猪流行性腹泻的诊断与防控

彭燕军

四川省宜宾市翠屏区安阜街道经济发展服务中心，四川宜宾 644007

猪流行性腹泻(PED)是世界范围内的一种肠道传染病，其症状和猪传染性胃肠炎很相似，给养猪业的健康发展造成严重的威胁。1971年，在英国首次发现此病，此后在欧洲、亚洲的许多国家相继发生，尤其中国、日本、韩国等国家的发病率较高。PED在我国的发生比较严重，新的PEDV变异株的出现给养猪业带来更大的损失。我国主要采用猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻二联灭活苗或二联弱毒苗进行预防，但从2006年开始，免疫猪群中开始出现PEDV，造成此病的持续感染。2011年，我国的部分省份暴发猪流行性腹泻的大规模流行，到目前为止，此病的发生率一直居高不下。

1 流行病学

猪流行性腹泻主要感染猪，不同日龄的猪都可感染，但是易感性和发病率不同。7日龄以内的哺乳仔猪易感性最强，症状也最明显，发病率可以高达100%，其次为架子猪、育肥猪、母猪。母猪的发病率一般在15%～90%。PED多呈暴发性流行，猪群中只要有一头猪发病，同圈或者相邻的猪场一般都会相继发病，病程持续2～3周后病情稳定下来。而且一个猪群暴发后，第二年发生该病的几率很低，仅有个别地区或者猪场的断奶仔猪或者架子猪每年的秋冬都会发生。病猪和带毒猪是主要的传染源，病毒主要侵害小肠上皮细胞，病毒主要在结肠和小肠的绒毛上皮细胞内复制，因此病毒会随粪便等排泄物排出体外，污染周围的环境、饲料、饮水或者用具等。猪群感染病毒主要是通过被污染的车辆、饲料或者携带病毒的鞋、工作服等感染，不同猪舍或者不同猪场也主要通过被污染的车辆、饲料或者人员的流动而引起流行蔓延。PED的发生具有明显的季节性，冬春寒冷季节发病率高，尤其发病集中在11月至第二年2月发生，但是夏季、春秋季节也时有发生。PEDV与传染性胃肠炎的症状非常相似，不容易区分，而且两种疾病经常混合感染，会导致病情加重，生产中要引起重视。

2 诊断方法

防控猪流行性腹泻的关键是能够对该病做出早期的诊断，建立快速、敏感、高效、经济的诊断方法有非常重要的作用。在临床症状上，猪传染性胃肠炎、猪轮状病毒病等和PED的症状很相似，仅凭临床症状很难确诊，因此要通过病原学诊断、免疫学诊断和分子生物学诊断等实验室诊断才可以确诊。一般情况下，病原学诊断方法能够准确诊断出猪流行性腹泻，但随着分子生物学的发展，PCR技术的应用，使得诊断方法更多更敏感、更准确。

2.1 临床诊断根据病猪的临床表现可以做出初步的诊断。猪流行性腹泻的潜伏期、病程的长短以及病状会随着年龄的大小有明显的差异。仔猪的潜伏期较短，仅为24～36h，育肥猪的潜伏期稍长，一般为2d以上。猪感染后一般表现为腹泻、呕吐、脱水，刚开始排出的粪便比较粘稠，然后变为水样粪便，病猪体温升高，精神萎靡不振，食欲不振，逐渐变得消瘦，衰竭死亡。1周龄以内的仔猪，病情比较严重，病程常持续2～4d，就会出现严重脱水死亡，死亡率在50%～100%。断奶仔猪和母猪的病持续时间较长，腹泻的症状可以持续1周左右，然后会逐渐恢复，但是会影响生长性能，断奶仔猪生长缓慢，母猪的泌乳量会降低。育肥猪感染后，病程也常持续1周左右康复，死亡率较低，一般为1%～3%，但是也影响其育肥效果，体重增重较慢，饲料的利用率会显著降低。

猪感染流行性腹泻后，会出现明显的病理变化。病猪肠内充满了泡沫状黄色的粘液性内容物和大量的气体，肠壁扩张使得肠壁变薄，呈透明状，没有了弹性。感染流行性腹泻后，特征性的变化为肠粘膜绒毛明显萎缩变短，肠系膜以及肠系膜淋巴结水肿。其他的脏器没有明显的变化。

