异构酶
- 食品安全菌生产蔗糖异构酶的研究进展
法的关键是蔗糖异构酶(SIase),该酶亦称异麦芽糖合酶、蔗糖α-葡萄糖基转移酶和海藻糖合酶。蔗糖异构酶主要通过微生物发酵获得,如非食品安全级菌株大肠杆菌(Escherichiacoli)、食品安全级菌株枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、解脂耶氏酵母(Yarrowialipolytica)、乳酸乳球菌(Lactococcuslactis)等。与非食品安全级菌株相比,食品安全级菌株不存在热原和内毒素等安全问题,其表达的酶制剂、抗体等可直接用于
生物学杂志 2023年5期2023-10-19
- 蔗糖异构酶在异麦芽酮糖生产中的研究进展
生物合成的蔗糖异构酶（sucrose isomerase，SIase，EC 5.4.99.11）将蔗糖分子中葡萄糖和果糖之间的α-1，2 糖苷键异构化为α-1，6 糖苷键形成异麦芽酮糖和α-1，1 糖苷键形成海藻酮糖[13]。因此，蔗糖异构酶是生物催化生成异麦芽酮糖和海藻酮糖最有效的生物酶制剂，通过蔗糖异构酶生物转化法实现异麦芽酮糖产业化受到人们越来越多的关注。作者综述了蔗糖异构酶的研究进展，详细介绍了SIase 的来源、三维结构、催化机制、理性改造和异源
食品与生物技术学报 2023年1期2023-03-09
- DNA拓扑异构酶基因PagTOP2b对银腺杨‘84K’生长发育的影响
8）DNA拓扑异构酶(DNA topoisomerase，TOP)是一类能够改变DNA拓扑结构的酶，在细胞的一系列基础生命活动如DNA复制、转录和染色体分离等过程中发挥着重要作用[1−2]。DNA拓扑异构酶在1971年被首次发现，命名为ω蛋白，即DNA拓扑异构酶Ⅰ，是大肠埃希菌Escherichia coli中能够特异性地将负超螺旋DNA解旋的一种拓扑异构酶[3−4]。根据DNA拓扑异构酶的功能和作用机制，可以将其分成Ⅰ型和Ⅱ型DNA拓扑异构酶，Ⅰ型TOP
浙江农林大学学报 2022年6期2022-12-07
- RPIA基因突变导致核糖-5-磷酸异构酶缺乏症1例并文献复习
核糖-5-磷酸异构酶缺乏症（Ribose 5-phosphate isomerase deficiency，RPID），是由2p11号染色体上RPIA基因突变导致的一种罕见的遗传性白质脑病，多为常染色体隐性遗传，该病目前无特异性诊断方法，可根据临床表现、头颅脑影像学、血串联质谱、尿气相色谱质谱检测及结合基因检测诊断。为提高对本病的认识，现回顾5例病例资料总结如下。1 病历资料1.1 一般情况及病史女，1岁9月，因“步态不稳”于2019年9月在安徽省儿童医院
安徽医药 2022年11期2022-10-25
- 酶法葡萄糖异构果糖的工艺
萄糖，经葡萄糖异构酶异构得到果葡糖浆，果葡糖浆分离结晶得到果糖；也可直接选用葡萄糖产品异构生成果葡糖浆，果葡糖浆分离结晶得到果糖；或者选用蔗糖水解生成果葡糖浆，果葡糖浆分离结晶得到果糖[9]。试验针对葡萄糖的异构工艺进行正交试验，并对异构过程进行实验室的模拟扩大试验，整个连续异构过程共异构20 kg葡萄糖液，同时该试验的设计过程可与蔗糖生产结晶果糖的试验[10]作为实验室小型生产果糖的生产工艺，构建一个完整的果糖生产架构体系。1 材料与方法1.1 主要材料
食品工业 2022年9期2022-10-21
- 淀粉样融合蔗糖异构酶活性包涵体的异源表达及酶学性质表征
前主要采用蔗糖异构酶转化蔗糖，再经过浓缩和结晶等步骤获得异麦芽酮糖[3-5]。现有蔗糖异构酶生产菌普遍产酶水平低，因此研究人员主要将蔗糖异构酶固载于水不溶性载体上，如以硅藻土为介质进行吸附固载[6]，利用海藻酸钠-羧甲基纤维素钠进行混合包埋，利用壳聚糖-戊二醛吸附交联、制备交联酶聚集体等手段将蔗糖异构酶制备成固定化酶[7]，以从反应体系中分离回收和再利用，从而降低异麦芽酮糖的生产成本。然而，制备固定化酶需要利用色谱法分离纯化大量可溶酶，并且需要载体材料和固
大连工业大学学报 2022年3期2022-07-02
- 蔗糖异构酶PalI在解脂耶氏酵母中的高水平表达及酶学性质表征
法中常用到蔗糖异构酶，蔗糖异构酶又被称作异麦芽酮糖合成酶，是一种葡萄糖基转移酶。该酶以蔗糖为底物进行异构化反应生成异麦芽酮糖和海藻酮糖两种主要产物，同时水解蔗糖生成葡萄糖和果糖为副产物[5]。但目前利用蔗糖异构酶进行蔗糖转化过程中仍存在诸如酶解副产物较多、多数蔗糖异构酶的表达系统为非食品级、蔗糖异构酶的表达水平及酶活性不高、蔗糖异构酶的稳定性不高等问题，这些问题严重阻碍了异麦芽酮糖的工业化生产与利用的进程[6-8]。解脂耶氏酵母(Yarrowialipol
大连工业大学学报 2022年2期2022-05-05
- 重组谷氨酸棒杆菌全细胞催化一步法合成高果糖浆
