要做在好彻底的维护以后关机。①清洗系统。如果流动相是有机相，只包括：甲醇、乙腈等，只需用100%甲醇清洗40 ～60 min 即可关机；如果流动相是缓冲盐类，如：弱酸、弱碱（强酸碱绝对禁止进入仪器）、乙酸、乙酸铵、三氟乙酸、磷酸、氨水、三乙胺与磷酸盐等。清洗时，需要将缓冲盐的管路放入水相，然后用95%水+5%甲醇清洗系统80 ～100 min，再用100%甲醇清洗40 min。②清洗完毕后，在工作站中关闭泵。③依次关闭检测器、泵、柱温箱的电源，关闭稳压电源，关闭工作站及电脑。④盖好防尘罩。

4 小结

操作液相色谱仪的工作人员，应在熟练掌握仪器操作的基础上，了解各个部件的性能，做好日常维护保养工作，从而保证仪器的良好状态，确保分析结果的准确可靠性。