尿液分析仪在检测男性外生殖器标本真菌中的价值

刘小平

(安徽中医药大学第一附属医院，合肥 230031)

男性外生殖器包括阴茎和阴囊。阴茎又分为龟头、阴茎体和阴茎根。临床上常见男性外生殖器处潮红、炎性丘疹、脱屑和渗出物等，常为念珠菌感染导致。实验室常采用鳞屑或分泌物直接镜检来辅助临床诊断和鉴别诊断，但检出率和准确率却受很多因素影响，如实验室方法、人员技术、取材方式及标本质量等。本研究收集161例皮肤科门诊就诊的男性患者外生殖器标本，应用尿液分析仪、荧光染色镜检及培养3种方法检测真菌并对结果进行统计学比较分析。

1 资料与方法

1.1 临床资料

收集2021年2月至2021年6月来自本院皮肤科门诊男性外生殖器皮肤病患者161例，包括阴茎部136例和阴囊部25例。

实验仪器 显微镜CX31(日本Olympus公司)；JD801真菌检查图文系统(南京大学)；尿液沉渣分析仪(日本SysmexUF-1000i)。

实验试剂 真菌荧光染色液(批号20201010，有效期20211009)；安徽信灵检验医学科技股份有限公司；沙堡弱平板(生产批号20210108、20210403，有效期3个月)郑州安图生物工程股份有限公司。

1.2 实验方法

用钝刀刮取或透明胶布粘贴患者外生殖器部位皮屑或分泌物放至加有1滴荧光染色液的载玻片上镜检。

旋开1支一次性男性拭子擦拭取材部位后再放回至试管中，以无菌操作方式分区划线接种至沙堡弱培养基培养。再旋开1支一次性男性无菌拭子，向试管中加1 mL无菌生理盐水，用蘸有无菌生理盐水的拭子擦拭取材部位后，再放回至试管中充分混匀，用尿液分析仪检测。

检测方法对真菌的检出率用率(%)表示。检测方法间比较分析采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。采用SPSS11.0软件进行统计分析。

2 结 果

2.1 尿液分析仪散点图

尿液分析仪采用红色半导体激光技术、核酸染色技术及流式细胞术测定有形成分。产生3种类型信号，即提供大小信息的前向散射光信号(Fsc)、提供表面和内部复杂性信息的侧向散射光信号(Ssc)及提供染色性信息的荧光信号(FI)形成脉冲信号波，形成不同的散点图，如有酵母菌(YLC)存在的可能，分析仪上出现青色区域。根据散点图提示来判断有无真菌存在的可能,见图1、2。

图1 散点图提示有真菌存在的可能图2 散点图提示无真菌存在的可能

2.2 161例男性外生殖器标本中真菌检验结果

161例男性外生殖器皮肤病患者标本中荧光染色镜检，检出孢子或和菌丝的阳性33例，阳性率为20.5%；拭子盐水液用尿液分析仪进行检测，提示真菌阳性39例，阳性率为24.2%；拭子培养，念珠菌培养阳性35例，阳性率为21.7%。结果见表1，经统计学处理，尿液分析仪检测提示率高于荧光镜检和培养检出率，有统计学意义(χ2=17.11，P<0.05,χ2=15.71，P<0.05)。

33例荧光染色镜检真菌阳性中，分析仪检测拭子盐水液提示阳性33例，阳性率为100%；拭子培养出念珠菌26例，阳性率为78.8%。分析仪阳性提示率与荧光染色镜检率差异无统计学意义(χ2=10.9，P>0.05)。分析仪阳性提示率显著高于培养检出率，差异有统计学意义(χ2=16.33，P<0.05)；128例荧光染色镜检未检出真菌中，分析仪检测拭子盐水液提示阳性6例，阳性率为0.05%(6/128)；念珠菌培养阳性9例，阳性率为0.07%(9/128)。尿液分析仪检测提示率显著低于培养检出率，差异有统计学意义(χ2=16.33，P<0.05)。尿液分析仪散点图真菌提示假阳性率为0%；假阴性率为0.02%(3/128)。结果见表1。

