血清omentin-1和vaspin在非酒精性脂肪性肝病患者中的表达及意义

苏秀丽 王同生 张英剑

关于网膜蛋白-1(omentin-1)、内脏脂肪组织来源的丝氨酸蛋白酶抑制剂(visceral adipose tissue-derived serine protease inhibitor，vaspin)这些脂肪因子在非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)中的发病机制和炎症影响情况尚不清楚[1-3]。本研究通过检测NAFLD患者omentin-1、vaspin、白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)和C反应蛋白(creactive protein，CRP)血清水平，评估这些脂肪因子与NAFLD患者IL-6和CRP的关系。

资料与方法

一、研究对象

2014年3月至2019年3月在河南科技大学第一附属医院消化科门诊和病房诊断的NAFLD患者，均符合NAFLD的诊断标准。入选标准：NAFLD诊断标准参照2010年中华医学会肝脏病学分会《非酒精性脂肪性肝病诊疗指南》[4]。入选患者由3名固定的、有经验的高年资医生讨论通过。

138名NAFLD患者(NAFLD组)：53名男性，85名女性，年龄35～50岁，平均年龄(43.8±6.1)岁；选择同期健康体检者，肝功能正常、经B型超声检查无脂肪肝症状，且无饮酒史或饮酒折合乙醇量符合纳入或排除标准的人群作为对照组。129名健康无NAFLD者为对照组：50名男性，79名女性，年龄35～51岁，平均年龄(42.7±7.5)岁。两组年龄、性别无统计学差异。本研究经河南科技大学第一附属医院伦理委员会审批通过(批号：20140208)，所有研究对象均签署知情同意书。

二、研究方法

所有入选的对象均记录性别、年龄、身高、体质量、腰围，腰围有固定人员应用非弹性软尺测量，测量位置在髂前上嵴与最低肋骨连线中点处，检测空腹(空腹12 h)血脂、血糖,抽血待查CRP、IL-6及omentin-1、vaspin的水平。

(一)肝脏B超检查 由固定的、有经验的超声医师应用Elegra-Siemens公司(德国)的B超仪扇形探头(3.5～5.0 MHz)进行检查。参照《非酒精性脂肪性肝病诊疗指南》中NAFLD的B超诊断标准进行诊断[4]。

(二)血生化参数的检测 于上午8时空腹采取静脉血查血糖(FBG)、总胆固醇(TCH)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)，均在本院临床检验中心采用全自动生化分析仪(美国,型号：BHBMD1600)检测。

(三)测定CRP、IL-6 抽取肘静脉血4 mL，注入干燥试管，4 ℃，3 000 r/min离心15 min，分离血浆-80 ℃保存待测CRP、IL-6,高灵敏度浊度法测定，单位mg/L。

(四)omentin-1、vaspin的测量 抽肘静脉血8 mL，注入加有10%乙二胺乙酸二钠30 μL及抑肽酶40 μL抗凝剂的试管中，混均，4 ℃，3 000 r/min离心15 min，分离血浆-80 ℃保存，待测omentin-1、vaspin。通过酶联免疫吸附法(ELISA)测量(上海晶天生物科技有限公司)，单位均为ng/mL，严格按照操作说明书进行。

三、统计学处理

结 果

一、临床特征

NAFLD组和对照组比较，腰围(WC)、体质指数(BMI)、空腹血糖、胆固醇、LDL-C、TG差异有统计学意义(均P<0.05)。年龄、性别、HDL-C、ALT、AST差异没有明显统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 NAFLD组和对照组临床特征比较

二、两组IL-6、CRP、omentin-1和vaspin的比较

NAFLD组IL-6(117±8.2)高于对照组(103±9.1)，差异有统计学意义(P=0.01)，NAFLD组CRP中位数(四分位间距)为3.1(1.0～9.3)mg/L，显著高于对照组1.1(1.0～6.9)mg/L；omentin-1中位数(四分位间距)1.6(0.5～7.5)ng/mL低于对照组2.8(0.4～7.5)ng/mL；vaspin水平中位数(四分位间距)2.1(0.7～6.3)ng/dL高于1.0(0.2～7.3)ng/dL，差异均有统计学意义(Z值-2.935～-1.605，P值0.003～0.03)。详见表2。

表2 两组IL-6、CRP、omentin-1和vaspin的比较[中位数(四分位间距)]

