2018—2020年新疆地区肥育猪主要病毒性传染病的抗体检测与分析

常军帅，程露露，杨盛源，屈勇刚，梁 晏，李 娜，陈 宁，党瑞莹，邱国斌

（1.石河子大学动物科技学院，新疆 石河子 832003；2.动物疾病防控兵团重点实验室，新疆 石河子 832003；3.第四师畜牧兽医站，新疆 可克达拉 831304）

肥育猪通常指体重30 kg以上的商品猪群，可细分为肥育前期（30～60 kg）和肥育后期（60 kg以上）[1]。肥育猪是生猪养殖的最后阶段，要想获得更高的经济效益，就要提高存活率，降低料重比，用最短的时间、最低的成本来完成肥育猪的饲养过程。该阶段猪群的消化系统、免疫系统逐渐完善，对疾病的抵抗力也在不断增强。肥育猪患病后死亡率低，但造成的料重比增高，严重影响了猪场的经济效益，并且患病猪长期向外排毒，威胁其他猪群健康。在生产中，危害肥育猪健康的主要为病毒性传染病：伪狂犬病（Pseudorabies，PR），其病原体为伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus, PRV），肥育猪患病后只有轻微的呼吸系统症状，体温略有升高，2～3 d可自愈，经常被误诊为猪流感，患病猪长期向外排毒[2]；猪圆环病毒病（Porcine circovirus diseases,PCVD），主要是由猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2, PCV2）引起，通过感染肥育猪淋巴结，降低机体免疫系统，感染PCVD后常继发其他疾病或加重已患病的临床症状，严重影响了疫苗免疫效果；猪繁殖与呼吸综合征（PRRS），其主要特点是导致呼吸道疾病和繁殖障碍，其病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV），肥育猪患病呈一过性反应，临床可见呼吸急促、咳嗽、腹泻、体温升高等症状，采食量减少，料重比增高[3]；猪瘟（Classical swine fever, CSF） ，是由猪瘟病毒（Classical swine fever virus, CSFV）引起的一种急性、热性和高度接触性传染病，世界动物卫生组织（Office International Des Epizooties, OIE）将CSF列为必须上报的动物疫病，我国将其列为一类动物疫病，肥育猪患病后高烧不退、便秘、皮肤呈出血点，实质性器官发生病变[4]。因此，为预防各种病毒性传染病带来的危害，生产中常采用疫苗免疫来保障猪群健康。

为监测猪群抗体水平，以便定期调整免疫程序，生产中常采用酶联免疫吸附法（ELISA）进行抗体检测。该方法具有很高的特异性和灵敏度，可在短时间内大批量检测血清样品，已被列为标准方法，在许多国家使用[4]。本试验采用ELISA方法对采集到的216份肥育猪血清进行了PRV-gB、PRV-gE、PCV2、PRRSV、CSFV的抗体检测，以期为该区的肥育猪的健康养殖提供帮助。

1 材料

1.1 样品

2018年1月至2020年12月期间从新疆石河子市、巴音郭楞蒙古自治州、伊犁、塔城地区、奎屯市、阿克苏市，随机采集肥育猪216份血清样品，送至石河子大学动物科技学院传染病实验室进行检测。

1.2 材料和仪器

猪瘟病毒（CSFV）ELISA抗体检测试剂盒、猪伪狂犬病病毒gB（PRV-gB）ELISA抗体检测试剂盒、蓝耳病病毒（PRRSV）ELISA抗体检测试剂盒、猪伪狂犬病病毒gE（PRV-gE）ELISA检测试剂盒均购自北京爱德士元亨生物科技有限公司；猪圆环病毒2型（PCV2）ELISA抗体检测试剂盒，购自哈尔滨元亨生物药业有限公司；兽用一次性采血器5 mL为美康实业有限公司产品；自动酶标仪、微量移液器购自赛默飞世尔科技公司。

2 方法

2.1 样品处理

将肥育猪固定好后，使用酒精棉球对前腔静脉窝消毒，采集5 mL血液，室温下斜置30 min，收集血清，放于4 ℃短期保存。

2.2 ELISA检测方法

根据不同检测项目的说明书，进行PRV-gB、PRV-gE、PCV2、PRRSV、CSFV的抗体检测。注意各个检测过程中的温度及避光要求。

2.3 结果判定

PRV-gB、PRV-gE：当阴性OD650平均值-阳性OD650平均值≥0.3时，试验成立。计算S/N。当S/N＞0.70时，为阴性；当0.60＜S/N≤0.70时，为可疑；当S/N≤0.60时，为阳性。

PCV2：试验成立的条件是阴性对照的OD450均值≤0.15，阳性对照OD450均值≥0.60。计算临界值，被检样品OD450值＜临界值，判定为抗体阴性；被检样品OD450值≥临界值，则判定为抗体阳性。

PRRSV：试验成立后，计算S/P值。S/P≥0.40为阳性，S/P＜0.40判为阴性。

CSFV：试验判定成立后，计算阻断率。当阻断率≤30%时，为阴性；当30%＜阻断率＜40%时，为可疑；当阻断率≥40%时，为阳性。

当出现可疑时，再次检测。不符合阳性标准，统一安排阴性处理（PRV-gE相反）。

2.4 数据分析

使用SPSS 20.0对数据进行统计分析，计算总体平均数。

3 结果

3.1 PRV-gB抗体检测结果

在2018—2020年中，新疆地区肥育猪整体PRV-gB抗体阳性率为90.68%（107/118），其中2018年、2019年、2020年的PRV-gB抗体阳性率分别是100.00%（40/40）、80.00%（28/35）、90.70%（39/43）；平均S/N值为0.24。结果见表1。