表1 3种检查方法真菌检验阳性结果

3 讨 论

阴茎头和阴茎交界处为冠状沟，此处脱落的上皮细胞、腺体分泌物、尘埃和尿液残余物积聚可形成皮垢，易引起念珠菌感染导致发炎[1-2]。念珠菌性龟头炎是皮肤性病科常见病，主要发生在龟头部位，典型病例取鳞屑或分泌物直接镜检可找到大量的孢子和或假菌丝，但相当部分病例直接镜检为阴性。本研究应用3种检测方法对161例皮肤科门诊男性患者的外生殖器皮屑或分泌物的真菌进行了检测，将尿液分析仪散点图的提示结果与荧光染色镜检及培养结果进行比较，观察分析仪对男性皮肤病患者外生殖器标本真菌的检测情况，结果认为可以通过分析仪散点图提示有无真菌存在的可能，再确定是否需要进行镜检和培养。文献[3-4]分析了临床尿培养标本中酵母样真菌检测阳性且同时检测尿液常规分析的病例，以真菌镜检和培养结果为标准。尿液分析仪通常用于尿液分析，虽在一定程度上取代了镜检及尿液培养，能及早发报告，大大减少了人力和物力，但分析仪通过散点图只能提示尿液中有无真菌存在的可能，还受尿液中其他成分的干扰，真菌孢子易被误认为红细胞和白细胞[5-6]。本研究用的拭子盐水液则没有类似尿液其他成分的干扰，可通过分析仪散点图提示拭子盐水液中有真菌存在的可能，33例荧光染色镜检阳性中，分析仪散点图提示阳性率为100%(33/33)。有研究[6-7]将其检测极限进行了评估，用生理盐水把酵母菌临床分离株稀释成11种McFarland浓度，调至McFarland 0.5的菌液，所含酵母菌数为1.5×104/μL,UF-1000i自动尿液分析仪的检测值为2 680 CFU/uL,相当于McFarland 0.5的酵母菌菌液稀释1 000倍时,UF-1000i无法测出酵母菌的存在。指出UF-1000i与手工镜检结果的相关性极佳。33例荧光染色镜检真菌阳性中，拭子标本被培养出念珠菌仅26例，可能和患者就诊前外用药有关，特别是抗真菌药[3]。128例镜检阴性者而培养阳性9例中，分析仪散点图提示阴性3例(24.7%)，这可能与标本中菌含量少有关。有研究[6-7]发现镜检的高倍数视野(HPF)酵母菌平均少于1 CFU时,仪器无法测出。本研究的结果发现分析仪检测拭子盐水液，散点图真菌提示假阳性率为0%；假阴性率为0.02%(3/128)，可认为分析仪散点图只要提示有真菌存在时，可不需要荧光染色镜检和或培养证实。只有在分析仪散点图提示真菌阴性且荧光染色镜检阴性情况下需要进行培养。换言之，分析仪检测的散点图阳性时可提示男性患者外生殖器皮屑及分泌物中有真菌存在，分析仪检测的散点图阴性不能说明男性患者外生殖器皮屑及分泌物中无真菌。分析仪检测有操作简便、快速灵敏重复性好及易于自动化等优点，被广泛应用于疾病的诊断和鉴别诊断[3-4]，其自动化可用于多个样本真菌检测的筛查，还能选择出需要进行培养的标本，能大大减少标本需要镜检和培养的频次。值得注意的是拭子盐水液制备必须用拭子用力擦拭患处及其边界，尽可能地提高菌的数量。日常实验室检查顺序应该是先荧光染色镜检，阳性可直接报告菌丝和或孢子；阴性者用分析仪检测拭子盐水液，分析仪散点图提示阳性时需结合临床或进一步培养。倡导所有临床病例标本做培养，培养不但能鉴定菌株还能提供药敏，对防止滥用抗生素减少耐药菌株的发生具有重要价值。