单胞菌中的木糖异构酶可以将葡萄糖异构化生成果糖。TSUMURA[14]和TAKASAKI等[15]先后发现了暗色产色链霉菌和白色链霉菌的葡萄糖异构酶，可以将葡萄糖异构化为果糖。已商业化的、用于HFS生产的葡萄糖异构酶，一般在60 ℃左右催化，转化率只能达到42%～45%，仅能用于HFS-42型高果糖浆的制备，要想获得HFS-55型高果糖浆，还需进行浓缩分离纯化操作[16]。BHOSALE等[16]发现，温度升高有利于葡萄糖异构化生成果糖，可以获得更高果糖浓
食品与发酵工业 2022年2期2022-02-22
- 定向进化植物乳杆菌和痤疮丙酸杆菌高产共轭亚油酸
前主要的亚油酸异构酶作用机理。Kishino等[18]首次确定了植物乳杆菌由三酶体系生产CLA；Yang Bo等[19]又对植物乳杆菌ZS2058的亚油酸异构酶三段基因mcra、dh、dc进行敲除，证明了由3 种组分亚油酸异构酶催化生产CLA的独特机制。Jenkins等[20]以碳标记的亚油酸（linoleic acid，LA）为示踪底物，得到亚油酸异构酶参与LA氢化的过程，LA先异构成CLA，最终产物为硬脂酸，证明CLA仅为该反应的中间产物。易错聚合酶链
食品科学 2021年12期2021-07-08
- 蔗糖异构酶PalⅠ-Cu2+纳米花固定化酶的制备及其结构、性能分析
剂［1］。蔗糖异构酶是一种高效的将蔗糖转换成异麦芽酮糖的生物酶试剂，其高效专一，转化效率高，但利用游离的蔗糖异构酶作用时，其易失活、不稳定、难以重复利用及效率低［2-3］。因此，一般选用将蔗糖异构酶进行固定化来解决这一问题。酶的固定化方法较多，主要有物理及化学法［4-5］，传统的固定化方法虽可提高酶的稳定性，但往往会导致酶活性的降低。近年来，酶的固定化载体材料已逐渐由高分子材料转向纳米材料［6-7］，因纳米材料拥有较大的表面积及巨大的空间结构，增加了酶的装
中国生物制品学杂志 2021年3期2021-03-20
- 异构酶在生物制造中的研究进展
211816)异构酶(isomerase)是七大酶类中的第五种，以EC5分类号命名，催化分子内的几何或者结构重排。可细分为差向异构酶(epimerase)、消旋酶(racemase)、互变异构酶(tautomerase)、变位酶(mutase)和顺反异构酶(cis-transisomerase)等。自然界常见的物质如氨基酸和糖类都可能存在同分异构体，其分子质量相同，仅仅是原子空间排布不一致。它们彼此间常可通过异构酶来实现转化，异构酶催化的反应即异构反应(i
食品与发酵工业 2021年5期2021-03-18
- 产葡萄糖异构酶菌株的筛选及酶学性质研究
074)葡萄糖异构酶(GIase)能将D-葡萄糖、D-木糖等转化为D-果糖、D-木酮糖等相应酮糖[1].它是工业上从淀粉大规模制备高果糖浆(HFCS)的关键酶[2-4]，其酶活的高低直接关系到高果糖浆的产量和生产成本.目前国产葡萄糖异构酶主要问题是酶学性质不理想，即酶活低，热稳定性差、耐受金属离子的能力差.葡萄糖异构酶大多数来自于细菌、放线菌，小部分来自真菌[5-6].因此，筛选和构建高生产性能的商业用葡萄糖异构酶一直是研究的热点.为获得高产葡萄糖异构酶的
中南民族大学学报（自然科学版） 2020年6期2020-12-22
- 肝素C5异构酶的表达优化及分子改造
优化·肝素C5异构酶的表达优化及分子改造王兵兵1,2，周正雄1,2，金学荣1,2，李江华1,2，史仲平1,2，康振1,21 江南大学 生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122 2 江南大学 生物工程学院 糖化学与生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122肝素和硫酸乙酰肝素是一类应用于临床抗凝血的糖胺聚糖。肝素葡萄糖醛酸C5异构酶(Heparosan-N-sulfate-glucuronate 5-epimerase，C5
生物工程学报 2020年7期2020-07-29
- 吸附交联法固定化蔗糖异构酶及其在异麦芽酮糖制备中的应用
生物合成的蔗糖异构酶（EC 5.4.99.11，sucrose isomerase，SIase）以蔗糖为底物酶转化生产异麦芽酮糖，催化作用反应式如图1。生物转化法主要有细胞转化法和酶转化法两种。细胞转化法是直接发酵菌体或将菌体固定化来转化蔗糖。生产强度低、菌体浓度低及易污染杂菌等问题是在利用细胞转化法生产异麦芽酮糖时无法避免的，而酶转化法一般不存在上述问题，所以目前一般是将蔗糖异构酶从微生物细胞中提取出来，再通过游离酶或固定化酶将蔗糖转化为异麦芽酮糖。相比
食品与生物技术学报 2019年4期2019-10-29
- 喜树碱及其衍生物的研究进展
