不同检验方法筛查妊娠合并梅毒的临床价值比较

陈亚娟

(许昌市妇幼保健院 检验科，河南 许昌 461000)

梅毒是临床上较为常见的一种传染性疾病，可导致机体所有组织器官受累。近年来，妊娠合并梅毒的发病率逐渐上升，患者随病情进展，发生流产、早产、新生儿病死及各类并发症风险逐渐增加，严重影响母婴结局[1]。因此，如何尽早筛查及治疗妊娠合并梅毒具有重要的临床意义。酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)与甲苯胺红不加热血清试验(tolulized red unheated serum test，TRUST)是临床上筛查妊娠合并梅毒的两种主要方式，其中ELISA是在固相载体表面吸附已知抗原或抗体并进行酶标记的抗原抗体反应，之后洗除液相中游离成分[2]。TRUST的抗原是牛心肌心类脂，测定患者血清中反应素[3]。两种方式均对妊娠合并梅毒具有一定的诊断价值，但目前临床上关于两种检验方法在妊娠合并梅毒筛查中的临床价值尚未统一观点。基于此，本研究旨在分析不同检验方法在妊娠合并梅毒筛查中的临床价值，以期为临床早期筛查妊娠合并梅毒提供客观的参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料选择2020年1月至2021年12月许昌市妇幼保健院收治的105例高度疑似妊娠合并梅毒患者作为研究对象。年龄23～37(30.58±4.25)岁；孕周10～20(15±1.08)周；初产妇70 例，经产妇35 例；受教育程度初中及以下37例，高中/中专及以上68例；在职44例，非在职61例。患者及其家属均知情同意。

1.2 入选标准(1)纳入标准：①经相关病史、体格检查、镀银染色显微镜检查法等初步判断为高度疑似妊娠合并梅毒；②肝肾功能正常、精神正常，可独立完成相关量表评估；③为单胎妊娠。(2)排除标准：①合并其他类型的传染性、感染性或血液系统疾病；②合并恶性肿瘤、明显出血倾向、自身免疫系统疾病等；③有免疫球蛋白制品服用史的皮肤病；④合并妊娠并发症。

1.3 检验方法

1.3.1ELISA检验 患者空腹时，采集肘静脉血5 mL，离心处理(3 000 r·min-1速率，10 cm半径)10 min后，取上层血清在4 ℃冰箱中保存待检。检测时将待检血清标本放置室温后，在分别预包被板条孔中加入100 μL血清样本及阴阳性质控，并在恒温箱(江苏新康医疗器械有限公司，苏械注准20162220405，型号600-B)中培养1 h，应用洗板机(上海科华实验系统有限公司，沪械注准20162400768，型号ST-36W)进行洗板，然后分别在样品孔及阳性、阴性对照孔中加入酶标试剂100 μL，振荡混匀后，在恒温箱中培养30 min，应用洗板机(上海科华实验系统有限公司，沪械注准20162400768，型号ST-36W)进行洗板，在每孔中加入50 μL显色剂A/B，振荡混匀后，在恒温箱中培育20 min，并在每孔中加入50 μL终止液混匀后，应用酶标仪(上海科华实验系统有限公司，沪械注准20162400701，型号ST-360)判读结果。ELISA试剂盒购自北京万泰生物药业有限公司。

1.3.2TRUST检验 患者空腹时，采集肘静脉血5 mL，离心处理后，取上层血清在4 ℃冰箱中保存待检。检测时将待检血清标本放置室温后，在加样卡圈中加入50 μL血清样本，并涂抹均匀，摇匀抗原液，针头加抗原液1 滴，在立体脱色摇床放置卡片后，振荡摇匀8 min(100 r·min-1速率)后即刻在亮光下观察结果。TRUST试剂盒购自北京万泰生物药物有限公司。

1.3.3梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)检验 患者空腹时，采集肘静脉血5 mL，离心处理后，取上层血清在4 ℃冰箱中保存待检。将所有待检样本均做9孔，将标本稀释液加入U型反应板，第1孔100 μL，其余8孔均为25 μL，采用移液器取25 μL血清至第1孔，混匀后取25 μL，加入第2孔，依次稀释至第9孔，在第3孔中加入25 μL未致敏粒子D液，第4～9孔加入致敏粒子C液，振荡器振荡微量反应板30 s后，在恒温箱中培育2 h，观察结果。TPPA试剂盒日本富士瑞必欧株式会社。

1.4 评价指标(1)以TPPA检测结果为金标准，分析ELISA与TRUST两种检验方法筛查妊娠合并梅毒的敏感度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值。(2)比较ELISA与TRUST两种检验方法的检测费用。

