实验室检测在动物疫病防控中的应用

李克丽

（南召县动物疫病预防控制中心，河南 南召 474650）

1 国外兽医实验室检测现状

当前，国外常见的兽医实验室检测流程如下：现场兽医人员将病例提交到某大学兽医诊断实验室，实验室人员根据病例情况和病变情况选择诊断方法，如常用的方法有血清学诊断、分子诊断、组织病理切片诊断、细菌学诊断、毒理和营养学、病毒学、临床药理学等，实验室对检测结果进行分析和总结，达成诊断结果，然后再向现场兽医人员提供报告和建议，帮助养殖场户疫病防控策略的制定，促进企业的发展。

2 我国兽医实验室检测现状

我国兽医检测实验室的类别比较多，主要有以下五类。第一类是单纯性的教学科研机构，如大学和科研院所的一些兽医实验室。在做科研的同时，也可以做一些研发。第二类是政府相关机构，如省、市、县区的动物疫控机构，这些疫控机构主要做一些重大动物疫病抗体和病原检测。第三类是相关企业，主要是一些生物公司和疫苗厂家等，这些企业自身就有实验室，可以免费为购买本企业产品的养殖场做检测。第四类是猪场和相关的养殖集团。2018年非洲猪瘟发生以来，农业农村部要求有条件的养殖企业可以自建非洲猪瘟实验室。所以，我国很多有条件的养殖企业均有自己的实验室。第五类是第三方检测机构。这类检测机构主要协助疫控机构和养殖企业检测并收取一定的费用。

我国兽医实验室疾病诊断的流程如下：患病动物有两种检测方法，一种是微生物学方法，即采集患病动物的血液、粪便、尿液、组织、黏膜拭子。这些病料会被兵分两路进行检测，一路是培养基培养，提纯、分离鉴定和病原微生物的确定；另一路是用分子生物学方法直接鉴定，如免疫荧光抗体反应、分子核酸杂交、PCR 等。另一种是免疫学方法，即收集血液样品检测疑似病原的抗体反应，用ELISA 乳胶凝集的方法进行抗体评价。检测结果在反馈送检人的同时，机构会保存一份存档。

3 细菌性疾病采样及检测

细菌性疾病有很多种，如呼吸系统细菌病原—支原体，发病动物通常表现为咳嗽，可能伴发有严重的肺炎，这主要以保育猪和生长育肥猪发病较多，如果怀疑是支原体感染，可采集病猪的肺脏和血清，所用检测方法主要有PCR、支原体培养、荧光PCR、ELISA。呼吸系统细菌病原-多杀性巴氏杆菌，发病猪常表现为咳嗽和急性死亡。这种病主要危害保育猪和生长育肥猪，采集发病猪的肺脏具有重要的诊断意义，检测方法主要有细菌培养和血清分型以及PCR。消化系统病原—大肠杆菌，发病猪表现为腹泻、突然死亡、水肿，以哺乳和保育仔猪发病居多，采集发病猪的小肠、大肠、粪便拭子和脑具有诊断意义。检测方法以PCR 为主。消化系统病原—劳森菌，感染后，发病猪主要表现为腹泻、回肠壁增厚，以生长育肥猪感染居多，采集回肠和粪便具有诊断意义，检测方法主要以荧光PCR为主。

4 病毒性疾病采样及检测

呼吸系统病毒，如猪圆环病毒II 型，发病猪常表现为生长缓慢、呼吸困难、淋巴结肿大、腹泻、面色苍白等，以保育猪和生长育肥猪发病居多，其中采集肺脏、脾脏、淋巴结、肾脏等具有诊断意义。检测方法主要以荧光定量PCR和病毒分离为主。呼吸系统病毒—A型流感病毒，发病猪常表现为咳嗽、精神沉郁、呼吸困难、体温增高、呈现突然暴发并快速传播，以哺乳、保育和育肥猪发病居多，采集肺鼻拭子、血液和气管等具有诊断意义。检测方法主要以病毒分离、荧光定量PCR、测序为主。消化系统病毒—轮状病毒和传染性胃肠炎病毒，发病猪常表现为腹泻、呕吐、脱水，以哺乳期、保育期和生长育肥阶段的猪发病为主，病料采集以大肠、小肠和粪便拭子为主，所用的检测方法主要以PCR、病毒分离和测序为主。□