黔藿1号适宜采收期研究

2023-10-27 12:26刘红昌王紫贤陈文夫汪永平
农技服务 2023年10期
关键词:黄酮醇实生苗浸出物

雷 荣,邱 炼,刘红昌,3*,王紫贤,陈文夫,游 雪,赵 刚,汪永平

(1.毕节市中药材技术服务站,贵州 毕节 551799;2.贵州大学 农学院,贵州 贵阳 550025;3.贵州省药用植物繁育与种植重点实验室,贵州 贵阳 550025;4.贵州贵基生物医药有限公司,贵州 从江 557400)

箭叶淫羊藿Epimediumsagittatum(Sieb.et Zucc.)Maxim.为小檗科(Berberidaceae)淫羊藿属EpimediumL.植物[1],是淫羊藿药材的基原植物之一,以干燥叶入药,性温,味辛、甘,归肝、肾经,具有补肾阳,强筋骨,祛风湿的功效,常用于治疗肾阳虚衰,阳痿遗精,筋骨痿软,风湿痹痛,麻木拘挛等病症[2],生长于100~760 m 的疏林或竹林下、灌丛中或水沟边[3],是淫羊藿属分布较广的种,在我国安徽、江西、湖南、浙江、福建、湖北、广东、贵州、广西、陕西、四川、河南和重庆均有分布[4]。目前,箭叶淫羊藿药材野生资源遭到掠夺式采挖,野生资源濒临枯竭[5],致使药农开始使用淫羊藿有性繁殖苗或无性繁殖苗进行林下种植[6]、仿野生栽培[7]和人工栽培[8]。人工栽培的淫羊藿药材由于产地[9-11]、栽培方式[12]和采收期[13-14]不统一,导致其药材质量参差不齐;其栽培密度[15]、施肥量[16]、遮阴度[17]和采收期等不同,也会造成其产量和质量有差异。目前,鲜见关于淫羊藿同一品种不同种苗移栽后,不同采收时间的药材产量和质量变化报道。为此,对箭叶淫羊藿优良品种黔藿1号不同种苗(分株苗、根茎苗、实生苗)移栽,比较不同采收时间的药材产量及质量变化,旨在为生产中确定其适宜采收期提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验地概况

试验地位于贵州省从江县往洞镇高传村,为连续多年种植水稻的水稻田,属亚热带季风性气候,平均海拔670 m,年均温15.5 ℃,年均降雨量1 230 mm 左右,年日照时数1 080~1 249 h,无霜期280 d以上,土壤为沙壤土。

1.2 试验材料

材料为贵州贵基生物医药有限公司自选箭叶淫羊藿优良品种黔藿1号,药材基源经贵州大学植物鉴定中心鉴定为小檗科(Berberidaceae)淫羊藿属(Epimedium)植物箭叶淫羊藿(Epimediumsagittatum)。

仪器:高效液相色谱仪(Agilent 1260 infinity)、紫外可见分光光度计(T6 新世纪)、数显恒温水浴锅(HH-6)、箱式电阻炉(SX-5-12 型)、电子天平(AR224CN)、超声波清洗机(SB-5200DT)等。

试剂:淫羊藿苷对照品(批号:110737-201516,质量分数94.2%,购自中国食品药品检定研究院);色谱级甲醇、乙腈(质量分数≥99.9%);AR级甲醇、AR级乙醇等。

1.3 试验方法

于2019 年12 月分别采用无损伤、无病虫害且规格一致的实生苗、根茎苗和分株苗进行起厢栽培,厢宽1.5 m,厢距40 cm,厢高20 cm,种植株行距20 cm×30 cm。自2020年4 月初开始对移栽后长势大体一致的实生苗、根茎苗和分株苗进行定株挂牌,每次采样以15株为1个重复,重复3次。每隔15 d取样1 次,共采样16 次。采收后于105 ℃下杀青15 min,55 ℃烘干至恒重,粉碎,过三号筛,置于干燥器中保存,备用。参照2020版《中国药典》一部和四部测定鲜重、干重、水分、总灰分、浸出物、总黄酮和总黄酮醇苷等指标[18]。利用不同种苗移栽后干重产量与总黄酮醇苷含量计算总黄酮醇苷产量进行综合评价,即总黄酮醇苷产量=干重产量×总黄酮醇苷含量。

