石斛的组织培养技术及移栽探析

郭逸榴

摘    要：文章阐述了霍山米斛、天目山铁皮石斛和井冈山铁皮石斛3种石斛的组织培养技术和林下栽培技术，建立了

3种石斛优良品种的组培快繁体系，用不同培养基对3种石斛开展腋芽组织对芽的诱导试验、增殖试验和生根试验，并仿效石斛野外生长状态，用技术手段将石斛苗固定在湿地松等树皮较厚的大树上，尽量减少人工干预，使其自然生长，达到仿野生生长效果。

关键词：米斛；石斛；组织培养；移栽

文章编号：1005-2690（2023）05-0001-03       中国图书分类号：S682.31       文献标志码：B

石斛是我国名贵的珍稀药材，在民间有“救命仙草”的美誉，市场需求较大。经查相关资料发现，野生石斛经过多年被采掘，现已非常稀少，1987年被国家列为野生药材重点二级保护濒危植物，这与人们日益增长的需求相矛盾。为了响应《 “健康中国2023”规划纲要》，解决市场供需矛盾，研究石斛的组织培养技术及移栽方式至关重要。

1 试验目的

从安徽省霍山、浙江省天目山、江西省井冈山分别引进药效最佳的霍山米斛、抗寒能力较强的天目山铁皮石斛和井冈山本土野生铁皮石斛3个主要石斛品种进行组织培养快繁研究，建立3个石斛优良品种的组培快繁体系。在此基础上仿效石斛野外生长状态，用人工方式模拟野生石斛的生长环境，培育出无论形状还是品质都十分接近野生石斛的种植石斛[1]。欧成军（2020）[2]通过对比2种栽培模式发现，林下仿野生种植模式较棚内仿野生种植模式成活率高。本试验用技术手段将石斛苗固定在湿地松等树皮较厚的大树上，尽量减少人工干预，使其自然生长，达到仿野生生长效果。

霍山米斛是中国国家地理标志产品，主产于大别山区的安徽省霍山县，多生长在云霧缭绕的悬崖峭壁石缝隙间和参天古树上。霍山米斛能大幅度提高人体内SOD（延缓衰老的主要物质）水平，有极高的药用价值。

天目山铁皮石斛产于浙江省天目山，生长于海拔1 400 m左右的山地半阴湿岩石上，喜温暖湿润气候和半阴半阳的环境，属较耐寒石斛品种。该品种被列为中华九大仙草之首，药用价值极高。

井冈山野生铁皮石斛产于江西省井冈山深山，是江西省本土野生石斛品种，种源较稀有，生长于海拔1 600 m左右的山地半阴湿岩石上。经过长期的适应和自然选择，铁皮石斛在遗传上形成了独特的生命活动机制和生物活性成分。

2 材料与方法

预处理材料时，用接种刀割取健壮、无病虫害的枝条，去叶后用自来水冲洗表面灰尘，在超菌台上去除枝条上表皮，取节，每段节保留1个3～5 cm的芽点，放入玻璃瓶中用无菌水冲洗10 min。

消毒外植体时，准备75%乙醇、0.1%升汞和无菌水。用75%乙醇消毒后，再用无菌水在振荡器中洗3次，0.1%升汞消毒后用无菌水在振荡器中洗5次，之后把节段分为嫩、中、老3种，分别用升汞消毒6 min、8 min和10 min。

2.1 腋芽的生长试验

将消毒后3 cm左右的茎段滤净后接种至基本培养基MS中培养，如图1所示。试验品为3个品种各20个茎段，试验过程中并未发现异常，消毒过的腋芽均正常生长，因此腋芽生长选用MS培养基。

2.2 愈伤组织和芽的诱导

将高约1.5 cm的腋芽为1个增殖单位，接种至诱导愈伤组织和芽培养基中。试验品为3个品种各15个增殖单位。

从表1可以看出，天目山铁皮石斛和井冈山铁皮石斛用MBA 1.5/0.3效果更好，出芽较多，无变异。MBA 2/0.1基部虽膨大明显，但出现玻璃化情况不可逆转，MBA 1.5/0.1和1/2 MBA 2.0虽无玻璃化情况，但出芽没有MBA 1.5/0.3多，1/2 MBA 2.0出芽质量不高。霍山米斛使用MBA 1.5/0.1效果最佳，出芽多、芽型正常，相较于铁皮石斛而言，米斛更适合用激素稍低的培养基。

2.3 芽的增殖

将诱导出的芽团转入增殖培养基中，每4～5个芽组成一个团块，每30 d为一个续代，每次激素浓度视芽的情况降低或增加，保证芽的增殖率，维持较高的品质。

从表2可以看出，天目山铁皮石斛和井冈山铁皮石斛情况一样，用MBN 3/0.2效果最好，芽较多、质量好，生长明显，苗高且粗壮，叶片颜色正常，增殖率高。MBN 4/0.2芽多，但后期会出现玻璃化，叶片发黄，可能是激素太高，1代或2代后转用MBN 2/0.2叶片几乎没有发黄情况，株形较好，叶形正常。MBN 1/0.2和MBA 2/0.2虽叶片无发黄，苗粗壮，但芽稍少，增殖率不高。霍山米斛用MBN 2/0.2效果最佳，芽多，增殖率高，苗粗壮株形好。MBN 4/0.2和MBN 3/0.2分别为玻璃化情况较多和叶片发黄较多。MBN 1/0.2和MBA 2/0.2芽稍少，增殖率低，长高不明显。