，可以抑制拓扑异构酶在机体内的合成反应【1】。1966年，国外医药学专家通过对天然产物进行药理学筛选，发现喜树碱类物质具有良好的抗肿瘤活性。喜树碱最早发现于原产于我国本土植物喜树的枝干和树皮中，是传统中医治疗恶性肿瘤的活性物质。药物化学领域的专业研究人员当前已经结合喜树碱溶解度、抗癌活性及各种不良反应等情况合成出了许多结构相似的衍生物。这些结构相似的衍生物可以有效降低喜树碱自身的生物毒性，提高抗肿瘤疗效【2】。目前部分喜树碱类衍生物已经被批准上市，例如拓扑
新生代 2019年8期2019-10-28
- 印度合成新型化合物可杀死癌细胞
制与现有的拓扑异构酶1抑制剂类药物类似，但具有更强的杀灭癌细胞能力。拓扑异构酶1是一种对DNA復制起到至关重要作用的基础酶。它可与DNA分子结合形成一个复合物并裂解DNA的一条链，使DNA分子从螺旋状展开。当DNA分子展开后，拓扑异构酶1会重新加入被裂解的DNA链使其修复并复制。癌细胞增殖能力远超健康细胞， 其中产生的拓扑异构酶1数量也远超正常细胞，因此拓扑异构酶1可与DNA分子形成更多复合物。现有的拓扑异构酶1抑制剂类抗癌药物只能短暂困住这种复合物，约2
祝您健康 2019年7期2019-07-12
- 新型化合物有望成为癌细胞杀手
物比现有的拓扑异构酶1抑制剂类药物具有更强的杀灭癌细胞的能力。新喹啉衍生物针对抗癌功效的实验将交由印度科学培育协会完成。研究人员在实验室培育乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌和结肠癌等癌细胞系，用于对新合成化合物抑制拓扑异构酶1活性和杀死癌细胞的效果进行测试。结果显示，新喹啉衍生物可将拓扑异构酶1与DNA分子形成的复合物困住长达5个小时，抑制功效明显好于现有药物。参与研究的阿林达姆·塔卢克达尔博士表示：“当拓扑异构酶1和DNA处于分离状态，化合物不会与它们发生反应或结
祝您健康 2019年6期2019-06-03
- 蔗糖异构酶PalI包埋和交联固定化方法比较
LX3的蔗糖异构酶PalI，能够催化蔗糖生成83%的异麦芽酮糖(α-D-glucosylpyranosyl-1,6-D-fructofranose)和21%海藻酮糖(α-D-glucosylpyranosyl-1,1-D-fructofranose)[5]，故可以作为一种良好的异麦芽酮糖产生酶。在异麦芽酮糖生产中，核心问题为产物的纯化分离，使用游离酶进行生产发酵会增加产物分离难度，蔗糖异构酶的固定化成为解决问题的途径之一，但是近年来却少有相关成果的报道。
食品科学技术学报 2019年1期2019-01-17
- 印度合成新型化合物可杀死癌细胞
制与现有的拓扑异构酶1抑制剂类药物类似，但它们具有更强的杀灭癌细胞能力。拓扑异构酶1是一种对脱氧核糖核酸（DNA）复制至关重要的基础酶。它可与DNA分子结合形成一个复合物并裂解DNA的一条链，使DNA分子从螺旋状展开。当DNA分子展开后，拓扑异构酶1会重新加入被裂解的DNA链使其修复并复制。癌细胞增殖能力远超健康细胞，其中产生的拓扑异构酶1数量也远超正常细胞，因此拓扑异构酶1可与DNA分子形成更多复合物。现有拓扑异构酶1抑制剂类抗癌药物具有捕获上述复合物能
医药前沿 2019年32期2019-01-05
- 来源于Alicyclobacillus sp.A4葡萄糖异构酶的克隆表达及转化应用研究
糖化酶和葡萄糖异构酶的作用而生成的。高果糖浆相对于蔗糖具有甜度高、风味佳、溶解度高、价格低等优势［2］，因此成为目前主要的甜味剂，广泛应用于食品、医药等行业。近年来，国内外高果糖浆的需求量不断增加，日本年消耗食糖总量为250万t左右，而淀粉糖占其中的50% 以上；美国人均食糖消费69 kg/a，淀粉糖占38 kg/a 以上。我国由于大量外资食品企业的进入、食品工业的快速发展以及医药市场的大量开发，也极大地扩大了对高果糖浆产品的需求。根据果糖含量，目前市场上
生物技术通报 2018年11期2018-11-30
- DNA复制的酶学机理
2 DNA拓扑异构酶消除正超螺旋DNA拓扑异构酶的主要功能是消除正超螺旋。DNA复制过程中复制叉向前移动会积累巨大的张力，致使DNA分子的双螺旋变紧，即产生正超螺旋，阻碍了DNA的解旋和复制。DNA拓扑异构酶分为DNA拓扑异构酶Ⅰ和DNA拓扑异构酶Ⅱ，DNA拓扑异构酶Ⅰ断开一条DNA链上的磷酸二酯键，而DNA拓扑异构酶Ⅱ作用于两条DNA链上的磷酸二酯键，使单链或双链DNA片段适当旋转舒展DNA链，再连接磷酸二酯键，达到释放张力的目的。因此，DNA拓扑异构酶
生物学教学 2017年10期2017-08-20
- 海藻酸钠包埋法固定L-阿拉伯糖异构酶的研究
定L-阿拉伯糖异构酶的研究王静1，2，揣玉多2，汤卫华2，侯婷2（1.天津市轻工业化学研究所有限公司，天津300350；2.天津现代职业技术学院，天津300350）以海藻酸钠为载体，戊二醛为交联剂，对L-阿拉伯糖异构酶进行固定化。研究海藻酸钠浓度、氯化钙浓度、戊二醛浓度以及硬化时间等因素对固定化效果的影响。结果表明最佳固定化条件为：海藻酸钠浓度3.5%，氯化钙浓度3.0%，戊二醛浓度0.2%，硬化时间7 h，该条件下制备的固定化酶与游离酶相比，最适宜反应温
