农药残留检测实验室参加能力验证考核合格关键环节的探讨

王联广，周树娅*，范 斌，伍湘竹，马 鹏，石安宪

（1.昭通市绿色食品发展中心，云南昭通 657000；2.昭通市昭阳区农业环境保护监测站，云南昭通 657000）

能力验证是通过实验室间的比对，按照制定评价标准评价实验室参加者的检测能力[1-3]。定期开展检测实验室能力验证是计量认证的特定要求[4]。每年国家农业农村部或云南省农业厅都会对农产品实验室进行能力验证，通过参加能力验证可了解自己的实验室所处的水平，有利于发现和解决问题，进一步提高自身技术能力和管理水平。本文介绍了能力验证过程的一些经验，如能力验证前期准备、样品领取、样品前处理、多仪器相互验证、结果判定和数据报送等诸多方面的工作技巧。只有平时就具有过硬的检测技术，才能更好地完成能力验证工作。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

花椰菜（含农药）能力验证样品；4 μg·mL-1标准混合物质（云南省农业科学院质量标准与检测技术研究所）；甲胺磷等40种标准物质[1 000 mg·L-1，农业农村部环境保护科研监测所（天津）]；正己烷、丙酮[色谱纯，赛默飞世尔科技（中国）科技有限公司]；氨基、弗罗里矽柱（1 g/6 mL，天津博纳艾杰尔科技有限公司）；乙腈（分析纯，国药集团化学试剂有限公司）；其他试剂均为分析纯。

1.2 仪器与设备

安捷伦7890B气相色谱仪配uECD/FPD检测器（美国安捷伦公司）；旋转蒸发RE-2000B（上海亚荣生化仪器厂）；电子天平DT-500B（感量0.01 g，常熟市金羊砝码仪器有限公司）；SK-1型快速混匀器（江苏金坛环宇科学仪器厂）；匀浆机IKA T18（艾卡有限公司）；固相萃取装QSE-240011、智能氮吹仪MFV-36（得泰仪器科技有限公司）。

1.3 实验方法

1.3.1 样品前处理

（1）提取。同时用100.0 mL乙腈多次冲洗验证样品和自制质控样品的方式转移塑料离心管的样品于250 mL样品瓶中，可使用玻璃棒或塑料小勺辅助转移，高速匀浆2 min后用滤纸过滤，收集到装有10～14 g氯化钠的200 mL具塞量筒中，滤液约100 mL，盖上盖子剧烈振荡1 min，在室温条件下静置30 min。待分层后，吸取10.0 mL提取试液于150 mL鸡心瓶中，在40 ℃旋转蒸发至近干；有机磷加入5 mL丙酮过膜入进样小瓶；有机氯加入2 mL正己烷，盖上铝箔待净化。

（2）净化。有机氯农药，将弗罗里矽柱依次用5.0 mL丙酮+正己烷（10+90）、5.0 mL正己烷预淋条件化，当溶剂液面达到柱吸附层表面时，立即倒入样品溶液，用15 mL刻度离心管接收洗脱液，用5 mL丙酮+正己烷（10+90）涮洗鸡心瓶后淋洗弗罗里矽柱，并重复一次。在水浴温度40 ℃条件下，氮吹蒸发至小于5 mL，用正己烷定容至5.0 mL，在旋涡混合器上混匀，分别移入2 mL自动进样器样瓶中，待测[5]。

1.3.2 色谱条件

色谱条件：FPD/ECDDB-5/17石英毛细管柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm），载气为氮气（99.999%），恒流；流量3.0 mL·min-1。进样口温度为220/300 ℃；FPD/ECD检测器温度为250/300 ℃；尾吹为氮气60 mL·min-1； 柱 温： 初 温 150 ℃ 保 持 2 min， 以8 ℃ ·min-1升至 260 ℃，保持 7.25 min；不分流进样 1.0 μL。

