载脂蛋白Eε等位基因与癫痫患者认知功能的关系

韩雨薇 王晨辰 袁冠前 梁国标 李晓明

北部战区总医院，辽宁 沈阳 110016

癫痫是大脑神经元异常放电导致大脑功能障碍的一种慢性神经系统疾病，中国现有癫痫患者近千万［1］。癫痫反复发作易引起脑白质结构改变，导致患者出现不同程度的认知功能障碍［2］。认知障碍是癫痫最常见的并发症，约80%的癫痫患者存在认知功能障碍，临床主要表现为注意力下降、记忆力减退、语言障碍、视觉感知缺失等，严重影响患者的生活质量［3-5］。找到影响癫痫患者认知障碍的可能危险因素并及时做出早期临床干预，提高其诊断率和治疗率尤为重要。癫痫发作是神经元异常和快速放电引起的，这与发育异常、抑制性和兴奋性神经递质之间的平衡紊乱或细胞外K+水平的改变有关。载脂蛋白E（apolipoprotein E，APOE）参与这些过程的调控，在癫痫发作中起关键作用［6］。APOE基因多态性与认知功能减退密切相关，在老年人群和帕金森病患者中APOE*ε4等位基因携带者认知功能方面的表现比非携带者差［7-9］。APOE等位基因与癫痫患者认知功能的相关性方面仍缺乏研究。

本研究通过检测癫痫患者的APOE 基因表型和认知功能评分，探讨APOE等位基因对癫痫患者认知功能的影响，为临床治疗提供依据，从而改善癫痫患者的生活质量。

1 资料与方法

1.1 一般资料纳入2021-01—2022-07 在中国人民解放军北部战区总医院神经外科就诊并确诊的癫痫患者。纳入标准：根据体格检查、临床评估包括脑电图、MRI 和详细病史确诊为癫痫。排除标准：（1）恶性肿瘤、甲状腺或甲状旁腺疾病、肝或肾衰竭等严重身体疾病者；（2）有创伤性脑损伤、脑肿瘤、脑血管病等神经系统疾病者；（3）酗酒或服用影响情绪或神经系统的药物者；（4）癫痫发病前已有认知功能障碍者；（5）认知功能评估不完整者。共纳入72例癫痫患者，男46例，女26例，年龄16～60岁。本研究通过中国人民解放军北部战区总医院伦理委员会批准（2021-135号），并获得所有参与者知情同意。

1.2 APOE 基因分型收集患者外周静脉血（含EDTA 抗凝管），充分混匀后分装保存于—20 ℃冰箱中。使用APOE基因检测试剂盒（上海Baio技术有限公司，中国上海），PCR 扩增操作过程严格按照试剂盒说明书进行。将基因扩增产物孵育在基因芯片上，经Baio R-Hyb全自动杂交仪（上海Baio技术有限公司，中国上海）进行杂交显色反应，BaiO BE-2.0基因芯片读取器（上海Baio 技术有限公司，中国上海）进行基因分型分析。

1.3 认知功能评估所有研究对象均应用修订版Addenbrooke 认知评估量表（Addenbrooke cognitive examination，ACE-R）评估认知功能。该量表涵盖6个认知领域的评估，包括定位和注意力（18分）、记忆力（26分）、语言流利度（14分）、语言（26分）、视觉空间和感知能力（16 分），共21 项认知测试，总分100分。评分越高表示认知功能越好。

1.4 统计学分析使用SPSS 22.0 软件进行统计分析。计量资料数据采用均数±标准差（±s）表示，进行t检验。APOE基因频率和等位基因频率等计数资料各组比较采用χ2检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 APOE基因分布频率共检测72例癫痫患者外周血APOE 基因分型、APOE 等位基因和基因型分布频率，分布6 种基因型，分别为ε2/ε2、ε2/ε3、ε2/ε4、ε 3/ε3、ε3/ε4、ε4/ε4，其中ε3/ε3 是最常见的基因型，为32 例，占51.39%，其次是ε3/ε4 基因型，为20 例，占27.78%。ε2/ε2（2 例）和ε2/ε4（1 例）基因表型较少，分别占2.78%和1.39%。APOE*ε3 是最常见的等位基因，所占频率为70.83%，其次是APOE*ε4 等位基因，所占频率为20.14%。见表1。

表1 APOE基因型及等位基因分布频率 ［例（%）］Table 1 APOE genotype and allele distribution frequency［n（%）］