2.4 根的诱导

挑出培养基里粗壮的单株，放入生根培养基里，15 d后观察，试验品为每个品种50个单株，如表3所示。生根培养基分别开展几种对比试验，参照MN 0.2，梯度MNA 0.2/0.2、MNA 0.2/0.4、MNI 0.2/0.2、MNI 0.2/0.4、1/2 MNA 0.2/0.2、1/2 MNI 0.2/0.2。综合分析，MNA 0.2/0.2生根较快较好，13 d左右萌动，35 d左右生根，生根率达到100%，根粗壮呈条状，移栽成活率高。用1/2MS生根期稍长且相对比较瘦弱，有个别根排列不齐，不利于移栽成活。

2.5 培养条件

试验过程中观察生长情况，扩繁培养条件为灯光照射8～10 h/d，温度为15～20 ℃，如图2所示。

2.6 种植方法

2.6.1 安装树体喷淋系统

对选择好的部分大树安装树体喷淋系统，具体方法是用1根水管从树下沿树干引至约5.5 m高处，水管在高处绕树1圈并固定好，其下开孔，水管外用遮阳网绕树1圈绑好，确保缓冲水流形成喷淋效果，既不冲散移植苗，又能灌溉移植苗。

2.6.2 移栽树体

对需进行仿野生培育移植的树建立喷淋系统，选用2～3年组培苗，朝树下倒着绕树1圈，用细麻绳绑住根部固定住，苗倒着种植方便固定根部且淋水时苗不易被冲散。麻布片不可绑太厚，绑1圈即可，否则遇到连续降水天气容易积水太多，导致烂根倒苗。之后用能储水、可降解的麻袋片裹住根部绑牢，无需加其他基质。

移栽前用0.05%甲基硫菌灵喷米斛苗和麻片。每圈移植苗数量视树的大小而定，与圈苗团间隔约5 cm左右，每圈苗间隔25～30 cm。从采摘难度、成本及安全考虑，最低苗圈离地约2 m，最高苗圈离地约5 m，每棵树视实际树况可绑苗4～8圈，如图3所示。

2.7 移栽管护

石斛喜润而畏湿、喜干而畏燥，春秋湿养、夏冬干养，壮苗湿养、弱苗干养，北方湿养、南方干养，通风湿养、不通风干养。铁皮石斛仿野生种植一般选择春季或秋季移栽，此时温度为13～24 ℃，适合铁皮石斛生长[3]。种植石斛后要充分喷淋，将湿度控制在70%左右，特别注意夏季高温天气需保持水分充足，应早晚浇水多次，充分淋透，若处于通风条件不好的地区，石斛苗宁干勿湿。

种植人员应选择郁闭度在70%以上、林地小环境湿度为80%的林地进行仿生种植。不可选择阳光暴晒下的树木，否则易造成石斛苗因干旱脱水而死亡，也不可选择有病虫害，尤其是白蟻为害的林地和林木，白蚁会啃食包裹石斛苗根部的麻布片、麻绳和石斛苗，导致未附着树皮内的石斛苗严重脱落或死亡。

3 结论与讨论

3种石斛快繁培养基的选择方式如下。腋芽生长可用MS基本培养基，诱导愈伤组织天目山铁皮石斛和井冈山铁皮石斛用MBA 1.5/0.3较好，霍山米斛用MBA 1.5/0.1较好；扩繁天目山铁皮石斛和井冈山铁皮石斛用MBN 3/0.2较好，霍山米斛用MBA 2/0.2较好，转代增殖系数达5～7倍；生根3种石斛用MNA 0.2/0.2较好，生根时间较短，生根率达95%以上。

仿生种植石斛的喷淋设施应力求完善，一是可保证石斛苗仿生种植的成活率，二是可降低人工淋水成本。仿生种植时石斛苗根部的麻布片不可裹太厚，1层即可，既可固定好石斛苗，又不会在梅雨季节造成积水。如裹太厚梅雨季节会造成根部积水，导致石斛苗烂根死亡。仿生种植的林地和林木选择至关重要，要充分考虑林地朝向、林地郁闭度、林地小环境湿度、林地和林木病虫害情况等，提升石斛仿生种植成活率，增加可采收年份，提高石斛鲜条、石斛鲜花的产量。仿生种植的林木尽量选择树皮较厚的品种，以湿地松最佳，其次为樟树。石斛苗的新根会逐渐长入树皮内吸收水分并固定在树上生长，之后可形成野生模式，不用人工管护。

（编辑：王雨荷）

参考文献：

［1］张丹丹.浅谈野生石斛和种植石斛的区别［J］.光明中医，2020，35（2）：277-279.

［2］欧成军.石斛属植物仿野生种植技术［J］.现代农业科技，2020（14）：118-121.

［3］舒杰.铁皮石斛的应用价值及林下仿野生栽培技术［J］.现代农业科技，2021（24）：61-69.