紫外分光光度法测定刺梨原汁中总黄酮含量的研究

2020-12-28 02:32耿宁刘易伟卿云光
食品安全导刊·中旬刊 2020年11期
关键词:总黄酮含量测定

耿宁 刘易伟 卿云光

摘要:建立一种操作簡单、结果可靠、测定成本较低的检测刺梨原汁中总黄酮含量的方法。通过实验验证,方法定量限为7.00mg/100g,在常见样品浓度和检出最高限的测试结果变异系数(CV值)分别为2.3%、1.9%,4个刺梨原汁样品中总黄酮含量分别为80.24、72.34、86.69、74.39mg/g,平均回收率为100.3%。

关键词:刺梨原汁;总黄酮;含量测定

刺梨是贵州的特色食品资源[1],含有丰富的活性成分黄酮类物质,贵州省生产的刺梨鲜果,加工产品主要以刺梨原汁为主,然后再利用刺梨原汁加工成浓缩汁、饮料等多种营养食品和保健品[2],刺梨原汁中含有丰富的活性成分总黄酮,是一种很强的抗氧剂,可有效清除体内的氧自由基,阻止细胞的退化、衰老,也可阻止癌症的发生,改善心脑血管疾病的症状[3] [4]。建立一种适合刺梨原汁中总黄酮含量的测定方法,为检测机构和相关企业提供更适合的检测方法,提高检测效率,也对于规范刺梨产品加工企业质量管理、强化市场监管、促进贵州刺梨产业的健康发展具有重要意义和作用。

一、仪器、试剂及材料

1.仪器

TU-1901紫外可见分光光度计,北京普析通用仪器有限责任公司。

2.对照品

芦丁对照品(供UV法测定,含量为92.4%),中国食品药品检定研究院。

3.试剂

无水乙醇、甲醇,均为分析纯。

4.样品

“刺梨原汁”(贵州天泷集团投资开发有限公司,样品1);“刺梨原汁”(贵州贵定敏子食品有限公司,样品2);“刺梨原汁”(贵州山果王健康实业有限公司,样品3);“刺梨汁”(贵州绿视野绿色开发有限公司,样品4)。

二、方法与结果

1.试样制备

称取1g(精确至0.01g)的试样至25ml容量瓶中,用乙醇定容,摇匀后,超声提取20min,室温静置30min,取上清液1mL于25mL比色管中,用甲醇定容后待测。

2.标准曲线的制备

以芦丁为对照品,精确称取芦丁标准品109.7mg(含量为92.4%)于100mL容量瓶内,用甲醇定容至刻度,得1.014mg/mL芦丁储备溶液。依次稀释至浓度为1.01μg/mL、2.03μg/mL、3.04μg/mL、4.06μg/mL、5.07μg/mL、6.08μg/mL芦丁对照品溶液,以甲醇溶液为零点,于360nm处测量吸光度。以芦丁对照品浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制校准曲线,线性方程为y=0.0299x-0.0003,R2=0.9999,表明芦丁含量在0~6.08μg/mL范围内具有良好的线性关系,经计算,该方法在0~380mg/100g范围内,样品中总黄酮浓度与吸光度呈良好的线性关系。

3. 检出限(LOD)和定量限(LOQ)实验

样品空白独立测试20次实验,计算结果为0.63 mg/100g,计算标准偏差(s)为2.278×10-16。

根据LOD=样品空白平均值+3s,即LOD=0.63+3×2.278×10-16,计算结果保留小数点后两位,LOD=0.63 mg/100g。

为增加数据可信度,且检测样品的结果范围为55~90 mg/100g,取LOQ值=10×LOD值,即LOQ=6.30 mg/100g,最终取值LOQ=7.00mg/100g。

4.精密度实验

精确称取1号样品12份,其中6份分别加入3mg芦丁对照品,按照“1.试样制备”方法处理并测定,结果如表1所示。结果显示本方法在常见样品浓度和检出最高限的测试结果变异系数(CV值)分别为2.3%、1.9%,均符合GB/T 27404-2008《实验室质量控制规范 食品理化检测》中相关规定,表明方法精密度良好。

5. 样品检测及回收率实验

分别取样品1、2、3、4号样品做加标回收试验,然后按照“1.试样制备”处理,结果如表2所示,样品1、2、3、4中总黄酮含量分别为80.24、72.34、86.69、74.39mg/mL,且平均回收率为100.3%,表明方法准确性好。

三、结语

综上所述,本文以芦丁为对照品,通过紫外分光光度法测定总黄酮含量,操作简单、结果可靠、测定成本较低,在总黄酮含量为7~380mg/100g范围内,精密度良好,测试结果准确,适用于刺梨原汁中总黄酮的测定。测试样品1、2、3、4中总黄酮含量分别为80.24、72.34、86.69、74.39mg/100g,而相关报道中提到刺梨鲜果中总黄酮含量高达0.89%[4],说明在加工过程中,刺梨鲜果中的大部分黄酮类化合物残留在刺梨果渣内,如何将总黄酮类化合物更有效地提取到刺梨原汁中,本方法可以为下一步研究奠定基础。

参考文献:

[1] 贵州省刺梨发展现状分析[J]. 刘易伟,杨舒清.  食品安全导刊(下旬刊),2020,(第2期)

[2].黔南州刺梨产业链分析[J]. 罗桃,王玉奇,陈文本.  中国林副特产,2020,(第5期):106-107

[3] 刺梨中活性物质的提取与性能探讨[J].陈代秀,夏伟丽,胡思前,郭艳华,张玉敏.  化肥设计,2020,58(02):13-17

[4] 刺梨黄酮的精制及其抗氧化活性比较[J].张汇慧,吴彩娥,范龚健,等. 南京林业大学学报(自然科学版),2015,39 (3):101-105

[5] 刺梨总黄酮的含量测定及资源利用[J].杜薇,刘国文. 食品科学,2003(01):112-114.

作者简介:耿宁 ,贵州省黔南州都匀人,食品安全检测员,工程硕士。

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