表1 不同年份的肥育猪PRV-gB抗体检测结果

3.2 PRV-gE抗体检测结果

在2018—2020年中，新疆地区肥育猪整体PRV-gE抗体阳性率为17.80%（21/118），其中2018年、2019年、2020年的PRV-gE抗体阳性率分别是12.50%（5/40）、11.43%（4/35）、27.91%（12/43）；平均S/N值为0.67。结果见表2。

表2 不同年份的肥育猪PRV-gE抗体检测结果

3.3 PCV2抗体检测结果

由表3可知，在2018—2020年中，新疆地区肥育猪整体PCV2抗体阳性率为90.22%（83/92），其中2018年、2019年、2020年的PCV2抗体阳性率分别是100.00%（9/9）、88.64%（39/44）、89.74%（35/39）。在平均OD450值中，2018年的最低，为1.40；2019年最高，为1.65。

表3 不同年份的肥育猪PCV2抗体检测结果

3.4 PRRSV抗体检测结果

由表4可知，在2018—2020年中，新疆地区肥育猪整体PRRSV抗体阳性率为84.26%（182/216），其中2018年、2019年、2020年的PRRSV抗体阳性率分别是100.00%（20/20）、100.00%（35/35）、78.88%（127/161）。在平均S/P值中，2020年的最低，为1.32；2019年最高，为3.12。

表4 不同年份的肥育猪PRRSV抗体检测结果

3.5 CSFV抗体检测结果

在2018—2020年中，新疆地区肥育猪整体CSFV抗体阳性率为85.34%（99/116），其中2018年、2019年、2020年的CSFV抗体阳性率分别是82.86%（29/35）、85.71%（30/35）、86.96%（40/46）。结果见表5。

表5 不同年份的肥育猪CSFV抗体检测结果

4 讨论与分析

4.1 肥育猪抗体整体分析

通过对2018—2020年新疆地区的肥育猪进行PRV、PCV2、PRRSV、CSFV的抗体检测得出，这4种病毒性传染病的抗体阳性率均超过了国家标准（70%），说明随着猪只日龄增大，免疫系统逐渐完善，疫苗的免疫产生较高的抗体水平，对猪群起到了保护作用，减少了料重比的增加[5]。

4.2 肥育猪PRV抗体分析

吕远蓉等[6]曾对四川省南充市规模化猪场的PRV-gB、PRV-gE抗体水平进行检测，肥育猪的阳性率分别为67.50%（135/200）和28.50%（57/200）；张利平等[7]得出河南省肥育猪群的PRV-gB、PRV-gE抗体阳性率分别为92.59%（625/675）和38.07%（257/675），新疆地区肥育猪的PRV-gE抗体阳性率为17.80%（21/118），均低于上述地方，可能是由于各地饲养管理、疫苗免疫程序等不同所致，PRV-gE抗体阳性则表示猪群中存在PRV感染，生产中需及时淘汰阳性病猪，定期检测，才可使猪场逐渐净化PRV。新疆地区肥育猪的PRV-gB抗体阳性率为90.68%（107/118），低于河南省却远高于四川省南充市，需结合PRV-gE检测结果来进行管理。

4.3 肥育猪PCV2抗体分析

在2018—2020年中，新疆地区肥育猪整体PCV2抗体阳性率为90.22%（83/92），免疫效果良好。PCV2为猪的免疫抑制性疾病，感染该病后常造成猪群免疫力下降，为其他病原入侵机体提供了机会。为提高免疫合格率，肥育猪还需科学饲养管理、做好日常清理工作、制定更合理的免疫程序、规范疫苗的储存及运输、正确选择和使用疫苗[8]。

4.4 肥育猪PRRSV抗体分析

虽然肥育猪整体PRRSV抗体阳性率为84.26%（182/216），但2019年PRRSV的平均S/P却高达3.12。ELISA抗体检测的缺点在于不能区分是疫苗或野毒感染造成肥育猪存在的抗体，生产中可针对S/P过高的样品进行抗原检测分析，减少病毒存在传播的机会[9]。

4.5 肥育猪CSFV抗体分析

在2018—2020年中，新疆地区肥育猪整体CSFV抗体阳性率分别是82.86%（29/35）、85.71%（30/35）、86.96%（40/46），呈逐步上升趋势，说明该地区对CSF免疫工作重视。范庆红[5]检测得出山东省莱州市肥育猪CSFV抗体阳性率为83.22%（119/143），与本次结果基本一致，说明这两地猪群得到了有效地保护。

4.6 肥育猪饲养管理措施

肥育猪科学饲养管理主要包括：在保育猪转至肥育圈舍分圈密度要适宜，每头猪最佳占地面积约1.6～2.0 m2；单个圈舍内猪只体重相差不超过5 kg；肥育猪怕热，饲养温度最好在18～22 ℃；定期驱虫，一般在90日龄和145日龄驱虫两次；注意空气流通，防止粪便堆积产生有害气体损坏猪群呼吸系统；定期清理粪便，按时消毒。肥育猪群只有科学饲养管理，才会对疫苗产生良好的抗体。