1.3.3 校准溶液配制

使用相同的基质空白溶剂，配制成和盲样考核浓度相近的标准溶液，进行单点校准。

2 结果与分析

2.1 能力验证结果

本次能力验证结果如表1所示，RSD在1.1%～3.2%，符合云南省能力验证要求，可报送结果。

表1 能力验证样品测定结果

2.2 质控结果

本次能力验证质控结果如表2所示，回收率72.0%～101.2%，RSD在1.1%～7.9%，符合云南省能力验证要求，可报送结果。

表2 能力验证质量控制结果

3 讨论与结论

3.1 能力验证关键点控制

3.1.1 准备工作

标准物质、试剂耗材、仪器调试、更换色谱柱并老化、换寸管等提前15 d完成；仪器调试完成后测定标准物质，记录标准物质出峰时间；加标检测平时回收率不理想的农药，记录测定值的稳定性；提前7 d配制新标准物质、铬酸清洗一批玻璃器皿，自校一批0.1 mL、0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、5.0 mL和10.0 mL的刻度移液管，以及10 mL离心管和筛1～2个基质干扰峰少的样品；领取样品时，模拟准备一批50 g质控样品，添加0.2 μg·mL-1混合标液农药，在和能力验证样品相同的条件下储存。

3.1.2 领样

由于领样路途遥远，农药残留能力验证样品领样时，准备的冰袋已完全融化，领完样后可买冰棍使其降温，以免能力验证样品中的农药分解，样品为1个空白，3个平行样品各50 g；同时购买发放样品单位的分组的混合标准物质农药，浓度为4 μg·mL-1；在样品领出，回实验室途中，同时把实验室制备的加标和空白样从冰柜拿出来解冻，等样品到达实验室时，验证样品和自制质控样品一起进行前处理。

3.1.3 前处理注意事项

均质器匀浆速度调到中等速度固定的值；旋转蒸发仪需要慢旋，经常放空，千万盯住不能旋干，保证鸡心瓶湿润；加足NaCl，振荡摇匀时间要长，静置时间尽量达到1 h，使其充分萃取，以免旋蒸时间长，农药残留挥发过多，结果偏小；一定要使用移取量准确的离心管、移液管、容量瓶配制液体，以减少系统误差。

3.1.4 结果判断

（1）定性。首先上机分析发样单位的标准品，然后进能力验证样品空白对比出的峰有没有干扰目标峰，再进能力验证（添加农药）样品进行定性，本次气相色谱定性出目标物质为氧乐果、水胺硫磷、三唑磷、氯氰菊酯和腐霉利，如果有质谱仪器，可与色谱仪器相互验证定性。

（2）定量。先半定量检出农药的浓度范围，再用空白基质液配制相近的标液浓度准确定量，以减少基质效应、减少误差；观察3个能力验证结果的平行性，如果平行性好，证明前处理没问题，如果质控样品回收率实验结果也好，证明结果在可控范围内，此时结果便可报送，否则要重新做样。

3.1.5 数据报送技巧

结果分析首先看质控回收率的情况，如果回收率偏低，就往高处微调结果，如果回收率偏高，就往低处微调结果。比如测定的结果为0.182 mg·kg-1，如果质控回收率比较高的情况下，且实际值为0.15 mg·kg-1，此时的回收率为121.3%，结果为不合格，此时可往下微调测定值为0.180 mg·kg-1，回收率就达到120%；如果质控回收率较低，且实际值为0.26 mg·kg-1，此时的回收率为69.2%，结果为不合格，此时可往上微调测定值为0.182 mg·kg-1，回收率就达到70%，总的原则在数据偏差不大的情况下，考虑到试验过程中会有各种影响因素，可对结果进行微调。但若数值偏差较大，结果应判定为不合格，不可上报虚假数据。

3.2 结论

能力验证是一项系统工作，需前期准备、样品领取、样品前处理、多仪器相互验证、结果判定和数据报送技巧等诸多工作细节，本次能力验证有机磷、有机氯项目检测出氧乐果0.119 mg·kg-1、水胺硫磷 0.072 0 mg·kg-1、三唑磷 0.120 mg·kg-1、腐霉利0.143 mg·kg-1和氯氰菊酯 0.142 mg·kg-1，质控回收率在72.0%～101.2%，RSD在1.1～7.9，符合云南省能力验证结果要求，组织单位反馈结果全部为合格，通过总结关键技术点，更进一步增强了能力验证检测的信心。