血清检测在复杂性胆石症患者中的应用①

张 云,许玉丹,蒋志健

(南阳市中医院检验科,河南 南阳 473000)

复杂性胆石症是临床常见胃肠道疾病,Calot三角区会有明显充血现象,临床手术治疗时极易发生出血,会增加医源性胆道损伤发生率[1]。因此临床应采取有效手段对单纯性、复杂性胆石症进行准确判断。近年来,血清学指标在临床应用广泛,其中微小RNA-122(miR-122)在肝细胞中表达,能调节脂肪酸及胆固醇代谢,从而参与胆结石发生发展[2];高迁移率族蛋白1(HMGB 1)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶裂解角蛋白-18(CCK-18)均为免疫细胞、坏死细胞释放的核结合蛋白,是肝上皮细胞的标志物[3]。本研究选取本院复杂性胆石症52例,旨在探讨血清检测在复杂性胆石症患者中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019-01～2021-01本院复杂性胆石症52例及同期单纯性胆石症52例。单纯性胆石症患者男26例,女26例;年龄39～71(52.23±6.53)岁;胆石症类型:胆色素型16例,胆固醇型19例,混合型17例。复杂性胆石症患者男27例,女25例;年龄38～72(52.45±6.62)岁;胆石症类型:胆色素型17例,胆固醇型18例,混合型17例。两者基线资料均衡可比(P>0.05)。纳入标准:均经CT、超声检查诊断为胆石症;复杂性胆石症标准:胆囊严重萎缩或炎症水肿、胆囊前后三角区界限不清;均签署知情同意书。排除标准:肠梗阻性黄疸;急性胆道感染;曾接受过外科治疗。

1.2 方法

血清miR-122水平检测:采用RT-PCT法检测,采集患者3mL静脉血,利用Trizol试剂提取血清总DNA,并进行质量鉴定,包括浓度与纯度;在一定反应条件及反应体系下合成cDNA,进行实时荧光定量测定miR-122水平。血清HMGB 1、CCK-18水平检测:采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定经离心15min后的空腹静脉血血清HMGB 1、CCK-18水平,试剂盒购自日本同仁化学有限公司。复杂性胆石症诊断标准:miR-122>5.3、HMGB 1>2.5ng/mL、CCK-18>138.7U/L诊断为复杂性胆石症;联合检测标准以单一检测任一恶性为恶性。

1.3 观察指标

单纯性、复杂性胆石症血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平;发生复杂性胆石症的危险因素分析;血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平联合检测复杂性胆石症的诊断结果;血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平联合检测复杂性胆石症的诊断效能(灵敏度、特异度、准确度)。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平

复杂性胆石症血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平较单纯性胆石症患者高(P<0.05),见表1。

表1 两组血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平

2.2 发生复杂性胆石症的多因素分析

经Logistic回归分析显示,血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平升高均为发生复杂性胆石症的危险因素(P<0.05),见表2。

表2 发生复杂性胆石症的多因素分析

2.3 诊断结果

miR-122检测复杂性胆石症47例,单纯性胆石症57例;HMGB 1检测复杂性胆石症40例,单纯性胆石症64例;CCK-18检测复杂性胆石症52例,单纯性胆石症52例;联合检测复杂性胆石症61例,单纯性胆石症43例,见表3。

表3 检测诊断结果

2.4 诊断效能

联合检测灵敏度高于miR-122检测、HMGB 1检测、CCK-18检测(P<0.05);联合检测、miR-122检测、HMGB 1检测、CCK-18检测的特异度、准确度比较(P>0.05),见表4。

表4 诊断效能

3 讨论

手术治疗复杂性胆石症过程中极易引发出血,影响预后效果[4]。临床应积极寻找敏感性、准确性较高标志物,明确诊断胆石症病情程度。张毅等[5]学者研究中胆管炎症反应中血清HMGB 1会显著升高。本研究结果表明复杂性胆结石血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平高于单纯性胆结石,且经Logistic回归分析显示,血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平升高均为发生复杂性胆石症的危险因素(P<0.05)。其中miR-122能抑制胆固醇及脂肪酸代谢,多在肝脏中特异性表达,占总miRNA的70%,会导致胆囊胆固醇积聚,从而形成胆结石。CCK-18及HMGB 1均为机体促炎蛋白,属于细胞炎症标志物[6];CCK-18能调节胆囊运动,其水平升高,会减少胰腺消化酶的分泌,加重胆结石病情;HMGB 1是炎症介质,能放大并维持炎症反应,且与肿瘤坏死因子等形成协调作用。随着胆囊损伤加重,血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平均呈逐渐上升趋势,复杂性胆石症水平高于单纯性患者,表明血清学指标能作为判断胆结石病情的生物学指标,是复杂性胆石症发生的危险因素。本研究结果还显示,联合检测灵敏度高于miR-122、HMGB 1、CCK-18(P<0.05),表明血清因子联合检测能显著提高诊断灵敏度,最大程度避免对单纯性、复杂性胆石症的误诊漏诊。综上,复杂性胆石症患者血清miR-122、HMGB 1、CCK-18水平显著升高,且为其危险因素,联合检测能提高诊断灵敏度,为临床早期治疗提供科学性依据。