浓缩生长因子（CGF）联合Lux1540nm 非剥脱点阵激光治疗痤疮的临床疗效观察

龚 慧，王文平，张文红，朱宇轩，张弘沛，田 怡*

（重庆医科大学附属第二医院整形美容中心，重庆 400010）

痤疮是一种慢性炎症性皮肤病，发病率高且部分愈后伴有凹陷性瘢痕，治疗不及时会造成对外观的影响，致使患者焦虑和抑郁[1]。近年来有研究表明，Lux1540nm非剥脱点阵激光因其治疗效果良好、创伤小、愈合快等优点成为痤疮的常用光电治疗手段之一[2]。但亚洲人群仍易产生色素沉着、毛细血管扩张、热损伤、红斑等皮肤反应[3]。有研究显示初代血小板制品富血小板血浆（Platelet-rich plasma,PRP）治疗痤疮效果显著[4-5]，且与CO2激光联合应用可降低红斑指数，明显提高患者满意度和皮肤弹性[6]。浓缩生长因子（Cocentrated growth factors,CGF）作为第三代人体血小板制品与PRP相比富含更多的生长因子，在促进细胞增殖、分化方面效应更加明显[7]。因此，我们采用CGF与Lux1540nm非剥脱点阵激光联合应用治疗痤疮并观察其有效性和安全性。

1 资料与方法

1.1 临床资料

回顾性分析重庆医科大学附属第二医院整形美容科2018年1月至2020年1月收治的67例痤疮患者的临床资料，根据采用的治疗方法分为观察组：浓缩生长因子（CGF）注射联合Lux1540nm非剥脱点阵激光治疗组（34例）；对照组：单纯应用Lux1540nm非剥脱点阵激光治疗组（33例）。纳入标准：①符合Pillsbury严重程度分类法：Ⅱ度炎性丘疹痤疮、Ⅲ度脓疱型痤疮诊断者[8]；②凹陷性痤疮瘢痕患者。排除标准：①无法耐受点阵激光治疗者；②患血液性疾病、凝血功能异常者。③近半年内曾系统接受过痤疮药物或其他疗法治疗者，如3个月内有口服或外用维A 酸类、糖皮质激素类及外用不合格化妆品史者;半年内面部行填充剂注射及化学剥脱者；⑤孕期、哺乳期及长期服用避孕药或止血药如氨甲环酸者；⑥合并糖尿病、肝肾功能异常者。

观察组入选34例，男27例，女7例，年龄11～32（21.67±4.77）岁，病程1～6(3.491.30)年。对照组入选33例，男25例，女8例，年龄15～30（22.04±3.87）岁，病程1～7(3.59±1.42)年。两组性别（χ2=0.000，P=1.000）、年龄（t=-0.348,P=0.729）、病程(t=-0.301,P=0.765)相比，差异均无统计学意义（P＞0.05）,具有可比性。所有患者自愿参加本研究，了解本研究的目的、治疗过程、可能出现的不良反应，均已签署知情同意书，同意静脉抽血,留取照片及进行无创性皮肤检测。

1.2 药品及器械

5%利多卡因乳膏（同方药业集团有限公司）；Lux 1540TM灯泵钳玻璃激光期微透镜阵列治疗仪（美国Palomar公司）；Medifuge200离心机及APAG加热仪（意大利Silfradent公司）；9ml容量的绿色管帽Vacuette真空负压采血管（含肝素钠）；德玛莎第1代水光注射仪（北京飞嘉科技有限公司）；VISIA皮肤检测仪（美国 Canfield®公司）。

1.3 治疗方法

每次治疗前后，由固定人员用同一相机在同一光源和角度下进行拍照存档，使用 VISIA 数字皮肤分析仪对患者脸部进行拍摄并进行自动数据分析，在痤疮治疗区域外敷5%复方利多卡因软膏表面麻醉 1h，治疗前用温水彻底洗净麻药及皮肤油脂，常规消毒、铺单。

1.3.1 Lux1540nm 非剥脱点阵激光治疗参数

根据皮肤类型及痤疮分级，治疗要从低能量开始逐步增加能量，避免造成不良反应影响治疗后皮肤恢复[9]。能量参数的选择应基于患者皮肤状态、痤疮及瘢痕严重程度以及治疗中皮肤是否发红、肿胀突起等因素进行调整。脉冲宽度为10～15ms，能量为40～50J/cm2，光斑为10mm2，重叠面积为10%～20%，将治疗手具垂直紧贴皮面，于痤疮治疗区自上而下，均匀扫描2～3次，治疗终点为皮肤发红或起风团。每次治疗间隔4周，6次为一个疗程，疗程后随访6个月。