三、相关分析

Vaspin水平分别与腰围、LDL-C、CRP、IL-6成正比(r值分别为0.335，0.231，0.341，0.285，均P<0.05)；与HDL-C、omentin-1呈负相关(r值分别为-0.221，-0.246，均P<0.05)。血清omentin-1水平与腰围、CRP、IL-6呈负相关(r值为别-0.250，-0.238，-0.319，均P<0.05)，与HDL-C呈正相关(r=0.326，P<0.05)。

四、Logistic回归分析

NAFLD为因变量，以omentin-1、vaspin、腰围、BMI、空腹血糖、总胆固醇、HDL-C、LDL-C、CRP、IL-6为自变量进行Logistic回归分析，结果表明omentin-1、vaspin、腰围、CRP、IL-6为患者发生NAFLD的独立相关因素[β值分别为1.896，1.471，2.012,2.971,1.984,2.0982,OR值(1.021～3.012)，95%CI(1.431～4.979)，均P<0.05]。

讨 论

本研究探索了NAFLD患者omentin-1、vaspin血清水平，并与健康组对照研究，评估了这些脂肪因子与患者的IL-6、CRP关系。

研究认为，NAFLD是代谢综合征的组成部分，转氨酶检测正常的NAFLD，是NAFLD的早期阶段，与胰岛素抵抗合并的糖脂代谢紊乱密切相关[5]。本实验中，NAFLD组与正常对照组比较，体质指数、腰围、空腹血糖、三酰甘油、总胆固醇、LDL-C的差异有统计学意义，HDL-C、ALT、AST差异没有明显统计学意义，也支持上述观点。

研究显示，omentin-1与肥胖、IR等代谢紊乱呈负相关性[3.6]。Omentin-1通过抑制胞外调节蛋白激酶/NF-κB通路活性，降低炎症细胞诱导的内皮黏附分子的表达。因此，omentin-1还具有抗炎，抗动脉粥样硬化作用[7]。本研究发现，NAFLD组与对照组相比，omentin-1较低，差异有统计学意义。血清omentin-1水平与腰围、CRP、IL-6呈负相关，与HDL-C呈正相关，腰围、IL-6、CRP是omentin-1水平下降的影响因素，HDL-C是omentin-1水平升高的危险因素，也符合上述观点。国外研究[8]报道omentin-1与NAFLD的发生密切相关，是NAFLD的独立危险因素，与本研究发现omentin-1是NAFLD发生的独立危险因素相一致。本研究发现血清omentin-1水平与BMI无关，omentin-1与腰围呈负相关，表明在表述身体脂肪分布方面，腰围比BMI可能更好些。Omentin-1的血清水平与NAFLD患者的HDL-C水平呈正相关，提示omentin-1可能是NAFLD发生的保护因素。

对经肝穿刺证实的NAFLD患者研究发现，血清vaspin水平明显升高，是NAFLD患者肝细胞纤维化程度的独立预测因素[9-10]。血清vaspin水平升高，且vaspin水平与超声诊断下的肝脏脂肪变性严重程度及肝内脂肪含量呈正相关[11]。本研究中，与健康对照受试者相比，NAFLD患者的vaspin浓度更高。血清vaspin与腰围和LDL呈正相关。Vaspin是NAFLD的独立危险因素，说明vaspin可能是NAFLD发生的预测因子。

IL-6可诱导肝脏合成CRP，还可刺激肝脏分泌极低密度脂蛋白，导致高三酰甘油血症，TNF-α和IL-6可参与调节其他脂肪因子的分泌[6，12]。本研究发现vaspin分别和IL-6、CRP呈正相关，omentin-1与CRP、IL-6 呈负相关，说明了NAFLD可能与慢性炎症有关。推测omentin-1、vaspin在NAFLD患者体内表达可能受到IL-6、CRP炎症因子的影响。随着人脂肪含量(尤其是内脏脂肪含量)增多，游离脂肪酸脂解增强，TNF-α、IL-6、CRP等炎症因子表达增强，致使机体处于慢性炎症状态，omentin-1表达由于受到炎症因子的抑制，其表达水平降低，抗炎作用减弱，致使机体慢性炎症持续存在，并逐渐加重，进而促进NAFLD的发生,而vaspin则因为炎症因子的作用，表达增加，促进了NAFLD的发生[13]。

NAFLD患者omentin-1、vaspin、IL-6、CRP和健康组不同。Vaspin可能是NAFLD发生的预测因子，而omentin-1可能是预防NAFLD发生的保护性因子。其机制可能与炎症因子有关，具体机制需进一步研究。