食品研究与开发 2017年16期2017-08-12
- 马铃薯淀粉制备高果糖浆工艺优化及品质评价
理，优化参数为异构酶用量6.5 mg/g，溶液pH值7.5，异构温度74℃，异构时间40 h；且异构化所得果糖含量的实测值为37.51%，与理论值的相对误差为1.49%，差异不显著。精制所得的高果糖浆甜味柔和，接近F42型高果糖浆产品要求。马铃薯淀粉；多酶体系；淀粉水解；葡萄糖异构化高果糖浆（High-fructose syrup）口感纯正、吸湿与保潮性好，是高甜度的淀粉糖，可以补充蔗糖供应量的不足，供糖尿病患者食用。高果糖浆因其具有以上独特的性能，被消费
农产品加工 2017年10期2017-06-29
- 共表达磷脂酶C促进葡萄糖异构酶在大肠杆菌中的胞外表达
酶C促进葡萄糖异构酶在大肠杆菌中的胞外表达姜 琪， 宿玲恰， 吴 敬， 陈 晟*（食品科学与技术国家重点实验室，江南大学，江苏 无锡 214122）磷脂酶C（PLC）能够水解细胞膜主要成分磷脂，使细胞膜通透性增强，从而能够释放出胞内物质。作者构建了PLC与天然胞内定位蛋白葡萄糖异构酶（GI）共表达的重组大肠杆菌，摇瓶发酵胞外上清液中GIC酶活达到3.4 U/mL，占胞外和胞内总酶活的93%，表明GIC成功实现了胞外表达。将胞外上清液中的GIC进行分离纯化和
食品与生物技术学报 2017年3期2017-05-03
- 蜡状芽孢杆菌CZ磷酸甘露糖异构酶基因的克隆表达及酶学性质研究
CZ磷酸甘露糖异构酶基因的克隆表达及酶学性质研究张 瑶,崔堂兵*,宋 妍(华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州 510006)将蜡状芽孢杆菌CZ中的磷酸甘露糖异构酶基因(pmi)进行克隆,并在大肠杆菌中进行异源表达。将PCR扩增得到的pmi基因与pET-22b(+)表达载体进行连接,转入大肠杆菌BL21(DE3)中,构建重组菌株BL21-pET22b(+)-pmi,并成功表达了重组磷酸甘露糖异构酶。结果显示:克隆得到pmi基因序列全长为948 bp,编
食品工业科技 2017年6期2017-04-14
- 葡萄糖6-磷酸异构酶在类风湿关节炎中的诊断价值
葡萄糖6-磷酸异构酶在类风湿关节炎中的诊断价值盖楠楠目的：分析葡萄糖6-磷酸异构酶(G6PI)在类风湿关节炎(RA)中的诊断价值。方法：选取125例RA患者作为研究对象,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测125例RA患者、67例其他风湿病患者、39例健康对照者的血清G6PI浓度，并作统计学分析；将RA患者的血清G6PI浓度与关节疼痛数、关节肿胀数、类风湿因子、血沉进行Spearman等级相关性分析。结果：经t或χ2检验，RA患者活动期血清G6PI浓度3
中国中西医结合外科杂志 2016年6期2017-01-03
- 分散泛菌蔗糖异构酶在大肠杆菌中的表达及发酵优化
术分散泛菌蔗糖异构酶在大肠杆菌中的表达及发酵优化刘军彤1，2，吴敬1，2，陈晟1，21 江南大学 食品科学与技术国家重点实验室，江苏 无锡 214122 2 江南大学 生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122刘军彤， 吴敬， 陈晟. 分散泛菌蔗糖异构酶在大肠杆菌中的表达及发酵优化. 生物工程学报， 2016， 32（8）: 1070-1080.Liu JT， Wu J， Chen S. Expression and produc
生物工程学报 2016年8期2016-09-13
- 植物乳杆菌P-8亚油酸异构酶基因的乳酸克鲁维酵母工程菌的构建
为重要。亚油酸异构酶（linoleate isomerase,LA）是一种能够催化亚油酸生成共轭亚油酸的酶，获得高活性的亚油酸异构酶是生产高活力、高纯度共轭亚油酸的瓶颈。许多微生物体内有亚油酸异构酶，但这些微生物大多是厌氧菌，直接用这些微生物发酵生产CLA，条件难以控制；LAI为胞内酶，产量低，且结合在细胞膜上，分离纯化困难，制约了酶法生产CLA。所以，利用基因工程手段构建高效表达亚油酸异构酶基因的工程菌株[2]来获得LAI显得尤为重要。前人构建的重组工程
饲料工业 2016年6期2016-01-09
- 重组蔗糖异构酶的制备及应用条件优化*
6-7］。蔗糖异构酶(EC 5.4.99.11)，也称异麦芽酮糖合酶，是生物法转化蔗糖生成异麦芽酮糖和海藻酮糖最合适的酶，该酶转化蔗糖的主产物是异麦芽酮糖，同时转化过程中伴随少量单糖(葡萄糖和果糖)的生成［8-14］。1995年，Ralf等人首次将来源于 Protaminobacter rubrum CBS 547.77的蔗糖异构酶在E.coli中进行了成功的表达［15］;2010年，Park等实现了Enterobacter sp.的蔗糖异构酶编码基因在L