1.3.2 CGF 的制备及联合Lux1540nm 激光的治疗参数

采血量为2管，每个Vacuette真空负压采血管（9ml）里的血液经Medifuge 200离心机变速离心13分钟后分为三层：最上层为贫血小板血浆（Platelet poor plasma，PPP）层，约2ml；中层为CGF液、白膜（CD34细胞及白细胞）层，约2.5ml；最下层为红细胞层，该层一般弃去不用[10]。抽取CGF液、白膜层时需用注射器针头拨动白膜，便于抽出。

2个采血管共可获得约5ml CGF液和4mlPPP。CGF液（4ml）的注射：将3ml CGF液通过德玛莎水光注射仪注射在全面部痤疮区域表皮深层。德玛莎水光注射仪：针长0.5-1.2mm，模式Dose、Very fast，负压30%，定点给药量0.0179 -0.0208cc，注射点间隔2mm。剩余1ml CGF液用1ml注射器通过30G针头注射于痤疮区域真皮浅层。

APAG混合物（5ml）的注射：将4ml PPP放入加热装置中，设置75℃加热18min后取出，PPP蛋白变性呈凝胶态，室温冷却约15min后用三通管将4ml PPP凝胶和1mlCGF液混匀，获得活性血浆蛋白凝胶(Activated plasma albumin gel,APAG)混合物[11]。用1ml注射器将APAG注射于痤疮区域真皮深层或痤疮瘢痕内。每次激光治疗后15天进行一次CGF治疗，时间间隔同上。

1.4 术后护理

CGF注射后，常规给予可复美修复面膜冰敷20min，24h可以洗脸，48h内禁用功能性化妆品。激光治疗后，若因能量过大引起水疱、红斑，可加敷冰袋，但需密切观察皮肤状况，避免出现冻伤。治疗期间严格物理防晒，患者报告红斑持续时间、针眼淤青时间及其他术后反应。

1.5 评价方法

临床疗效评定方法：每次治疗前，由专人负责拍照并记录炎性皮疹（红斑、丘疹、脓疱、囊肿、结节、瘢痕）和非炎性皮疹（白头粉刺、黑头粉刺）的数量[12]。于3次治疗结束后1个月末观察患者皮损改变情况，对比治疗前后的皮损总数。皮损消退率=（治疗前总数量-治疗后总数量）/治疗前总数量×100%。皮损消退率≥ 90%为痊愈，60%～89%为显效，20%～59%为好转，＜ 20%为无效[1]。

采用VISIA 数字皮肤分析仪对患者脸部进行拍摄并进行自动数据分析，记录并比较两组治疗前后毛孔与纹理 VISIA分值，皮肤状态改善程度与数值大小成正比[13]。在拍摄时需做到面部叠影重合；无遮挡及覆盖，完整显现额部及双侧脸颊；面部表情维持自然平静。采用皮肤病生活质量指数（Dermatology Life Quality Index,DLQI）量表评价两组患者主观感受，主要针对日常活动、症状、感受情况等3 项指标进行评估，患者生活质量改善与分值大小成反比[14]。记录两组患者水疱、红斑、出血、感染、皮肤色素沉着或减退、脱屑、结痂或加重炎症痤疮皮损等不良反应，针对症状做出相应的积极处理。

1.6 统计学方法

采用 SPSS 19.0 软件进行数据处理，计数资料用[n(%)]表示，计量资料采用均值±标准差() 表示。连续变量的组间比较、正态分布及方差齐性数据采用单因素方差分析（one-way ANOVA），两两比较采用LSD-t检验；率或构成比的组间比较采用列联表分析法。在α=0.05的检验水准上，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 临床疗效

观察组患者痤疮症状显著改善，丘疹及脓疱等炎症反应消失，色素沉着改善，皮肤细腻，皱纹减轻，治疗后整体情况稳定。对照组患者丘疹及脓疱症状改善轻微，肤质无明显改善。见图1。