2.2 鉴别诊断猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪急性传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪轮状病毒(PRV)三种病毒性疾病的症状都是腹泻，病理变化都在胃肠道，而且它们的流行病学和临床表现很相似，很难区别。在临床上，PEDV、TGEV混合感染发病的情况非常多，有时还可以PEDV、TGEV、PRV三种病毒混合或者继发感染，给诊断和治疗带来很大的困难。虽然三种病毒性疾病很相似，但是仍然存在细微的区别。（1）在中国PED的发病率和死亡率要高于其他两种疾病，猪流行性腹泻以仔猪发病率和死亡率最高，腹泻、呕吐为其典型的症状，但是以腹泻为主，而且呕吐多发生在采食以后，呕吐的症状相对较轻，病理变化以小肠病变为主；（2）TGE在寒冷的冬春季节发病率较高，也具有腹泻、呕吐的症状，但是以呕吐症状为主，而且呕吐多于采食之前就会发生，采食以后也会发生呕吐，但是次数较少。病理变化也主要以胃、小肠病变为主，小肠壁变薄，呈透明状，肠绒毛变短，这和猪流行性腹泻的变化很相似；猪轮状病毒病是一种人畜共患病，其死亡率相对较低，而且很少会出现呕吐，从这点可以将其和PED、TGE进行区别。

2.3 实验室诊断在疾病的诊断过程中，有时只通过流行病学调查和临床诊断不能进行确诊，还需要进一步进行实验室检测。

2.3.1 分离与鉴定PEDV将病毒进行分离鉴定，是诊断猪流行性腹泻的最可靠的方法。病猪开始腹泻24h内，采集病料如小肠或小肠内容物，然后将病料进行无菌处理，再接种于VERO细胞进行培养，经过几代盲传，将病毒分离出来，再接种于仔猪，然后根据仔猪的病状、病理变化进行初步诊断。也可以将分离的病毒用免疫学诊断方法、PCR方法等进行检测。还可以将分离的病毒用免疫电镜进行观察，这种检测方法很有说服力，也最直接。将分离培养的病毒进行处理，在电镜下可以观察到典型的病毒粒子。

2.3.2 免疫荧光抗体检测技术免疫荧光抗体检测是对所要检测的抗体或者抗原用荧光素进行标记，再用荧光显微镜通过观察荧光对对应的抗原或者抗体进行分析的一种检测方法。在1941年，免疫荧光抗体标记技术由Coons等建立，当时由于技术的限制，是利用异氰酸荧光黄将抗体进行标记，检测小白鼠组织切片的可溶性肺炎球菌多糖。1988年，谢明星等采用间接免疫荧光方法对PED抗体的消长规律进行了测定。1990年，崔现兰等对猪场的PED抗体进行了检测，采用间接免疫荧光法阳性检测率达到89%。

2.3.3 酶联免疫吸附实验（ELISA）酶联免疫吸附实验是诊断疫病最常用的检测方法，此种检测方法检测速度快、特异性强，准确率较高。朱维正等[5]利用病猪的粪便作为病料，利用双抗体ELISA法从病料中检出PEDV,采用这种方法好的检出率与应用免疫电镜检测发检出的阳性符合率达97.37%。潘溪利用斑点酶联免疫吸附试验对834份血清样品进行了检测，阳性抗体率达21%，与用琼扩试验检测方法更敏感，重复性更好。酶联免疫吸附实验诊断方法速度快，可以用于大量样品的检测，尤其在流行病学的调查中应用较广。

2.3.4 中和试验中和试验也是进行病毒诊断的一种重要的技术方法。中和试验是一种免疫学试验，敏感性、特异性非常强。早在1988年，谢明星等人利用ELISA方法、免疫荧光方法、中和试验三种方法对早期感染的病猪进行了检测，通过研究证实三种方法都可以对猪传染性腹泻进行早期诊断，而且中和试验也能广泛应用于流行病学调查。

2.3.5 分子生物学检测方法分子生物学的发展，也促进了疫病诊断学的发展。常用的分子生物学诊断方法主要有聚合酶链式反应（PCR）技术和荧光定量PCR方法。

（1）聚合酶链式反应（PCR）法有RT-PCR、多重RT-PCR、RT-巢式PCR(RT-nested PCR)等几种形式。RT-PCR技术应用较广，而且反应敏感，可以非常灵敏的检测出病毒含量极少的病毒RNA。这种方法虽然非常灵敏，但是用于临床检测比较繁琐，一般多用于研究，临床应用还没有推广。

