2株胞内分枝杆菌临床分离株的鉴定*

潘爱珍,张媛媛,王 心,赵秀芹,万康林

由于非结核分枝杆菌(Non-tuberculosis Mycobacterium,NTM)肺病与结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tuberculosis)引起的肺结核病的临床表现极为相似,容易造成误诊误治,而且非结核分枝杆菌病的发病呈逐年上升趋势〔1〕。因此分枝杆菌的快速准确菌种鉴定对结核病的诊断和鉴别诊断及有效化疗都有极其重要的意义。分子生物学技术鉴定菌种的方法虽有多种〔2〕,但如何联合应用多种分类鉴定方法,克服每项技术的局限性,进而形成标准化体系是未来快速鉴定菌种的趋势。我们在进行结核分枝杆菌临床分离株的oxyR-ahpC间隔耐药区的PCR检测的过程中,发现用PNB,TCH鉴别培养基鉴定为结核分枝杆菌的两株分枝杆菌临床分离株的PCR扩增产物的分子量明显大于结核分枝杆菌,而与胞内分枝杆菌相同,通过联合应用多种分子生物学技术和生物信息学技术对这两株菌株进行定种鉴定,最终确定为胞内分枝杆菌。并为探索新菌种鉴定的特异位点和菌种鉴定技术体系提供初步基础。

1 材料与方法

1.1 6株待鉴定分枝杆菌临床分离株 12个省市的285株(北京13株、福建106株、广西8株、西藏49株、四川 39株、河南19株、湖南 20株、吉林 7株、甘肃17株、新疆4株、陕西1株、浙江2株)临床分离菌株经PNB、TCH鉴别培养基初步鉴定为结核分枝杆菌。从这285株临床分离菌株选取6株,其中包括oxyR-ahpC基因间隔区PCR扩增产物分子量异常的2株和随机选取PCR扩增产物分子量正常的4株。

由中国疾病预防控制中心传染病预防控制所结核病研究室传代培养、保藏。……