1.4 数据分析

采用 Microsoft Excel 2010 和DPS 9.01进行数据处理与统计分析。

2 结果与分析

2.1 不同种苗不同采收时间的药材产量

2.1.1 分株苗不同采收时间的鲜重、干重及折干率 随着植株生长发育时间的延长,移栽后药材的鲜重和干重呈M 形变化,在8 月8日和10 月23 日有2 个明显的高峰期。4—6月,分株苗植株正处于萌芽展叶期,其鲜重和干重均较低,随着生育期后移,鲜重和干重均逐渐上升,8 月8 日前后到达第1 个高峰期,而后有所下降,其原因与此阶段雨水偏少和天气干旱有关,从而导致土壤墒情较差,10月23日前后达到第2 个高峰期,鲜重、干重产量分别为48.19 kg/667m2、21.84 kg/667m2,比8 月8 日分别上升15.54%、26.17%(图1)。折干率随着生育时间的延长,总体呈逐渐升高的趋势,在10 月23 日达到最大值(45%)(图1)。

图1 黔藿1号分株苗不同采收时间的鲜重、干重和折干率变化

2.1.2 根茎苗不同采收时间的鲜重、干重及折干率 4—6 月,根茎苗植株正处于萌芽展叶期,其鲜重和干重产量均较低,基本呈直线增长。7—11 月呈现波动上升趋势,8 月8 日有明显的下降趋势,这可能与此阶段的降雨少有关,10 月23 日后药材的鲜重和干重均达最大值,其产量分别为38.20 kg/667m2、17.36 kg/667m2(图2)。折干率随着生育期的后移,呈现先升后降的趋势,4 月初叶片折干率最低,为0.23%;11 月上旬折干率最高,为0.51%。

图2 黔藿1号根茎苗不同采收时间的鲜重、干重和折干率

2.1.3 实生苗不同采收时间的鲜重、干重及折干率 随着生育时间的延长,实生苗植株的鲜重和干重呈上升趋势,4—5月鲜重和干重增幅较大,6—10月趋于平缓,11月8日鲜重和干重增加且出现峰值,11月下旬开始下降。移栽后在4 月6 日采收的药材鲜重和干重最低,为5.12 kg/667m2和1.46 kg/667m2;6—10月的鲜重和干重为16.57~24.32 kg/667m2和7.59~10.41 kg/667m2;11月8日鲜重和干重分别为33.10 kg/667m2、12.28 kg/667m2,分别是4月6日的6.5倍和8.4倍(图3);药材的折干率在4—5 月较低,为0.27%~0.36%;6—11月折干率较高,为0.41%~0.47%,其中10月23日最高,是4月6日的1.47倍(图3)。

图3 黔藿1号实生苗不同采收时间的鲜重、干重和折干率

2.2 不同种苗不同采收时间的药材质量

2.2.1 分株苗不同采收时间的药材质量

2020 版《中国药典》一部规定,淫羊藿药材水分不得超过12.0%,总灰分不超过8.0%,浸出物不少于15.0%,总黄酮大于5.0%,总黄酮醇苷大于1.5%。从表1 可知,分株苗不同采收时间黔藿1 号的水分含量为2.46%~5.31%,4 月6 日采收的水分含量最低,10 月23日采收的水分含量最高,各采收时间黔藿1号的水分含量均合格;总灰分含量为4.59%~7.93%,4 月6 日采收的总灰分含量最低,11 月23 日采收的总灰分含量最高,各采收时间黔藿1号的总灰分含量均合格;浸出物含量为25.56%~39.50%,8 月23 日采收的浸出物含量最高,是2020 版《中国药典》一部规定的2.6倍,其余各采收时间浸出物含量也高于2020 版《中国药典》一部的规定值,各采收时间黔藿1号的浸出物含量均合格;总黄酮含量为8.73%~16.87%,5 月23 日采收的总黄酮含量最高,是2020 版《中国药典》一部规定的3.37倍,5月23日和6月8日采收的总黄酮含量显著高于其余采收时间的总黄酮含量,其余各采收时间的总黄酮含量也高于2020 版《中国药典》一部的规定值,各采收时间黔藿1号的总黄酮含量均合格;总黄酮醇苷含量为6.99%~13.30%,各采收时间黔藿1号的总黄酮醇苷含量均合格。4—6 月黔藿1号的总黄酮醇苷含量逐渐升高,在6 月8 日达到最高,与其余采收时间存在显著差异,之后总黄酮醇苷含量开始降低。综上所述,分株苗移栽后各采收时间黔藿1 号的水分、总灰分、浸出物、总黄酮及总黄酮醇苷含量均合格,符合2020版《中国药典》一部规定。