2.2 2组患者基本资料比较APOE*ε2、ε3、ε4各等位基因携带者与非携带者进行临床资料比较，结果显示，在性别、年龄、发病年龄、病程、婚姻情况方面，APOE*ε2、ε3、ε4各等位基因携带者与非携带者比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2～4。

表2 APOE*ε2等位基因与癫痫患者基本资料的分析Table 2 Analysis of APOE*ε2 allele and basic data of epilepsy patients

表3 APOE*ε3等位基因与癫痫患者基本资料分析Table 3 Analysis of APOE*ε3 allele and basic data of epilepsy patients

表4 APOE*ε4等位基因与癫痫患者基本资料分析Table 4 Analysis of APOE*ε4 allele and basic data of epilepsy patients

2.3 APOE*ε2、ε3、ε4 等位基因与认知功能障碍的关系比较APOE 不同等位基因对癫痫患者的认知功能的影响（表5），结果显示，APOE*ε2或ε3等位基因携带者与非携带者ACE-R 认知功能评分差异无统计学意义（均P＞0.05），而APOE*ε4 等位基因携带者的ACE-R 认知功能评分显著低于APOE*ε4 等位基因非携带者，差异有统计学意义（P＜0.05）。本研究人群中携带ε4 等位基因的癫痫患者ACE-R 认知功能评分最低，其次是ε3和ε2等位基因，但差异均无统计学意义（P＞0.05），见表6。

表5 APOE*ε2、ε3、ε4等位基因与癫痫患者认知功能的关系Table 5 Association of APOE*ε2，ε3，ε4 alleles with cognitive function in patients with epilepsy

表6 APOE*ε2、ε3、ε4等位基因与癫痫患者认知功能的关系 （±s）Table 6 Association of APOE*ε2，ε3，ε4 alleles with cognitive function in epilepsy patients （±s）

表6 APOE*ε2、ε3、ε4等位基因与癫痫患者认知功能的关系 （±s）Table 6 Association of APOE*ε2，ε3，ε4 alleles with cognitive function in epilepsy patients （±s）

量表ACE-R ε2携带者（n=11）86.45±8.99 ε3携带者（n=63）83.21±12.83 ε4携带者（n=29）78.24±12.25 F值2.363 P值0.099

3 讨论

认知障碍在癫痫起病初期已存在，约80%的癫痫患者存在注意力、记忆力和语言等认知损害［10-15］，临床治疗时应提高对癫痫患者认知功能的关注。APOE 是一种参与全身脂质运输和代谢的糖蛋白，包含3种蛋白亚型ε2、ε3和ε4［11，16-20］。存在APOE*ε4等位基因时，大脑修复损伤和形成新突触的能力受损［12-13，21-26］，这是由于APOE*ε等位基因促进脑组织中β淀粉样蛋白（β-amyloid，Aβ）的沉积，而大脑中高表达的Aβ可导致癫痫样活动和认知障碍［14-15，27-32］。GOURAS等［16］报道APOE*ε4等位基因促进癫痫患者脑内Aβ的累积。APOE基因型与老年人群和帕金森患者的认知功能障碍相关，APOE*ε4 等位基因携带者认知功能与非携带者之间存在显著差异［7，9，33-40］。目前APOE 基因型与癫痫患者认知功能的相关性方面还缺乏研究。

本研究利用基因芯片杂交技术对72例癫痫患者进行基因型和等位基因分布的分析，并运用修订版Addenbrooke 量表评估患者认知功能。患者的基本资料，如性别、年龄、发病年龄、病程和婚姻情况在APOE*ε2、ε3 和ε4 等位基因分布频率无统计学差异。APOE 3 种等位基因中唯有ε4 等位基因与癫痫患者认知功能相关，携带ε4 等位基因的癫痫患者比非携带者的认知功能差，APOE 3种等位基因中携带ε4 等位基因的癫痫患者认知功能评分最低，表明APOE*ε4等位基因对癫痫患者认知功能具有显著影响［41-45］。由于研究的人群样本量较小，具有一定的局限性，还需要更大样本量验证APOE*ε4 等位基因与癫痫患者认知功能的关系。

APOE*ε4等位基因携带与否与癫痫患者认知功能有相关性［46-50］，携带APOE*ε4 等位基因的癫痫患者认知功能比非携带患者更差。APOE*ε4等位基因可作为判断癫痫患者认知障碍的危险因素，为临床上尽早评估癫痫患者的认知状况并及早进行临床干预，最大程度减少认知损害提供依据。