食品与发酵工业 2015年5期2015-12-25
- 固定化葡萄糖异构酶的微波活化及其性质研究*
715)葡萄糖异构酶(Glucose isomerase，简称 GI)，能将D-木糖、D-葡萄糖、D-核糖等醛糖转化为相应的酮糖，是工业上大规模制备果葡糖浆的关键转化酶［1-2］。因果葡糖浆具有溶解度高、保湿性好、抗结晶性好及风味浓郁等特点，现作为甜味剂已逐步取代了蔗糖的地位［3-4］。随着果葡糖浆使用量增长，国内外市场上对葡萄糖异构酶的需求也在不断增加;然而葡萄糖异构酶在应用过程中存在酶活性低、再生困难、寿命短及价格昂贵等问题，极大地限制了其工业化应用，
食品与发酵工业 2015年8期2015-12-16
- 靶向抑制拓扑异构酶和端粒酶的钌配合物研究进展
)靶向抑制拓扑异构酶和端粒酶的钌配合物研究进展陈相巢晖＊计亮年＊(中山大学化学与化学工程学院生物无机与合成化学教育部重点实验室，广州510275)金属配合物抗肿瘤研究，尤其是铂类药物，已取得了相对令人瞩目的成功，但同时也面临着包括耐药性和毒副作用等诸多问题。近年来钌配合物作为新的抗癌药物引起了人们的注意。在非铂系药物中，金属钌配合物是最有前途的抗癌药物之一，国际上普遍认为钌和钌的配合物属于低毒性，容易吸收并在体内很快排泄。本文将着重介绍钌配合物与DNA结合
无机化学学报 2015年9期2015-12-01
- 稀有糖D-阿洛糖性质及生物法生产研究进展*
洛糖-6-磷酸异构酶(AlsI)，和D-阿洛酮糖-6-磷酸3-差向异构酶(AlsE)经过顺序酶反应，经由两个中间产物D-阿洛糖6-磷酸和D-阿洛酮糖6-磷酸，实现将 D-阿洛糖转化成 D-果糖-6-磷酸［7］。图2 D-阿洛糖膜转运和细胞内代谢示意图［8］Fig.2 Schematic illustration for the proposed membrane transport and intracellular metablolism of D-al
食品与发酵工业 2015年6期2015-11-20
- 固定化葡萄糖异构酶的研究进展
）固定化葡萄糖异构酶的研究进展金利群1，郭东京1，廖承军2（1.浙江工业大学生物工程研究所，浙江杭州310014；2.浙江华康药业股份有限公司，浙江衢州324302）高果糖浆作为一种天然甜味剂，被广泛应用于食品和饮料中。葡萄糖异构酶是生产高果糖浆的关键酶之一，是重要的工业用酶，其固定化技术十分成熟，被认为是固定化酶制剂的一个范本。主要介绍了葡萄糖异构酶及其固定化方法以及葡萄糖异构酶在高果糖浆生产中的应用。葡萄糖异构酶；固定化技术；高果糖浆前言高果糖浆（Hi
发酵科技通讯 2015年3期2015-11-20
- 模拟失重条件下成骨细胞核基质DNA拓扑异构酶Ⅱβ的改变
法。DNA拓扑异构酶是在DNA复制过程中必不可少的酶类，它同时也是一种核基质蛋白，即核基质结构上的固有成分[3]。本实验研究了DNA拓扑异构酶Ⅱβ(DNA TopoisomeraseⅡβ，TopoⅡβ)在模拟失重后的表达量与分布位置的变化，进而反映核基质的改变。材料和方法1 材料 出生3 d SD大鼠乳鼠12只，雄性(第四军医大学实验动物中心)，胎牛血清(四季青公司)，DMEM-F12/1：1培养基、双抗(Hyclone公司)，胰酶(Millipore公司
解放军医学院学报 2015年8期2015-04-11
- 葡萄糖异构酶基因的筛选、表达及酶学性质研究
014）葡萄糖异构酶基因的筛选、表达及酶学性质研究廖承军1，郑微2，黄建峰2，刘成龙2，柳志强2，程新平1，毛宝军1，陈德水1（1.浙江华康药业有限公司，浙江 衢州 324302；2.浙江工业大学生物工程研究所，浙江 杭州 310014）通过基因挖掘的方法从NCBI数据库中筛选得到一株嗜热的葡萄糖异构酶（GI）产生菌株Thermotoga petrophila RKU-1，化学合成该酶的基因并在大肠杆菌E.coli BL21（DE3）中进行可溶性表达。重组
发酵科技通讯 2015年4期2015-03-20
- 蛋白质二硫键异构酶的生物学功能研究进展*
校蛋白质二硫键异构酶的生物学功能研究进展*潘黎明、盛梦婷、黄子芮综述， 李俊明审校蛋白质二硫键异构酶由多种细胞分泌，在生物学代谢过程中具有重要作用，其与糖尿病缺血性心脏病、脑缺血性疾病、血栓性疾病、阿尔茨海默病、白血病、肿瘤等多种疾病的发生发展机制密切相关，现针对蛋白质二硫键异构酶的定义、功能及与相关疾病的关系做一论述。蛋白质二硫键异构酶；糖尿病缺血性心脏病；脑缺血性疾病；血栓性疾病；阿尔茨海默病；肿瘤近年来，医学各方面技术不断进步，越来越多的疾病能被及早
中国循环杂志 2015年1期2015-01-25
- 靶向抑制DNA拓扑异构酶的抗肿瘤药物研究