表1 分株苗不同采收时间黔藿1号的质量成分含量%

2.2.2 根茎苗不同采收时间的药材质量

根茎苗不同采收时间黔藿1号的水分含量、总灰分含量、浸出物含量、总黄酮含量、总黄酮醇苷含量分别为2.29%~3.83%、4.61%~7.86%、26.65%~35.11%、9.54%~14.83%、7.33%~12.05%,各采收时间黔藿1号的水分、总灰分、浸出物、总黄酮、总黄酮醇苷含量均合格,其中8 月23 日采收黔藿1 号的浸出物含量最高,为35.11%,是2020 版《中国药典》一部规定的2.34倍,其余各采收时间浸出物含量也高于2020版《中国药典》一部的规定值;5月8日采收黔藿1号的总黄酮含量最高,为14.83%,是2020版《中国药典》一部规定的2.97倍,其余各采收时间总黄酮含量也高于2020版《中国药典》一部的规定值;4—6月采收黔藿1号的总黄酮醇苷含量逐渐升高,在6月23日达到最高,为12.05%,与7月8日无显著差异,与其余采收时间存在显著差异,之后总黄酮醇苷含量开始降低,8月6日又开始上升,8月23日达到第二个高峰,为9.85%,之后又开始下降,最终趋于平缓(表2)。

表2 根茎苗不同采收时间黔藿1号的质量成分含量%

2.2.3 实生苗不同采收时间的药材质量

实生苗不同采收时间黔藿1号的水分含量、总灰分含量、浸出物含量、总黄酮含量、总黄酮醇苷含量分别为2.68%~4.60%、4.78%~7.92%、27.88%~37.26%、8.57%~15.14%、6.94%~11.06%,表明不同采收时间黔藿1号的水分、总灰分、浸出物、总黄酮、总黄酮醇苷含量均合格,其中4—6月黔藿1号的总黄酮醇苷含量逐渐升高,在6月8日达到最高,为11.06%,与6月23日、7月8日两个采收时间无显著差异,与其余采收时间存在显著差异,之后总黄酮醇苷含量开始降低(表3)。

2.3 不同种苗不同采收时间黔藿1号的总黄酮醇苷产量

分株苗移栽后不同采收时间黔藿1 号的总黄酮醇苷产量为0.18~1.57 kg/667m2,平均为1.11 kg/667m2,不同采收时间的总黄酮醇苷产量从大到小依次为7 月8 日>10月23 日>8 月8 日>9 月23 日>6 月23 日=7月23 日>6 月8 日>11 月8 日>8 月23 日>9月8 日>10 月8 日>11 月23 日>5 月23 日>5 月8 日>4 月23 日>4 月6 日,7 月8 日采收的总黄酮醇苷产量最高,为1.57 kg/667m2。根茎苗移栽后不同采收时间黔藿1 号的总黄酮醇苷产量为0.12~1.44 kg/667m2,平均为0.91 kg/667m2,不同采收时间的总黄酮醇苷产量从大到小依次为10 月23 日>9 月8日>11 月23 日>9 月23 日>6 月23 日=11月8 日=10 月8 日>8 月23 日>7 月23 日>7月8日>6月8日>8月8日>5月23 日>5月8 日>4 月23 日>4 月6 日,10 月23 日采收的总黄酮醇苷产量最高,为1.44 kg/667m2。实生苗移栽后不同采收时间黔藿1 号的总黄酮醇苷产量为0.14~0.92 kg/667m2,平均为0.70 kg/667m2,总黄酮醇苷产量从大到小依次为6 月23 日>9 月8 日>6 月8 日>9月23 日>11 月8 日=8 月23 日>8 月8 日>10月23日>11月23日=7月8日>10月8日>7月23 日>5 月23 日>5 月8 日>4 月23 日>4月6 日,6 月23 日采收的总黄酮醇苷产量最高,为0.92 kg/667m2(表4)。

