水产品中丁香酚检测方法研究进展

◎ 王安伟，吴礼丽，刘天密，林 毅，赖长胜，李秋月，张 燕

（1.海南省水产品质量安全检测中心，海南 海口 570100；2. 海南省技师学院食品系，海南 海口 570100）

随着人们生活水平的日益提高，消费者对于自身的健康问题越来越重视，对蛋白质等营养价值也越来越关注，水产品是人类重要的蛋白质来源，和畜类产品比较具有高蛋白、低脂肪的优点。伴随对水产品需求的不断增大，我国渔业近年发展迅速，根据《2021年全国渔业经济统计公报》，渔业经济总产值达到29 689.73 亿元，全国水产品总量达到6 690.29 万t，全国水产品人均占有量为47.36 kg[1]。

丁香酚主要用于抗菌、降血压，镇痛[2-4]，对罗非鱼、鲈鱼、虹彩鲨、泛海虾等[5]鲜活水产品具有良好的麻醉效果，普遍应用于水产品运输环节中。然而，过量使用会对人类有急性毒性、致癌性、致突性等风险，危害人们身体健康,美国将其列入第3 类致癌物[6]。

1 检测方法

近年，为了满足丁香酚药物残留的检测需要，研究人员研究出多种方法，主要有GC、GC-MS/MS、HPLC[7]、HPLC-MS/MS[8]等。

1.1 高效液相色谱法

高效液相色谱法具有分析速度快，分离效能高、高灵敏度等优点。禤开智等[9]建立了以200 nm 和290 nm 双波长检测水产品中丁香酚的含量，加标回收率为75.2%～98.6%，方法定量限为20 μg/kg。该方法操作简洁，有较高的灵敏度，对于水产品中丁香酚含量的检测具有较强的实用价值。

1.2 高效液相色谱-串联质谱法

高效液相色谱-串联质谱法是一种集高效分离和多组分定性、定量于一体的方法，该方法具有前处理方法相对简单，基质干扰小，方法灵敏度高等优点。倪峥飞[10]等以正己烷为溶剂，HLB 固相萃取小柱净化，外标法测定水产品中丁香酚残留量，结果表明，该方法定量限为2.5 μg /kg。加标回收率在77.6%～111.4%。钱振杰等以乙腈为提取剂，HLB固相萃取小柱净化，6 种丁香酚类化合物回收率为72.6%～109.2%，方法定量限为0.02 mg/kg。该方法满足水产品中丁香酚残留量的定性、定量检测要求。

1.3 气相色谱法

气相色谱法是利用气体做流动相，各组分从固定相中流出的时间不同，组分彼此分离，具有高效能、高灵敏度、高选择性、应用广泛、易操作等优点。顾倩[11]等建立了气相色谱法测定复方薄荷柳酯搽剂中麝香草酚和丁香酚的含量，回收率为99.75%，该方法具有良好的准确度和重复性，操作简单。

1.4 气相色谱-串联质谱法

气相色谱-串联质谱法是以气相色谱作为试样分离，将质谱作为在线检测手段进行定性、定量分析的技术，该技术具有非常高的灵敏度。翟文静[12]等以正己烷为提取剂，硅胶柱净化，内标法定量。结果表明，检出限为 2. 0 μg /kg，定量限为 5. 0 μg /kg，具有灵敏度高的特点，能满足水产品中丁香酚残留量的检测要求。陆添文等建立了养殖水产品中丁香酚的残留测定方法。该方法丁香酚检测限为 0. 05 μg /L，定量限为 0. 17 μg /L，回收率为98.5% ～101.6%，能够满足养殖水产品中丁香酚检测的需要。

1.5 化学发光酶联免疫分析法

王强[13]等通过偶联载体蛋白并免疫动物后获取丁香酚多克隆抗体。结果表明，该方法的半抑制浓度为1. 28 μg/L，检出限为0.11 μg /L。样品中丁香酚的加标回收率为76.6%～108%，与液相色谱－串联质谱法相比较，结果基本一致。

1.6 四极杆-飞行时间质谱法

四极杆-飞行时间质谱法是近年新兴的一种检测方法，主要是对动植物、食品、仪器设备等散发的挥发性有机物进行实时在线定性和定量分析，王强[14]等采用MSE 模式测定养殖水产品中丁香酚含量，回收率为83.2%～102%，检出限为 0.02 μg/L，定量限为 0.05 μg/L。该方法适用于养殖水产品中丁香酚含量的快速测定。邓颖等建立了分散固相萃取-气相色谱-四极杆-飞行时间质谱法，测定鲜鱼中 5 种酚类麻醉剂，方法检出限为 3.58～8.96 μg/kg, 定量限为8.46～19.85 μg/kg。该方法的回收率、灵敏度、重复性都可以满足水产品中丁香酚快速测定的要求。

2 结语

丁香酚对人体有急性毒性、致癌性风险，建立快捷、准确的分析方法测定水产品中的丁香酚具有十分重要的意义。近年，国内外在丁香酚的检测技术研发方面不断进步，检测方法不断优化，涌现了化学发光酶联免疫分析法、高效液相色谱法、高效液相色谱-串联质谱法、气相色谱-串联质谱法等技术。目前，气相色谱-串联质谱法是比较成熟的检测方法，具有检测限低、抗基质干扰、准确性和稳定性高的特点，较好地满足了水产品中丁香酚的检测要求。然而，因为仪器价格昂贵，基层的应用普及程度不高，不适合在县、乡检测机构推广应用。化学发光酶联免疫分析法因其检测速度快、成本低、仪器简单易携、灵敏度高、选择性强等优点，是未来县、乡2 级实验室常用的检测方法。四极杆-飞行时间质谱法操作简单、回收率好、灵敏度高、重复性好，是未来养殖水产品中丁香酚含量测定的一个重要的发展方向。