肺腺癌患者血清B7-H3、NKG2D的表达及其与化疗耐药性的关系

马丽敏，汪思颖

(许昌市人民医院 药学部，河南 许昌 461000)

培美曲塞联合顺铂(简称PP)作为肺腺癌的一线化疗方案，对肺腺癌治疗效果确切，可提升患者存活率[1]。但肿瘤细胞可对化疗药物产生耐药性，增加肺腺癌治疗难度，但化疗耐药仍是肺腺癌治疗失败的重要原因[2]。因此，探究与肺腺癌化疗耐药相关的因素十分重要。作为B7家族的新成员，共刺激分子(B7 homolog，B7-H3)具有重要的免疫调节功能，其在正常的细胞和组织中几乎不表达，在肺癌组织中呈高表达，且与肿瘤的发生发展及预后有关[3]。作为自然杀伤细胞(natural killer cell，NK)的活化性受体，自然杀伤细胞活化性受体2D(natural killer cell group 2D，NKG2D)已被研究证实与恶性肿瘤的发生发展有关[4]。结合上述B7-H3、NKG2D与肿瘤的关系，推测二者可能也与肺腺癌化疗耐药有关。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2018年3月至2019年3月于许昌市人民医院接受PP方案化疗的95例肺腺癌患者进行研究。(1)纳入标准：根据《现代肿瘤学》[6]中肺腺癌诊断标准确诊为肺腺癌；卡氏评分[7]>60分；预计生存期>6个月。(2)排除标准：接受其他治疗方案；合并严重心、肝、肾功能障碍；治疗期间病死或失访。

1.2 血清指标检测方法化疗前采集患者4 mL外周血，离心后取上清液，以酶联免疫吸附法检测B7-H3水平，采用流式细胞仪检测NKG2D水平。

1.3 PP化疗方案化疗前1周开始口服叶酸片(北京麦迪海药业有限责任公司，国药准字H11020317)(每日口服400 μg至化疗4周期结束后21 d)和注射维生素B12(江苏恒沣药业有限公司，国药准字H32020230)(每9周肌内注射1次，每次1 000 μg)。化疗前1 d、当天、后1 d，口服地塞米松片(三才石岐制药股份有限公司，国药准字H44024276)，每次4.5 mg，每日2次。化疗第1天，按照每平方米500 mg的剂量静脉滴注培美曲塞[Vianex S.A.(Plant C)，注册证号H20150445]，按照每平方米75 mg的剂量静脉滴注顺铂氯化钠注射液(贵州汉方制药有限公司，国药准字H20020273)，21 d为1个周期，共治疗4个周期。

1.4 化疗耐药和敏感评估方法治疗4个周期后随访1个月，根据NCCN非小细胞肺癌临床实践指南[8]评估化疗耐药与敏感情况。根据1.1版RECIST指南[9]评估疗效，完全缓解(complete response，CR)为病灶完全消失，且1个月内未出现复发；部分缓解(partial response，PR)为肿瘤最长径之和较治疗前缩小≥30%，且1个月内未继续增大；疾病稳定(stable disease，SD)为肿瘤最长径之和较治疗前缩小<30%，且1个月内为继续发展；疾病进展(progressive disease，PD)为出现新病灶或者肿瘤最长径增大程度≥20%。将CR和PR计入总有效，计算总有效率，纳入敏感组；其余为无效，纳入耐药组。

1.5 统计学方法采用SPSS 24.0统计软件处理数据。计量资料均经正态检验，偏态分布计量资料用中位数和四分位数[M(P25，P75)]表示，采用U检验比较；计数资料以频数和构成比表示，采用χ2检验。采用logistic回归分析血清B7-H3、NKG2D水平与肺腺癌患者PP化疗耐药性的关系，通过受试者工作特征(receiver operating characteristic，ROC)曲线和曲线下面积(area under curve，AUC)检验血清B7-H3、NKG2D水平预测肺腺癌患者PP化疗耐药的价值。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 耐药情况化疗4个周期后经1个月随访统计，95例肺腺癌患者中56例(58.95%)耐药，其中32例SD，24例PD；敏感患者39例(41.05%)，其中CR 0例，PR 39例。