图1 痤疮患者浓缩生长因子（CGF）联合Lux1540nm 激光治疗后面部皮肤改善情况

观察组总有效率（94.11%）显著高于对照组（75.76%），经χ2检验，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05），详见表1。

表1 两组患者疗效比较n(%)

2.2 毛孔与纹理的VISIA 值评分

两组纹理与毛孔VISIA评分显示，治疗前，两组差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，观察组纹理与毛孔 VISIA 评分均显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表2。

表2 两组VLQ、FSFI 评分的对比（分）

2.3 皮肤病生活质量评分（DLQI）值评价

两组患者皮肤病生活质量评分显示，治疗前，两组日常活动、症状、感受情况评分均基本一致，差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后，观察组患者上述皮肤病生活质量评分均明显低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表 3。

表3 两组患者皮肤病生活质量评分比较（ ）

表3 两组患者皮肤病生活质量评分比较（ ）

2.4 不良反应

两组患者中,观察组有1例患者出现针孔周围皮肤红肿，1例注射后针孔周围皮下淤血，未作任何换药处置，于治疗后1天自行消退。对照组出现4例治疗后色素改变加重，1例皮肤脱屑，2例红斑加重，皮肤灼热伴针刺感，给予冷喷治疗后症状缓解,。两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

痤疮的治疗既往常应用抗菌药物、维A酸类或抗雄激素、糖皮质激素等，需要严格在医生的指导下进行，自行使用或滥用药物会出现胃肠道反应、药疹、肝损害、色素沉着、过敏性皮炎，激素性皮炎等问题，且激素用药剂量受限，无法长期使用[15]。近年来开始采用光电治疗，Lux1540nm非剥脱点阵激光效果良好，但存在色素沉着、毛细血管扩张、红斑、水肿等不良反应[16]。由于对皮肤组织的热损伤，临床应用Lux1540nm非剥脱点阵激光时选择的能量较低，往往需要经过多次治疗，疗效有限且治疗周期长[17]。目前针对激光治疗后热损伤造成的应激反应，尚无特别有效的缓解或避免办法。临床上虽然采用冰袋、水凝胶敷料冷敷及外涂重组人表皮生长因子等辅助治疗，减少了激光对皮肤的热损伤，但依然容易出现较长时间的灼热痛、针刺感，还存在起效慢、需长期使用、药物包含外来成分可能引起排异等问题[18]。

本研究发现：观察组总有效率（94.11%）显著高于对照组（75.76%），差异有统计学意义（P＜0.05）。由此可以认为CGF联合Lux1540nm非剥脱点阵激光治疗痤疮效果优于单独应用Lux1540nm非剥脱点阵激光。这是因为对于中重度痤疮，为达到较好的治疗目的，Lux1540nm非剥脱点阵激光的治疗能量往往较大，导致皮肤受到的热损伤可能超出周围正常组织的代谢能力范围。特别是对于严重痤疮伴易激惹皮肤的患者，恢复时间将大大延长，还可能伴有一系列的创面反应。皮肤创面愈合是一个连续复杂的过程，包括凝血、炎症反应、生成肉芽组织以及上皮再生等步骤[19]。因此，单纯通过Lux1540nm非剥脱点阵激光不足以修复皮肤损伤，此时引入CGF将大大提高治疗效果，缩短恢复时间。这是因为CGF中含有高浓度的血小板，通过变速离心，血小板相互碰撞裂解出α颗粒，能促使机体大量、快速释放成纤维细胞生长因子（Fibroblast growth factor，FGF）、血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）、表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)、血小板衍生因子(Platelet derived growth factor,PDGF)、转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)等多种生长因子，对内源性生长因子进行补充，加速创面愈合机制的启动及运作，促进创面恢复[20]。血小板裂解后还能释放一系列有效的抗菌肽、白介素-1受体拮抗、干扰素γ多种细胞因子，可强化白细胞杀菌作用，抑制痤疮丙酸杆菌和金黄色葡萄球菌的增殖[21-23]。这种抗炎作用能有效避免治疗后皮肤修复期间再次由于毛囊炎症引发痤疮，大大降低了复发率。CGF中包含的CD34还能促进毛囊自身的修复，降低了由于毛囊阻塞导致皮脂排除受阻的发生率[24]。通过联合CGF与治疗痤疮，不仅能够促进痤疮皮损的创面愈合和组织的再生修复，还能减轻Lux1540nm非剥脱点阵激光带来的过重的热损伤，缓解激光治疗的副作用，缩短恢复期。