2 结果

2.1 TPPA筛查结果经TPPA筛查，105例高度疑似患者中妊娠合并梅毒共80例，占比76.19%。

2.2 两种检验方法对妊娠合并梅毒的筛查价值ELISA与TRUST检验方法筛查妊娠合并梅毒的特异度、阳性预测值比较，差异无统计学意义(P>0.05)；ELISA检验方法筛查妊娠合并梅毒的敏感度、准确度、阴性预测值均高于TRUST检验方法，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1～3。

表1 ELISA检验方法与TPPA筛查结果比较(n)

表2 TRUST检验方法与TPPA筛查结果比较(n)

表3 ELISA及TRUST检验方法筛查妊娠合并梅毒的价值比较(%)

2.3 ELISA与TRUST检验方法的筛查费用比较ELISA法筛查妊娠合并梅毒的费用为每人20元，总费用为2 100元，TRUST法筛查费用为每人38元，总费用3 990元，ELISA法筛查费用低于TRUST法。

3 讨论

梅毒螺旋体感染是梅毒的发病机制，梅毒的传染率极高，且人体是唯一的传染源，其主要通过性交、母婴、血液等方式传播。梅毒的危害性极大，其病变几乎可以累积机体所有的组织器官。妊娠合并梅毒的高危因素较多，包括忽略孕前检查、配偶是否有梅毒感染史、吸毒史或其他性病史等，且近年来，妊娠合并梅毒的发生率呈上升趋势[4]。妊娠合并梅毒的潜伏期较长，并发症状较不明显，加之妊娠期患者免疫系统处于一种抑制状态，其感染后往往无明显的症状体征，致使其常被忽略。随病情进展，患者会出现自身机体组织器官损伤，且梅毒会经脐静脉、胎盘组织感染胎儿，增加胎儿宫内窘迫、胎儿畸形、流产等风险，且在分娩过程中新生儿在经过产道时也可因为头部、肩部擦伤而发生感染，严重影响患者及围生儿的生命安全。因此，如何尽早筛查及治疗妊娠合并梅毒对妊娠结局改善至关重要。

目前，实验室检测是临床筛查妊娠合并梅毒的主要手段之一，其中TPPA是妊娠合并梅毒筛查的确诊试验，但该种检验方式步骤较多、操作较为复杂，易受待检者主观因素影响，且价格较为高昂，不适合大样本筛查且在基层医院梅毒筛查中难以推广，限制了其应用范围[5-6]。因此，需探寻其他实验室检测方法。目前，ELISA与TRUST检验方式是临床筛查梅毒较为常用的两种方式，其中ELISA检验方法是通过将已知抗体、抗原在待检载体上吸附，利用酶标过程，记录目标物质，在通过洗涤方式取出其他成分，并通过光谱分析酶标记反应过程，测定吸收值，获取量化结果，进而实现梅毒筛查[7-8]。TRUST检验方法对机体内梅毒螺旋体刺激免疫系统产生反应素后实施的非梅毒螺旋体抗原检验方法，抗原为二磷酸腺苷油衍生物，测定抗心磷脂抗体反应素，进而实现梅毒筛查[9]。

本研究结果显示，ELISA检验方法筛查妊娠合并梅毒的敏感度、准确度、阴性预测值均高于TRUST检验方法，提示相较TRUST检验方法，ELISA法筛查妊娠合并梅毒的准确度更高，可提高临床梅毒筛查的准确度。分析其原因为：TRUST检验方法主要测定的是梅毒非特异性抗体，具有操作便捷、检验过程快等特点，但其检测的是非特异性抗原，部分存在病毒性肝炎、自身免疫性疾病等患者可能出现假阳性情况，而部分并发人乳头瘤病毒(Human papilloma virus，HPV)的梅毒感染患者可能出现假阴性情况，降低了其筛查的准确性[10]。ELISA检验方法在筛查梅毒的过程中，仅在抗原抗体结合位点及抗原决定簇中发生抗原、抗体结合，从而提高ELISA检验方法筛查梅毒的特异性[11]。本研究中ELISA检验方法筛查妊娠合并梅毒的费用低于TRUST法，提示相较TRUST检验方法，ELISA检验方法的经济性更好。

综上所述，相比TRUST检验方法，采用ELISA检验方法筛查妊娠合并梅毒的敏感度、准确度、阴性预测值更高，且价格更为合理，可在临床大批量妊娠合并梅毒筛查中推广应用。