表4 不同种苗不同采收时间黔藿1号的总黄酮醇苷产量kg/667m2

2.4 不同种苗不同采收时间黔藿1号的产值

从表5可知,不同采收时间黔藿1号的产值存在差异,总体上分株苗>根茎苗>实生苗。分株苗、根茎苗和实生苗产值分别为172.80~1 746.94 元/667m2、110.14~1 389.06 元/667m2和117.06~982.40元/667m2,分株苗和根茎苗在10 月23 日采收时均达到最高产值(1 746.94元/667m2、1 389.06元/667m2),分别比4月6日采收时提高1 574.14元/667m2和1 278.92元/667m2;实生苗在11月8日采收时达到最高产值,为982.40元/667m2,比4月6日采收时提高865.34元/667m2(表5)。

表5 不同种苗不同采收时间黔藿1号的产值元/667m2

3 讨论与结论

箭叶淫羊藿优良品种黔藿1 号不同种苗移栽后不同采收时间的产质量差异较大,分株苗和根茎苗移栽后的药材产量较高,实生苗移栽后的药材产量较低。分株苗、根茎苗及实生苗移栽后的药材产量(产值)最高峰与质量最高峰不重合,通过任飞龙等[19]的方法,根据移栽后药材干重产量与总黄酮醇苷含量计算总黄酮醇苷产量进行综合评价,得出黔藿1 号分株苗、根茎苗及实生苗药材分别在7 月8 日、10 月23 日、6 月23 日采收可使总黄酮醇苷产量达到最大值(1.57 kg/667m2、1.44 kg/667m2和0.92 kg/667m2),但此时分株苗和实生苗的产值较低,在实际生产中药农认可度低,难以推广使用。通过比较分株苗、根茎苗及实生苗移栽后的药材产值,得出移栽后的分株苗和根茎苗在10 月23 日采收时药材产值最高,实生苗移栽后在11 月8日采收时的药材产值最高,且分株苗、根茎苗及实生苗移栽后在10 月下旬至11 月上旬采收时药材质量均符合2020 版《中国药典》规定,故认为黔藿1 号的适宜采收期为10 月下旬至11月上旬。

箭叶淫羊藿不同采收期黄酮类成分含量大多出现2个高峰,即生长初期或花期[4]。任飞龙等[19]认为2个含量高峰期分别是3月和5—6月。试验发现黔藿1号在6—7月出现总黄酮醇苷含量高峰,这与任飞龙等的观点基本一致;黔藿1号在10月下旬至11月上旬出现叶片干重的高峰,而任飞龙等认为高峰在8月31日,这可能是由于试验材料的品种、种植年限及试验地的生境等不同导致。本试验各采收时间的叶片鲜重和干重随着生育时间的延长呈M形,这可能是某一采样时期的采样植株偏大或偏小导致,但总体上仍呈上升趋势。目前,箭叶淫羊藿主要采用分株苗、根茎苗和实生苗进行栽培,试验探究黔藿1号不同种苗在不同采收时间药材产量和质量的变化特性,采用干重产量和质量进行综合评价,黔藿1号分株苗、根茎苗和实生苗在10月23日和11月8日的干重分别为16.94~21.84 kg/667m2、10.41~12.28 kg/667m2、14.66~17.36 kg/667m2,产值分别为1 354.94~1 746.94 元/667m2、1 172.54~1 389.06 元/667m2、832.54~982.40 元/667m2,总黄酮醇苷产量分别为1.25~1.53 kg/667m2、1.15~1.44 kg/667m2、0.78~0.85 kg/667m2,确定黔藿1号分株苗、根茎苗和实生苗的适宜采收期为10月下旬至11月上旬,可为黔藿1号药材的合理采收提供指导。

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