出了DNA拓扑异构酶(topoisomerase，Topo)，可通过催化作用改变DNA的拓扑结构［1］。研究发现，与正常细胞不同，拓扑异构酶在肿瘤细胞中表现出不受其他因素影响的高水平表达。因此抑制DNA拓扑异构酶的活性就能阻止肿瘤细胞快速增殖，进而诱导肿瘤细胞的凋亡及坏死。近年来，以DNA拓扑异构酶为靶点设计各类抑制剂，用作抗癌药物的研究已成为肿瘤化疗的重要途径。本文将对拓扑异构酶的结构、功能及以其为靶点的抗肿瘤药物研究进展进行介绍。1 DNA拓扑异构酶的
大学化学 2014年1期2014-09-18
- 分蘖洋葱查尔酮异构酶基因的克隆及表达载体的构建
分蘖洋葱查尔酮异构酶基因的克隆及表达载体的构建刘丹 吴凤芝（东北农业大学园艺学院，哈尔滨 150030）旨在得到分蘖洋葱查尔酮异构酶基因，探明该基因的功能。克隆查尔酮异构酶基因并构建了其超表达和干扰载体，以期得到用于研究查尔酮异构酶基因功能的表达载体。从分蘖洋葱叶片中克隆得到查尔酮异构酶基因cDNA 全长743 bp，GenBank登录号为KJ489062。结果显示，该基因633 bp的开放读码框编码210个氨基酸的多肽序列。将PCR 扩增克隆得到的分蘖洋
生物技术通报 2014年10期2014-03-21
- 环化小檗碱类似物A55的抗肿瘤活性及其机制研究
);DNA拓扑异构酶Ⅰ(Topgen);质粒pBR322DNA(Takara);兔抗人抗体p-ATM、r-H2AX和Cleaved Parp等抗体购自Cell Signal Technology公司。3．化合物对肿瘤细胞的抑制率及IC50的测定:在96孔板上孔接种不同的肿瘤细胞，24h后采用不同浓度的化合物进行增殖抑制实验。细胞增殖48h后，用50%三氯乙酸 (TCA)固定，并用SRB(0．4%)稀醋酸溶液染色。室温静置10min，未与细胞结合的SRB用1
医学研究杂志 2014年5期2014-01-29
- 微波处理对葡萄糖异构酶性质的影响
波处理对葡萄糖异构酶性质的影响胡国洲，张甫生，胡 鹏，陈光静，武菁菁，阚建全*（西南大学食品科学学院，重庆市农产品加工及贮藏重点实验室，农业部农产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室（重庆），重庆 400715）研究微波处理对葡萄糖异构酶酶活性、稳定性、动力学参数及构象的影响。结果表明：不同微波处理时间和微波处理功率对葡萄糖异构酶的活力都有着不同的影响。在7 0 ℃处理5 min条件下，当微波功率为30 0、400 W时，葡萄糖异构酶的相对酶活力分别增加14.
食品科学 2014年3期2014-01-18
- 果葡糖浆生产过程中甘露糖产生的研究
离交后。葡萄糖异构酶的来源较多，商业化的酶主要来源于Bacillus和streptomyces[2]，可以催化葡萄糖、果糖，木糖、木酮糖之间的异构反应。由于对葡萄糖异构酶的研究多集中在底物特异性及提高反应稳定性等方面，因而对副反应产物的报道很少。此外果糖、葡萄糖易在碱性条件下，由于旋光改变作用发生分子重排和降解，通过烯二醇作为中间物可以实现果糖、葡萄糖和甘露糖之间的互相转化[3-4]，此反应又称为Lobry de Bruyn-Alberda van Eke
食品与生物技术学报 2013年10期2013-11-09
- 苍白芽孢杆菌D-阿拉伯糖异构酶克隆表达及D-塔格糖制备
)D-阿拉伯糖异构酶(D-AI，EC5.3.1.3)，系统名称为D-阿拉伯糖醛-酮糖异构酶，催化D-阿拉伯糖(醛糖)异构为D-核酮糖(酮糖)[1]。苍白芽孢杆菌中的D-阿拉伯糖异构酶，不仅可以催化D-阿拉伯糖转化生成D-核酮糖，同时还可以催化D-半乳糖转化生成D-塔格糖(tagatose)[2]。D-塔格糖是一种在自然界中存在但较为稀有的天然六碳酮糖，是果糖的一种差向异构体[3]，相对分子质量180.16，甜度为蔗糖的92%，甜味特性与蔗糖相似，而产生的热
食品科学 2013年9期2013-08-07
- 阿拉伯糖异构酶的重组表达及性质研究
在L-阿拉伯糖异构酶催化下进行转化[12]。L-阿拉伯糖异构酶由araA 基因编码，参与L-阿拉伯糖的代谢。由于D-半乳糖和L-阿拉伯糖在三维结构上相似，见图1，因此L-阿拉伯糖异构酶还能催化D-半乳糖生成D-塔格糖[13]。该酶在用于生产D-塔格糖中具有很大商业价值[14]。图1 L-阿拉伯糖异构酶催化的反应Fig.1 In vivo and in vitro reactions catalyzed by AI本文采用DNA 重组技术构建了一株高表达L-
食品研究与开发 2013年11期2013-07-22
- 血清葡萄糖6-磷酸异构酶抗原、类风湿因子和第2代抗环瓜氨酸肽抗体对类风湿关节炎诊断价值的比较
葡萄糖6-磷酸异构酶(glucose-6-phosphate isomerase，GPI)抗原及抗GPI抗体与RA相关后，许多学者开始对这两种指标在RA中的诊断价值进行研究，然而结果不甚一致。本研究应用酶联免疫吸附法对北京协和医院风湿免疫科门诊就诊的126例RA患者和122例均存在不同程度的外周关节痛或关节炎的非RA患者的血清标本进行了GPI、RF和抗CCP2抗体检测，探讨GPI单独及联合检测对RA的诊断价值。对象和方法对象及分组RA组：126例RA患者，