除了上述优点之外，观察组疗效高、热损伤小，在改善毛孔、皮纹、缓解痤疮瘢痕方面均显著优于对照组，以上差异均有统计学意义（P＜0.05）。这是因为Lux1540nm非剥脱点阵激光改善凹陷性瘢痕需要依赖皮肤自身的修复机制，通常在治疗开始后1个月效果才开始显现，半年时间内需经多次治疗后效果才能达到维持稳定。而CGF对于陈旧性痤疮瘢痕，特别是凹陷性痤疮瘢痕来说，有特别的填充效果。注射时，先用针头在瘢痕内打出隧道，将APAG注射到瘢痕凹陷处。APAG呈凝胶态，本身就有一定的支撑力，加上针头的物理刺激可以松解瘢痕组织，造成的微损伤亦可加速组织再生。APAG混合物中大量的纤维蛋白可产生合适的三维结构，为细胞的生长提供良好的框架[25]。框架中的生长因子缓慢释放，有效作用时间延长，可加速局部新陈代谢及创面修复，进一步帮助皮肤再生，形成健康的纹理及毛孔，以此替代瘢痕组织[26]。抗炎因子能控制感染及炎性反应，保护创伤部位的组织与细胞，进而减少了患者创面的炎性渗出及红肿，避免由于炎症反应产生新的痤疮瘢痕[27]。有研究显示，皮肤受损后越早应用CGF进行治疗，表皮的再生效果越好[28]，与本研究中观察组患者组织修复再生更快，恢复效果更好的情况一致。因此，CGF能够使激光治疗恢复期缩短，帮助患者减少停工时间，更快投入到正常工作及生活当中。CGF安全性高，它是利用自身血液提炼的富含高浓度生长因子的血清，无外来物质干扰，不会引起自身排异反应、产生毒副作用或耐药性。制备方面，30分钟即可获得CGF，时间短，过程简单、耗材少、成本低，患者易于接受。有研究表明利用CGF进行多例下睑区、鼻唇沟及口周细纹填充，安全有效[11,29]。

我们在选择75℃条件下将CGF液加热18min之前做了相关预实验，分别设置25℃、50℃、75℃及6min、12min、18min的加热温度梯度及时间梯度，发现加热6min、12min时获得的APAG与18min相比更易造成皮下淤青、发黄。考虑可能是因为APAG中尚存有活性的血小板可能在局部产生铁血黄素沉积，特别是在皮肤菲薄处或在皮肤浅层注射时出现，会在一定时间内影响美观。因此我们选择了75℃加热18min的设定模式，将APAG胶与CGF液按照1：4的比例进行混合，皮肤淤青发黄的情况明显改善。另外，对照组少数患者随访至半年时病情有轻微反复，考虑可能多因生活作息时间不规律导致，如常吃油腻食物、多次大量饮酒等因素。由于部分患者在接受治疗前病程时间过长，病情反复，在治疗后皮肤深层可能仍残留痤疮丙酸杆菌，对于极个别严重患者，应辅助清痘治疗或酌情增加疗程，以保证在前次疗程的基础上能够维持效果或产生叠加效应。鉴于观察组患者极少复发，说明CGF联合Lux1540nm非剥脱点阵激光治疗效果确切，能从根本上改善局部皮肤代谢状态。个别患者因长期慢性炎症导致皮损部位皮肤增厚，在单用Lux1540nm非剥脱点阵激光治疗时，如酌情增加能量至60J，可以增加治疗深度，增大治疗范围，此时联用CGF，可避免造成皮肤过度激惹。在未来的治疗中，希望能够将CGF作为激光治疗的常用搭配，能够保证在高能量激光治疗的同时，使皮肤在最短时间内进行自身修复，减轻高能量治疗造成的副作用。

综上所述，CGF联合Lux1540nm非剥脱点阵激光治疗痤疮及痤疮凹陷瘢痕疗效显著，还能缓解由Lux1540nm非剥脱点阵激光导致的皮肤激惹症状，明显改善肤质，治疗后恢复快、安全可靠、患者满意度高，值得作为痤疮治疗的新思路在临床上进一步推广应用。