反相高效液相色谱法测定心脉通分散片中葛根素的含量

心脉通分散片由当归、决明子、钩藤、牛膝、丹参、葛根、槐花、毛冬青、夏枯草、三七十味药组成，功能活血化瘀、通脉养心、降压降脂，用于高血压、高脂血症等。葛根为本品中主药之一，其所含葛根素具有降低血压、扩张冠脉、增加脑血流量及降低血管阻力等作用，因此我们采用高效液相色谱法测定本品中有效成分葛根素的含量，经方法学验证，表明本方法简便、快速、准确，可用于控制成品的质量。

1 仪器与试药

岛津高效液相色谱仪(包括SCL-10A VP控制器、LC-10AT VP泵、SPD-10A VP检测器、SIL-10AD VP自动进样器、DGU-14A脱气机、CTO-10AS VP柱温箱、CLASS-VP工作站)；KQ-250型超声波清洗器(昆山超声仪器有限公司)；Mettler M3电子天平；TG328A电光分析天平(上海天平仪器厂)；Lambda 12紫外分光光度计(美国P.E.公司)。

葛根素对照品(供含量测定用)，购于中国药品生物制品检定所，批号：752-200108。心脉通分散片，自制。甲醇为色谱纯，水为重蒸水。

2 方法与结果[1-5]

2.1 色谱条件

色谱柱：Hypersil BDS C18 5 μm，ID 4.6 mm×200 mm；流动相：甲醇-水(23∶77)；流速1.0 ml/min；检测波长：250 nm；柱温：30℃；进样量：5 μl。

2.2 对照品溶液的制备

取葛根素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 ml含65 μg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备

取本品，研细，取约1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率40kHz)45分钟，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜(0.45 μm)滤过，取续滤液，即得。

2.4 标准曲线的绘制

取葛根素对照品约8.5 mg，精密称定，置50 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，从中分别精密吸取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 ml置10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，从中分别精密吸取5 μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积对进样量进行线性回归，得回归方程为：y=20099+4758765x，r=0.9999。……