中华临床免疫和变态反应杂志 2013年2期2013-04-09
- 喹诺酮类药物作用的生理和遗传分子机制分析
的两种Ⅱ型拓扑异构酶。就原核生物来说，Ⅱ型拓扑异构酶能够通过引入负超螺旋来实现调节 DNA拓扑结构的功能[1]。除古菌拓扑异构酶Ⅳ以外，Ⅱ型拓扑异构酶的其他类型都属于ⅡA型的拓扑异构酶的范畴，具有一级结构和蛋白结构上的同源性，然而作用却各异。topoisomeraseⅣ(拓扑异构酶Ⅳ)与DNA gyrase(DNA解旋酶)是细菌基因组一般编码的ⅡA型拓扑异构酶的两种类型。喹诺酮类药物主要靶向细菌的两种Ⅱ型拓扑异构酶，借助于对酶催化反应的干扰来达到杀菌的目的
中国实用医药 2013年4期2013-02-02
- 活化条件对固定化葡萄糖异构酶酶活的影响
用固定化葡萄糖异构酶进行异构化反应，得到果糖和葡萄糖的混合液即果葡糖浆，再经脱色，树脂处理，蒸发浓缩，得到42%的果葡糖浆[3]。为了方便储运及较高的稳定性，固定化葡萄糖异构酶的商品形态为干燥的颗粒，其中只含极少量的水，因此酶颗粒使用前需进行活化（水化）。活化过程就是用底物（葡萄糖浆）来使酶颗粒吸收水分，从而使酶发挥其催化功效[4]。关于葡萄糖异构酶的固定化方法、稳定性和葡萄糖异构化的研究很多，但是关于固定化葡萄糖异构酶活化的研究却尚未见报道[5-7]。本
食品研究与开发 2012年10期2012-12-03
- 喹诺酮类药物作用的生理和遗传的分子机制
在细菌Ⅱ型拓扑异构酶上发生作用，然而杀菌的途径或许会由于修饰基团各异。笔者分析了喹诺酮类的药物所具有的深层次的作用机制，得出喹诺酮类的药物存在特征各异两个作用阶段。这或许是各喹诺酮类的药物有着不同的杀菌效果的药动学方面的原因。1 喹诺酮类药物主要的靶点细菌的两种Ⅱ型拓扑异构酶是喹诺酮类药物主要的靶点。对原核生物而言，Ⅱ型拓扑异构酶借助于负超螺旋的引入使调节DNA拓扑结构的功能得以实现［1］。除古菌的拓扑异构酶Ⅳ，别的Ⅱ型拓扑异构酶均为ⅡA型拓扑异构酶，存在
中国实用医药 2012年32期2012-10-26
- 固定化葡萄糖异构酶活化条件对其酶活的影响
)固定化葡萄糖异构酶活化条件对其酶活的影响胡 弢，周雪艳，赵国群(河北科技大学生物科学与工程学院，河北石家庄 050018)固定化葡萄糖异构酶在使用前需先进行活化，从而使酶发挥其最佳催化功效。本文从糖液浓度、温度、pH、活化时间和金属离子五个方面研究了活化条件对GENSWEETTMIGI－SA固定化葡萄糖异构酶酶活的影响。该酶的最适活化条件为:葡萄糖液浓度60%、温度55℃、pH 7.5、时间4h。经此条件活化之后，其酶活达815U/g，与常规活化条件相比
食品工业科技 2012年10期2012-10-24
- 维康醇对DNA拓扑异构酶活性的影响
楚。DNA拓扑异构酶（topoisomerase）参与DNA复制、转录、重组及修复等所有关键的细胞核内过程，是抗肿瘤研究的热点。本研究拟探讨维康醇对DNA拓扑异构酶活性的影响。1 材料与方法1.1 材料pBR322 DNA（产品号：D3050）、DNA 拓扑异构酶 Ⅰ（TopoⅠ）（产品号：D2240A）、ATP、（产品号：D4041）购自TaKaRa公司；DNA拓扑异构酶Ⅱα（TopoⅡα）（产品号：T8944-100UN） 购自 Sigma公司；10-
中国医科大学学报 2012年10期2012-09-07
- 拓扑异构酶Ⅰ抑制剂的结构精析
朱海梅 罗 勇 赵 明*(1.首都医科大学化学生物学与药学院多肽及小分子药物北京市重点实验室，北京 100069;2.首都医科大学附属安贞医院泌尿科，北京 100029)1 IntroductionThe action mechanism of drugs has been an interesting issue of people worked in pharmacy，chemistry，biology and medicine.Exploring t
首都医科大学学报 2012年3期2012-04-28
- 变异链球菌核糖-5-磷酸异构酶A的表达、纯化与鉴定
核糖-5-磷酸异构酶也叫D-核糖-5-磷酸乙酮醇异构酶，是自然界中广泛存在的一种高度保守的蛋白酶，参与原核和真核生物的糖代谢(如磷酸戊糖途径)，同时在植物二氧化碳固定的卡尔文循环中，它是催化5-磷酸核糖和5-磷酸核酮糖相互转变的关键酶［2-3］。这些代谢参与还原型辅酶Ⅱ(NADPH)的合成以及戊糖的氧化、非氧化合成［4］。有研究［5］表明，人类缺乏核糖-5-磷酸异构酶会引起髓鞘的损伤，从而导致诸如白质脑病以及包括周围神经病变等在内的神经元异常。核糖-5-磷
首都医科大学学报 2012年2期2012-01-25