（2）荧光定量PCR方法就是将荧光基团加入到PCR反应体系中，利用荧光信号的强度变化检测PCR反应产物的变化。荧光定量PCR方法在病原微生物检测、基因病加测、传染病检测等领域已经广泛应用。定量PCR方法的灵敏度要远远高于传统PCR方法，而且检测需要的时间短，没有污染。

3 防控措施

猪流行性腹泻是养猪生产中经常发生的急性传染病，对养猪生产的威胁很大，因此，做好预防工作非常重要。要通过加强对妊娠母猪、后备猪以及仔猪的饲养管理，提高饲养水平，做好卫生消毒以及免疫预防措施来降低疫病的发生率。

3.1 预防免疫到目前为止，预防PED仍然以疫苗免疫为主。生产中常用的疫苗有猪流行性腹泻灭活疫苗和猪流行性腹泻弱毒疫苗两种。灭活疫苗比较安全，疫苗的免疫效果受母源抗体的影响较小，母猪在分娩前20～30d肌肉注射疫苗可使仔猪获得被动免疫。灭活疫苗也可以用于疫区或者受威胁区的主动免疫，但是效果不如被动免疫。程庆华等在1995年研制的PED灭活疫苗对两月龄的仔猪的仔猪保护率达90.42%，但是猪群中TGE、PED、PRV等混合感染的病例逐渐增多，灭活疫苗对混合感染的病例的效果不好，而且灭活疫苗在接种后14d可产生免疫力，免疫周期较短，注射剂量大，费用高，对紧急接种免疫不太适合；弱毒疫苗诱导产生抗体的时间短，抗体水平比较高，用于主动免疫的效果要比灭活疫苗效果好，但是弱毒苗容易受到母源抗体的影响，尤其是我国发生流行性腹泻的地区较广，接种疫苗的频率高，仔猪母源抗体水平较高，如用弱毒疫苗接种有时会受到影响。

随着PEDV、TGEV和PRV的混合感染病例的争夺，人们对二联苗和三联苗等弱毒疫苗的研究也逐渐深入。佟有恩等在1999年研制了PED和TGE二联弱毒疫苗，此苗稳定性好，对预防PED和TGE有明显的效果。对PED进行主动免疫，保护率高达100%。钱永清等人研制了三联苗，对母猪和仔猪的保护率高达98%和93%。

3.2 强化饲养管理措施PED主要发生于冬季和早春（12月份至次年的3月份），究其原因主要是因为气候寒冷，温度变化较大，再加上猪舍的保温措施不到位，很容易引起猪群的抵抗力降低，诱发PED，因此，冬季来临之前，一定要对猪舍进行检修，做好保温措施。还要加强对饲料和饮水的管理，不要饲喂发霉变质的饲料，冬季不要饲喂冰冻饲料，不要给猪群饮用冷水。要加强对后备母猪的管理，根据多年的实践表明，一、二胎的母猪以及所产的仔猪发生PED以及TGEV的几率较高，因此要做好后备母猪的管理，强化预防免疫措施。

3.3 做好猪舍的消毒和病猪的隔离工作猪场要强化消毒措施，养殖场的入口要有消毒池，各个猪舍的入口要设有消毒间，猪舍内的粪便要及时清理。健康猪感染发病通常是由于接触了被病猪排泄物污染了的饲料、饮水以及其他工具等引起的，因此猪场中一旦出现了发病猪，要立即隔离，积极治疗，防止疫情在猪场内进一步扩散流行。对病猪进行隔离治疗期间，饲养员不要出猪场，对病死猪要进行无害化处理，病猪所在的猪舍以及饲喂人员所能到达的地方要用生石灰进行消毒，彻底将病原消灭。

3.4 对病猪的治疗对PED到目前为止还没有特效药物，出现病情后，主要采用对症治疗的措施。对于腹泻、脱水的病猪要进行补液，对出现体温升高的病猪要及早采用鱼腥草注射液、卡巴匹林钙、柴胡注射液等药物进行退热。还要做好病猪的护理，饲喂适口性好、易消化的饲料，给病猪增加营养，增强体质。

4 结束语

随着养猪业的发展，疫病的流行特点也在发生变化，各个地方PEDV并不是一成不变的，虽然已经有了PEDV灭活苗和弱毒苗,对该病有一定程度的预防和保护，但是PEDV、TGEV和PRV等疫病的混合感染，以及猪瘟、猪圆环病毒病等疫病的发生流行，都对PED的发生产生很大的影响，对养猪业的发展造成严重的威胁。