2.2 基线资料和血清指标两组性别、年龄、TNM分期、疾病类型比较，差异无统计学意义(P>0.05)，耐药组血清B7-H3水平高于敏感组，NKG2D水平低于敏感组(P<0.05)。见表1。

表1 两组基线资料和血清指标比较

2.3 血清B7-H3、NKG2D水平与肺腺癌患者PP化疗耐药关系的logistic回归分析将2.2中差异有统计学意义的变量作为自变量(均为连续变量)，将肺腺癌患者的耐药情况作为因变量，logistic回归分析显示，血清B7-H3、NKG2D水平与肺腺癌患者PP化疗耐药有关(P<0.05)。见表2。

表2 血清B7-H3、NKG2D水平与肺腺癌患者PP化疗耐药关系的logistic回归分析结果

2.4 血清B7-H3、NKG2D水平预测肺腺癌患者PP化疗耐药的价值将肺腺癌患者的耐药情况作为状态变量，将化疗前血清B7-H3、NKG2D水平作为检验变量，绘制ROC曲线图，结果显示，化疗前血清B7-H3、NKG2D水平单独及联合预测肺腺癌患者PP化疗耐药的AUC分别为0.824、0.772、0.853，均有一定预测价值。见表3。

表3 血清B7-H3、NKG2D水平预测肺腺癌患者PP化疗耐药的价值

3 讨论

多数肺癌患者在就诊时已发展为晚期，治疗方案以化疗为主[10]。PP化疗方案已被证实对肺腺癌治疗效果较高[11]。但是，仍有较多肺腺癌患者因化疗耐药，治疗效果不理想。有研究表明，接受PP化疗的肺腺癌患者的耐药率为69.2%[12]，与本研究的58.95%耐药率相似。

本研究结果显示，耐药组血清B7-H3水平高于敏感组，NKG2D水平低于敏感组。经logistic回归分析检验结果显示，血清B7-H3、NKG2D水平与肺腺癌患者PP化疗耐药有关，B7-H3高表达可能是肺腺癌患者PP化疗耐药的风险因子；NKG2D高表达可能是肺腺癌患者PP化疗耐药的保护因子。分析原因，B7-H3属于T细胞共刺激因子，可直接影响T细胞免疫功能，刺激基质金属蛋白酶-2分泌，促进肿瘤的发生及癌细胞浸润，可能影响患者预后[13-14]。同时，B7-H3通过降低核转录因子水平，使激活蛋白-1活性降低，抑制T细胞活性，降低抗肿瘤效应，减少抗肿瘤效应分子干扰素γ(interferon -γ，INF-γ)的分泌，发挥负性免疫作用[15]。NKG2D表达于巨噬细胞、NK细胞等，可诱导淋巴细胞破坏含有NKG2D配体的癌细胞，与恶性肿瘤患者的预后有关[16]。同时，NKG2D则通过免疫监视作用，抑制肿瘤细胞增殖，弱化NK细胞的刺激作用，降低NKG2D水平。而NKG2D的减少造成NK细胞对肺腺癌细胞的反应性下降，杀伤肿瘤细胞的活性弱化，不仅利于肿瘤细胞免疫逃逸，而且导致机体免疫功能损伤加重[17]。本研究绘制ROC曲线图，结果显示，化疗前血清B7-H3、NKG2D水平单独及联合预测肺腺癌患者PP化疗耐药的AUC分别为0.824、0.772、0.853 ，均有一定预测价值。这提示以后临床可以通过检测血清指标，对可能会出现PP化疗耐药的肺腺癌患者调整化疗方案，减少化疗耐药的发生。

综上所述，血清B7-H3、NKG2D水平与肺腺癌患者PP化疗耐药有关，血清B7-H3、NKG2D水平可用于预测肺腺癌患者PP化疗耐药性。