- 上海药物所新型拓扑异构酶抑制剂研究取得新进展
拓扑异构酶 II（Topo II）抑制剂是一类重要的抗肿瘤药物。目前临床上使用的 Topo II 抑制剂存在着毒副作用大、易产生耐药性的缺点，而新型 Topo II 抑制剂的研发因化合物结构类型的局限进展缓慢。极端环境中的微生物因其独特的结构和生理机能，能够产生多种极端酶和生物活性物质，成为近年来受到广泛关注的抗肿瘤药物的重要资源。中国科学院上海药物研究所耿美玉课题组和中国海洋大学顾谦群课题组对从火山口沉积物来源的桔青霉 penicillium citri
中国医药生物技术 2011年5期2011-02-10
- 木糖异构酶序列结构特点、耐热机理及分子改造研究进展
10009木糖异构酶 (Xylose isomerase，Ⅺ) (EC 5.3.1.5)可以催化五碳糖D-木糖转化为D-木酮糖，在微生物体内的糖代谢过程中起着重要的作用；在体外亦能催化D-葡萄糖到D-果糖的异构化反应，所以又称为葡萄糖异构酶 (图 1)。木糖异构酶具有极其重要的工业应用价值，和蛋白酶、淀粉酶等并称为重要的工业用酶[1]，引起研究人员的关注并对其开展了较为广泛的研究。在基础研究方面，发现该酶的结构非常稳定，是研究蛋白质结构与功能关系优良模型之
生物工程学报 2011年12期2011-02-09
- 一株嗜热菌木糖异构酶的纯化与性质研究＊
张波,殷燕木糖异构酶 (xyloseisomerase,XI,EC 5.31.1.5),又称葡萄糖异构酶,此酶在细胞内可将五碳糖D-木糖转化为D-木酮糖,在微生物体内的糖代谢过程中起着重要的作用。在体外可转化葡萄糖形成果糖,并已经用于高果糖浆的工业生产,是一种重要的工业用酶。目前用于生产的木糖异构酶多来自Streptom yces,Actinoplanes,Flavobacterium等常温菌,其催化产物需要借助层析等浓缩步骤方可得到 55%的高果糖浆[1
食品与发酵工业 2011年3期2011-01-13
- 嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶的基因表达调控机制分析
酸乳杆菌亚油酸异构酶的基因表达调控机制分析陈士华1吴兴泉1张 慧1曹 健2(河南工业大学1，郑州 450001)(中原工学院2，郑州 450007)对嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶基因的启动子区进行了定位，证明该基因为单顺反子结构。分析该酶的代谢途径证明亚油酸异构酶单独处于一条分支途径，无其他的酶与之协同作用。分析四种乳酸菌亚油酸异构酶基因的上游调控区，发现了12个保守位点，可能在亚油酸诱导基因表达调控中起重要作用。确定该蛋白N端无信号肽存在，但在N端25(27)
中国粮油学报 2010年11期2010-11-04
- 密苏里游动放线菌葡萄糖异构酶基因xylA的克隆及其表达条件的优化
动放线菌葡萄糖异构酶基因xylA的克隆及其表达条件的优化王 贺1,2，杨瑞金2,*，华 霄2，钱婷婷1，张文斌2，蒋孝燕2(1.江南大学 食品科学与技术国家重点实验室，江苏 无锡 214122；2.江南大学食品学院，江苏 无锡 214122)为克隆、表达密苏里游动放线菌葡萄糖异构酶(GI)基因xylA，并对其诱导表达条件进行初步优化。采用Slowdown PCR方法克隆得到密苏里游动放线菌(Actinoplanes missouriensis)CICIM
食品科学 2010年15期2010-09-13
- 嗜酸乳杆菌的亚油酸异构酶基因克隆及其pMG36e表达载体的构建
细胞中的亚油酸异构酶 (linolenic acid isomerase,LAI)可催化亚油酸转化为共轭亚油酸的反应，并且反应产物均为活性共轭亚油酸异构体。亚油酸异构酶最早发现于溶纤维丁酸弧菌（Butyrivibrio fibrisolvens）中，之后，又发现痤疮丙酸杆菌（Propionibacterium acnes）、棒杆菌（Cornebacterium ssp）等能产生亚油酸异构酶。目前，有些菌种的亚油酸异构酶已被分离纯化。然而，这些菌种有些是厌氧
饲料工业 2010年20期2010-08-09
- 分子伴侣和异构酶合作机理揭开 可促进蛋白质正确的折叠活动
侣亚基能够增强异构酶的活性，两者功能的联合产生了高效的蛋白质折叠辅助作用。相关研究成果发表在近期的《美国国家科学院院刊》上。氨基酸链必须折叠成特定的空间结构，蛋白质才具有生物学功能。当一种蛋白质没有正确地折叠时，会导致很多种疾病，例如镰刀型细胞贫血症、疯牛病和老年痴呆症等。因此，蛋白质折叠问题也是生命科学领域的前沿课题之一，与人类健康密切相关。近年来的研究表明，特定的异构酶有促进蛋白质折叠的功能。其原因在于连接氨基酸的肽键有顺式和反式两种异构体，顺式肽键允
中国科技信息 2010年1期2010-02-14